| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第8-20页 |
| 1．1 mRNA差异显示技术原理及实验程序 | 第8-10页 |
| 1．2 mRNA差异显示技术的优越性 | 第10-11页 |
| 1．3 mRNA差异显示技术的缺陷 | 第11-12页 |
| 1．4 mRNA差异显示技术的改进 | 第12-16页 |
| 1．5 差异显示所用的标记 | 第16页 |
| 1．6 差异显示的标记方法 | 第16-17页 |
| 1．7 差异显示产物的凝胶分析 | 第17页 |
| 1．8 真假阳性克隆的鉴定 | 第17-20页 |
| 1．9 本课题的研究意义 | 第20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-27页 |
| 2．1 供试材料 | 第20页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第20页 |
| 2．1．2 试剂 | 第20页 |
| 2．2 试验方法 | 第20-27页 |
| 2．2．1 脱毒果蔗与未脱毒果蔗带毒情况的检测 | 第20-21页 |
| 2．2．2 总RNA提取 | 第21-23页 |
| 2．2．2．1 异硫酸氰胍法 | 第21-22页 |
| 2．2．2．2 Trizol Reagent（GIBCO／BRL）提取法 | 第22-23页 |
| 2．2．3 RNA甲醛变性琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
| 2．2．3．1 试剂的准备 | 第23页 |
| 2．2．3．2 电泳 | 第23页 |
| 2．2．4 RNA制剂中微量染色体DNA的去除 | 第23-24页 |
| 2．2．5 第一链cDNA的合成 | 第24页 |
| 2．2．6 DD-PCR产物的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第24-25页 |
| 2．2．6．1 DD-PCR | 第24-25页 |
| 2．2．6．2 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第25页 |
| 2．2．6．2．1 灌胶 | 第25页 |
| 2．2．6．2．2 上样 | 第25页 |
| 2．2．6．2．3 电泳 | 第25页 |
| 2．2．6．2．4 干燥 | 第25页 |
| 2．2．7 扫描 | 第25-26页 |
| 2．2．8 胶的回收 | 第26页 |
| 2．2．9 PCR重扩增 | 第26页 |
| 2．2．10 琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
| 2．2．11 琼脂糖胶的回收 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-38页 |
| 3．1 mRNA差异显示反应体系的建立 | 第27-28页 |
| 3．2 总RNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第28-29页 |
| 3．3 差异显示体系优化 | 第29-32页 |
| 3．4 两种供试材料基因转录水平差异分析结果 | 第32-37页 |
| 3．5 cDNA片段的二次扩增 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 4．1 关于荧光标记差异显示的优越性 | 第38-39页 |
| 4．2 关于差异显示实验条件 | 第39-40页 |
| 4．3 关于二次扩增 | 第40页 |
| 5 结论 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 缩写词 | 第48-49页 |
| 附录 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |