论文摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
第一章 文献综述和论文立题 | 第14-39页 |
1 植物遗传转化技术进展 | 第14-17页 |
·植物基因直接转化系统 | 第14-17页 |
·农杆菌介导法 | 第17页 |
2 植物中转基因的整合机制 | 第17-22页 |
·转基因串联子的形成机制 | 第18-19页 |
·转基因整合中的重组热点问题 | 第19-20页 |
·异常重组是转基因整合的主要机制 | 第20-21页 |
·转基因在植物染色体中的存在方式 | 第21-22页 |
3 植物中转基因的遗传学行为 | 第22-26页 |
·外源基因在转基因当代(T_0)转化体中的整合的多样 | 第22-23页 |
·外源基因在转基因当代(T_0)转化体中的表达的多样性 | 第23-24页 |
·外源基因转基因植株中的遗传规律 | 第24-26页 |
·外源基因在转基因植株后代中表达的不确定性和基因沉默 | 第26页 |
4 植物中的MAR及其对转基因表达的效应 | 第26-32页 |
·植物MARs的分离鉴定 | 第27-28页 |
·植物MAR的序列特征 | 第28-29页 |
·MARs对植物中转基因表达的影响 | 第29-30页 |
·MAR作用的可能机制 | 第30-32页 |
·小结 | 第32页 |
5 植物中标记基因的安全性策略 | 第32-37页 |
·抗性标记基因的剔除技术 | 第32-35页 |
·安全性标记基因 | 第35-37页 |
6 论文的立题和研究内容 | 第37-39页 |
·论文选题意义 | 第37页 |
·论文研究内容 | 第37-39页 |
第二章 无载体主干序列的bar和cecropinB基因表达框转化水稻的研究 | 第39-53页 |
1 材料和方法 | 第39-44页 |
·实验材料 | 第39-40页 |
·基因结构 | 第40-41页 |
·转化方法 | 第41页 |
·PCR分析 | 第41-42页 |
·转化频率统计 | 第42页 |
·转基因植株的Southern blot分析 | 第42-44页 |
2 结果和分析 | 第44-50页 |
·愈伤组织的诱导、继代、转化和转基因植株的再生 | 第44-45页 |
·转基因植株的PCR分析 | 第45-46页 |
·不同DNA浓度bar基因表达框与完整质粒DNA对品种秀水04的转化频率比较 | 第46页 |
·bar基因和cecropinB基因表达框DNA浓度比对水稻转化频率的影响 | 第46-48页 |
·基因表达框和完整质粒在T_0代转基因水稻植株中整合模式的比较 | 第48-50页 |
3 讨论 | 第50-53页 |
·基因枪介导基因表达框转化水稻的影响因素 | 第50-51页 |
·完整质粒和基因表达框在T_0水稻基因组中的整合模式差异 | 第51-53页 |
第三章 基因枪介导的外源bar基因表达框在水稻基因组中的整合结构分析 | 第53-63页 |
1 材料和方法 | 第53-56页 |
·转基因材料 | 第53页 |
·bar基因表达框的结构、酶切位点及PCR引物位置 | 第53-54页 |
·bar基因表达框的Souhern分析 | 第54页 |
·PCR分析 | 第54页 |
·基因重组串联方式的分析原理 | 第54-56页 |
2 结果和分析 | 第56-60页 |
·bar基因表达框在水稻基因组内整合结构的Southern杂交分析 | 第56-58页 |
·bar基因表达框在水稻基因组内整合结构的引物组合PCR分析 | 第58-60页 |
3 讨论 | 第60-63页 |
·基因枪介导转化的外源基因在植物基因组中的整合机制 | 第60-62页 |
·基因枪转化后外源基因的整合机制的研究手段 | 第62-63页 |
第四章 bar和cecropinB基因表达框与完整质粒在转基因水稻中的遗传行为比较 | 第63-82页 |
1 材料和方法 | 第63-64页 |
·实验材料 | 第64页 |
·PCR分析 | 第64页 |
·转基因植株的Southern blot分析 | 第64页 |
·转基因植株后代的Basta抗性检测和bar基因的遗传分离规律统计 | 第64页 |
2 结果和分析 | 第64-79页 |
·bar基因表达框和完整质粒在T_0代转基因水稻植株中的整合模式比较 | 第64-65页 |
·bar基因表达框和完整质粒在水稻中的遗传分离行为比较 | 第65-74页 |
·bar基因表达框和完整质粒在水稻中整合模式的遗传比较 | 第74-77页 |
·基因表达框和完整质粒携带的非筛选基因cecropinB在水稻转基因植株中与筛选标记基因的共分离行为比较 | 第77-79页 |
3 讨论 | 第79-80页 |
4 结论 | 第80-82页 |
