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基因枪介导转化的外源基因表达框和质粒在水稻中遗传和表达行为的比较研究

论文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
第一章 文献综述和论文立题第14-39页
 1 植物遗传转化技术进展第14-17页
   ·植物基因直接转化系统第14-17页
   ·农杆菌介导法第17页
 2 植物中转基因的整合机制第17-22页
   ·转基因串联子的形成机制第18-19页
   ·转基因整合中的重组热点问题第19-20页
   ·异常重组是转基因整合的主要机制第20-21页
   ·转基因在植物染色体中的存在方式第21-22页
 3 植物中转基因的遗传学行为第22-26页
   ·外源基因在转基因当代(T_0)转化体中的整合的多样第22-23页
   ·外源基因在转基因当代(T_0)转化体中的表达的多样性第23-24页
   ·外源基因转基因植株中的遗传规律第24-26页
   ·外源基因在转基因植株后代中表达的不确定性和基因沉默第26页
 4 植物中的MAR及其对转基因表达的效应第26-32页
   ·植物MARs的分离鉴定第27-28页
   ·植物MAR的序列特征第28-29页
   ·MARs对植物中转基因表达的影响第29-30页
   ·MAR作用的可能机制第30-32页
   ·小结第32页
 5 植物中标记基因的安全性策略第32-37页
   ·抗性标记基因的剔除技术第32-35页
   ·安全性标记基因第35-37页
 6 论文的立题和研究内容第37-39页
   ·论文选题意义第37页
   ·论文研究内容第37-39页
第二章 无载体主干序列的bar和cecropinB基因表达框转化水稻的研究第39-53页
 1 材料和方法第39-44页
   ·实验材料第39-40页
   ·基因结构第40-41页
   ·转化方法第41页
   ·PCR分析第41-42页
   ·转化频率统计第42页
   ·转基因植株的Southern blot分析第42-44页
 2 结果和分析第44-50页
   ·愈伤组织的诱导、继代、转化和转基因植株的再生第44-45页
   ·转基因植株的PCR分析第45-46页
   ·不同DNA浓度bar基因表达框与完整质粒DNA对品种秀水04的转化频率比较第46页
   ·bar基因和cecropinB基因表达框DNA浓度比对水稻转化频率的影响第46-48页
   ·基因表达框和完整质粒在T_0代转基因水稻植株中整合模式的比较第48-50页
 3 讨论第50-53页
   ·基因枪介导基因表达框转化水稻的影响因素第50-51页
   ·完整质粒和基因表达框在T_0水稻基因组中的整合模式差异第51-53页
第三章 基因枪介导的外源bar基因表达框在水稻基因组中的整合结构分析第53-63页
 1 材料和方法第53-56页
   ·转基因材料第53页
   ·bar基因表达框的结构、酶切位点及PCR引物位置第53-54页
   ·bar基因表达框的Souhern分析第54页
   ·PCR分析第54页
   ·基因重组串联方式的分析原理第54-56页
 2 结果和分析第56-60页
   ·bar基因表达框在水稻基因组内整合结构的Southern杂交分析第56-58页
   ·bar基因表达框在水稻基因组内整合结构的引物组合PCR分析第58-60页
 3 讨论第60-63页
   ·基因枪介导转化的外源基因在植物基因组中的整合机制第60-62页
   ·基因枪转化后外源基因的整合机制的研究手段第62-63页
第四章 bar和cecropinB基因表达框与完整质粒在转基因水稻中的遗传行为比较第63-82页
 1 材料和方法第63-64页
   ·实验材料第64页
   ·PCR分析第64页
   ·转基因植株的Southern blot分析第64页
   ·转基因植株后代的Basta抗性检测和bar基因的遗传分离规律统计第64页
 2 结果和分析第64-79页
   ·bar基因表达框和完整质粒在T_0代转基因水稻植株中的整合模式比较第64-65页
   ·bar基因表达框和完整质粒在水稻中的遗传分离行为比较第65-74页
   ·bar基因表达框和完整质粒在水稻中整合模式的遗传比较第74-77页
   ·基因表达框和完整质粒携带的非筛选基因cecropinB在水稻转基因植株中与筛选标记基因的共分离行为比较第77-79页
 3 讨论第79-80页
