缩略语中英文对照表 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
第一章 绪论 | 第11-37页 |
第一节 抗菌肽的研究进展 | 第12-20页 |
第二节 鱼类抗菌肽的研究 | 第20-24页 |
第三节 含半胱氨酸抗菌肽的研究 | 第24-32页 |
第四节 抗菌肽基因工程及应用前景 | 第32-34页 |
第五节 本研究的技术路线、目的和意义 | 第34-37页 |
第二章 石斑鱼hepcidin cDNA基因的扩增 | 第37-61页 |
第一节 材料与方法 | 第37-49页 |
·材料 | 第37-41页 |
·实验方法 | 第41-49页 |
·生物信息学分析序列 | 第49页 |
第二节 结果 | 第49-57页 |
·总RNA的提取 | 第49页 |
·RT-PCR结果 | 第49-51页 |
·石斑鱼5‘RACE和3’RACE结果 | 第51-54页 |
·石斑鱼肝脏全长cDNA序列的拼接 | 第54页 |
·石斑鱼肝脏hepcidin基因ORF的RT-PCR扩增 | 第54-56页 |
·石斑鱼hepcidin cDNA基因编码氨基酸序列的性质分析 | 第56-57页 |
第三节 讨论 | 第57-61页 |
第三章 石斑鱼hepcidin基因组DNA及5′和3′侧翼片段扩增 | 第61-72页 |
第一节 材料与方法 | 第61-64页 |
·材料 | 第61-62页 |
·实验方法 | 第62-64页 |
第二节 结果 | 第64-68页 |
·基因组提取及酶切 | 第64页 |
·基因组DNA 编码区片段的扩增 | 第64-66页 |
·基因组上下游片段的扩增及序列分析 | 第66-68页 |
第三节 讨论 | 第68-72页 |
第四章 石斑鱼hepcidin的原核表达载体的构建及表达 | 第72-86页 |
第一节 材料与方法 | 第72-79页 |
·材料 | 第72-74页 |
·实验方法 | 第74-79页 |
第二节 结果 | 第79-82页 |
·预连接pTrc-CKS表达载体制备 | 第79页 |
·石斑鱼Hepcidin表达目的片段的扩增及重组菌落的PCR鉴定 | 第79页 |
·融合表达载体的构建及测序结果分析 | 第79-81页 |
·pTrc-CKS/石斑鱼Hepcidin重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第81-82页 |
第三节 讨论 | 第82-86页 |
第五章 原核表达融合蛋白的纯化和抗菌活性的测定 | 第86-96页 |
第一节 材料与方法 | 第86-89页 |
·材料 | 第86-87页 |
·实验方法 | 第87-89页 |
第二节 结果 | 第89-93页 |
·石斑鱼Hepcidin融合表达产物的纯化 | 第89页 |
·纯化表达产物的脱盐 | 第89页 |
·纯化融合表达蛋白的浓度 | 第89-91页 |
·纯化融合表达目的蛋白的纯度鉴定和酶切效果分析 | 第91页 |
·表达产物抗菌活性测定 | 第91-93页 |
第三节 讨论 | 第93-96页 |
第六章 结论 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-108页 |
在学期间参加的科研项目 | 第108-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
作者简介 | 第110页 |