第五章 基因枪法介导基因表达框共转化水稻获得无任何垃圾DNA的安全转基因植株的新途径 | 第82-89页 |
1 材料和方法 | 第83-84页 |
·实验材料 | 第84页 |
·基因结构 | 第84页 |
·转基因植株的Southern blot分析 | 第84页 |
·转基因植株的PCR分析 | 第84页 |
·转基因植株的Basta抗性鉴定和cecropinB基因表达框的共遗传频率统计 | 第84页 |
·无bar标记基因的转cecropinB基因表达框植株的获得 | 第84页 |
2 结果和分析 | 第84-87页 |
·cecropinB和bar基因表达框在T_1代转基因植株中的共分离遗传行为 | 第84-85页 |
·bar基因去除和cecropinB基因表达框整合植株的获得 | 第85-87页 |
·无任何垃圾DNA的转cecropinB基因表达框水稻植株的Southern分析 | 第87页 |
3 讨论 | 第87-89页 |
第六章 cecropinB基因表达框与完整质粒的表达比较及转基因水稻植株的抗病性的表现 | 第89-97页 |
1 材料和方法 | 第90-91页 |
·材料 | 第90页 |
·方法 | 第90-91页 |
2 结果与分析 | 第91-95页 |
·cecropinB基因表达框与完整质粒的在mRNA水平的表达规律 | 第91-94页 |
·转基因水稻植株抗白叶枯病的表现及其与cecropinB基因在RNA水平表达量的关系 | 第94-95页 |
3 讨论 | 第95-97页 |
·外源基因在受体植株中表达的影响因素 | 第95-96页 |
·cecropinB在mRNA水平的表达和转基因植株的抗白叶枯病能力的关系 | 第96-97页 |
第七章 基因表达框和完整质粒转化对水稻基因组的突变效应 | 第97-110页 |
第一节 一个转基因水稻四倍体变异植株的初步鉴定及遗传分析 | 第97-103页 |
1 材料和方法 | 第97页 |
·材料 | 第97页 |
·方法 | 第97页 |
2 结果和分析 | 第97-101页 |
·四倍体转基因植株的农艺性状与二倍体转基因植株的比较 | 第98页 |
·四倍体植株外源bar和cecropinB基因的遗传行为和转基因二倍体的比较 | 第98-101页 |
3 讨论 | 第101-103页 |
第二节 转bar基因表达框水稻植株白化苗和低发芽率变异性状分析 | 第103-110页 |
1 材料和方法 | 第103-104页 |
·材料 | 第103页 |
·方法 | 第103-104页 |
2 结果和分析 | 第104-109页 |
·bar基因表达框在三个转基因植株中的整合拷贝和位点数 | 第104页 |
·转bar基因表达框水稻3个植株后代中Basta抗性的异常遗传分离 | 第104-106页 |
·转bar基因表达框植株自交后代种子的发芽率和白化苗频率分析 | 第106-109页 |
3 讨论 | 第109-110页 |
第八章 水稻中外源bar和cecropinB基因在自交世代和杂交转育中的遗传行为和表达规律 | 第110-124页 |
第一节 bar和cecropinB在转基因水稻自交高世代中的整合模式遗传和表达规律 | 第110-114页 |
1 材料与方法 | 第110-111页 |
·材料 | 第110页 |
·转化方法 | 第110页 |
·遗传分析 | 第110页 |
·Southern-blot和Northern-blot分析 | 第110-111页 |
2 结果与分析 | 第111-114页 |
·转基因遗传稳定性分析 | 第111-113页 |
·共转化基因连锁分析 | 第113页 |
·转基因稳定表达分析 | 第113-114页 |
3 讨论 | 第114页 |
第二节 水稻中的外源bar和cecropinB基因在杂交转育中的遗传和表达研究 | 第114-124页 |
1 材料和方法 | 第115-116页 |
·材料 | 第115页 |
·Southern-blot和Northern-blot分析 | 第115-116页 |
2 结果和分析 | 第116-122页 |
·bar和cecropinB基因在杂交转育中整合模式的遗传 | 第116-120页 |
·非筛选标记基因cecropinB在杂交转育中的mRNA表达研究 | 第120-122页 |
·外源基因在不同转基因供体植株杂交F_1代的整合模式和表达 | 第122页 |
3 讨论 | 第122-124页 |
·外源基因在杂交转育中整合模式的稳定性 | 第122-123页 |
·外源基因在杂交转育中的表达稳定性 | 第123-124页 |
研究结论 | 第124-125页 |
彩色图版 | 第125-128页 |
参考文献 | 第128-141页 |
附录: 读博期间发表的论文及成果 | 第141页 |