 4 结论第80-82页
第五章 基因枪法介导基因表达框共转化水稻获得无任何垃圾DNA的安全转基因植株的新途径第82-89页
 1 材料和方法第83-84页
   ·实验材料第84页
   ·基因结构第84页
   ·转基因植株的Southern blot分析第84页
   ·转基因植株的PCR分析第84页
   ·转基因植株的Basta抗性鉴定和cecropinB基因表达框的共遗传频率统计第84页
   ·无bar标记基因的转cecropinB基因表达框植株的获得第84页
 2 结果和分析第84-87页
   ·cecropinB和bar基因表达框在T_1代转基因植株中的共分离遗传行为第84-85页
   ·bar基因去除和cecropinB基因表达框整合植株的获得第85-87页
   ·无任何垃圾DNA的转cecropinB基因表达框水稻植株的Southern分析第87页
 3 讨论第87-89页
第六章 cecropinB基因表达框与完整质粒的表达比较及转基因水稻植株的抗病性的表现第89-97页
 1 材料和方法第90-91页
   ·材料第90页
   ·方法第90-91页
 2 结果与分析第91-95页
   ·cecropinB基因表达框与完整质粒的在mRNA水平的表达规律第91-94页
   ·转基因水稻植株抗白叶枯病的表现及其与cecropinB基因在RNA水平表达量的关系第94-95页
 3 讨论第95-97页
   ·外源基因在受体植株中表达的影响因素第95-96页
   ·cecropinB在mRNA水平的表达和转基因植株的抗白叶枯病能力的关系第96-97页
第七章 基因表达框和完整质粒转化对水稻基因组的突变效应第97-110页
 第一节 一个转基因水稻四倍体变异植株的初步鉴定及遗传分析第97-103页
  1 材料和方法第97页
   ·材料第97页
   ·方法第97页
  2 结果和分析第97-101页
   ·四倍体转基因植株的农艺性状与二倍体转基因植株的比较第98页
   ·四倍体植株外源bar和cecropinB基因的遗传行为和转基因二倍体的比较第98-101页
  3 讨论第101-103页
 第二节 转bar基因表达框水稻植株白化苗和低发芽率变异性状分析第103-110页
  1 材料和方法第103-104页
   ·材料第103页
   ·方法第103-104页
  2 结果和分析第104-109页
   ·bar基因表达框在三个转基因植株中的整合拷贝和位点数第104页
   ·转bar基因表达框水稻3个植株后代中Basta抗性的异常遗传分离第104-106页
   ·转bar基因表达框植株自交后代种子的发芽率和白化苗频率分析第106-109页
  3 讨论第109-110页
第八章 水稻中外源bar和cecropinB基因在自交世代和杂交转育中的遗传行为和表达规律第110-124页
 第一节 bar和cecropinB在转基因水稻自交高世代中的整合模式遗传和表达规律第110-114页
  1 材料与方法第110-111页
   ·材料第110页
   ·转化方法第110页
   ·遗传分析第110页
   ·Southern-blot和Northern-blot分析第110-111页
  2 结果与分析第111-114页
   ·转基因遗传稳定性分析第111-113页
   ·共转化基因连锁分析第113页
   ·转基因稳定表达分析第113-114页
  3 讨论第114页
 第二节 水稻中的外源bar和cecropinB基因在杂交转育中的遗传和表达研究第114-124页
  1 材料和方法第115-116页
   ·材料第115页
   ·Southern-blot和Northern-blot分析第115-116页
  2 结果和分析第116-122页
   ·bar和cecropinB基因在杂交转育中整合模式的遗传第116-120页
   ·非筛选标记基因cecropinB在杂交转育中的mRNA表达研究第120-122页
   ·外源基因在不同转基因供体植株杂交F_1代的整合模式和表达第122页
  3 讨论第122-124页
   ·外源基因在杂交转育中整合模式的稳定性第122-123页
   ·外源基因在杂交转育中的表达稳定性第123-124页
研究结论第124-125页
彩色图版第125-128页
参考文献第128-141页
附录: 读博期间发表的论文及成果第141页

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