| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23页 |
| 2．1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第23页 |
| 2．1．2 菌株和质粒 | 第23-24页 |
| 2．1．3 酶和生化试剂 | 第24页 |
| 2．1．4 PCR引物 | 第24页 |
| 2．2 实验方法 | 第24-44页 |
| 2．2．1 目的基因的获得 | 第25-31页 |
| 2．2．1．1 总RNA的提取 | 第25页 |
| 2．2．1．2 甲醛变性胶电泳 | 第25-26页 |
| 2．2．1．3 反转录cDNA第一链的合成 | 第26页 |
| 2．2．1．4 纯化及加尾 | 第26-27页 |
| 2．2．1．5 中间片段的获得 | 第27页 |
| 2．2．1．6 3′及5′RACE PCR | 第27-28页 |
| 2．2．1．7 全长目的基因的 PCR | 第28页 |
| 2．2．1．8 连接反应 | 第28页 |
| 2．2．1．9 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第28-29页 |
| 2．2．1．10 碱法小量提取质粒 DNA | 第29-30页 |
| 2．2．1．11 质粒DNA的酶切鉴定 | 第30页 |
| 2．2．1．12 序列测定 | 第30-31页 |
| 2．2．2 目的基因的表达分析 | 第31-34页 |
| 2．2．2．1 Northern杂交分析 | 第31-33页 |
| 2．2．2．2 半定量 RT-PCR检测 | 第33-34页 |
| 2．2．3 农杆菌介导的遗传转化 | 第34-44页 |
| 2．2．3．1 表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 2．2．3．2 根癌农杆菌GV3101感受态的制备及转化 | 第35-36页 |
| 2．2．3．3 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第36-38页 |
| 2．2．3．4 拟南芥的无土栽培、转化及分析 | 第38-40页 |
| 2．2．3．5 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第40-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-59页 |
| 3．1 水稻Osks基因的克隆 | 第44页 |
| 3．2 Osk1、Osk2、Osk3同源性比较及进化分析 | 第44-49页 |
| 3．2．1 Osk1、Osk2、Osk3同源性比较 | 第45-48页 |
| 3．2．2 Osk1、Osk2、Osk3进化树分析 | 第48-49页 |
| 3．3 水稻Osks基因表达分析 | 第49-51页 |
| 3．4 水稻Osks基因功能分析 | 第51-59页 |
| 3．4．1 Osk1基因功能分析 | 第51-55页 |
| 3．4．1．1 转Osk1拟南芥植株表型分析 | 第51-54页 |
| 3．4．1．2 转Osk1水稻植株表型分析 | 第54-55页 |
| 3．4．2 Osk2基因功能分析 | 第55-58页 |
| 3．4．3 Osk3基因功能分析 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-69页 |
| 4．1 Osks序列分析 | 第59页 |
| 4．2 Osks进化树信息 | 第59-60页 |
| 4．3 Osks表达模式与Osks功能的关系 | 第60-61页 |
| 4．4 Osks功能 | 第61-65页 |
| 4．4．1 Osk1功能 | 第61-63页 |
| 4．4．2 Osk2功能 | 第63页 |
| 4．4．3 Osk3功能 | 第63-65页 |
| 4．5 Skp1基因家族研究 | 第65-69页 |
| 4．5．1 Skp1基因家族成员研究策略 | 第65页 |
| 4．5．2 SKP1家族与进化 | 第65-66页 |
| 4．5．3 SKP1与F-box蛋白 | 第66-69页 |
| 5 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-81页 |
| 附录 | 第81-92页 |
| 附录一 表达载体的构建 | 第81-89页 |
| 附录二 Osks序列分析 | 第89-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
