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石斑鱼抗菌肽Hepcidin基因的克隆、表达与抗菌活性研究

缩略语中英文对照表第1-7页
中文摘要第7-9页
英文摘要第9-11页
第一章 绪论第11-37页
 第一节 抗菌肽的研究进展第12-20页
 第二节 鱼类抗菌肽的研究第20-24页
 第三节 含半胱氨酸抗菌肽的研究第24-32页
 第四节 抗菌肽基因工程及应用前景第32-34页
 第五节 本研究的技术路线、目的和意义第34-37页
第二章 石斑鱼hepcidin cDNA基因的扩增第37-61页
 第一节 材料与方法第37-49页
   ·材料第37-41页
   ·实验方法第41-49页
   ·生物信息学分析序列第49页
 第二节 结果第49-57页
   ·总RNA的提取第49页
   ·RT-PCR结果第49-51页
   ·石斑鱼5‘RACE和3’RACE结果第51-54页
   ·石斑鱼肝脏全长cDNA序列的拼接第54页
   ·石斑鱼肝脏hepcidin基因ORF的RT-PCR扩增第54-56页
   ·石斑鱼hepcidin cDNA基因编码氨基酸序列的性质分析第56-57页
 第三节 讨论第57-61页
第三章 石斑鱼hepcidin基因组DNA及5′和3′侧翼片段扩增第61-72页
 第一节 材料与方法第61-64页
   ·材料第61-62页
   ·实验方法第62-64页
 第二节 结果第64-68页
   ·基因组提取及酶切第64页
   ·基因组DNA 编码区片段的扩增第64-66页
   ·基因组上下游片段的扩增及序列分析第66-68页
 第三节 讨论第68-72页
第四章 石斑鱼hepcidin的原核表达载体的构建及表达第72-86页
 第一节 材料与方法第72-79页
   ·材料第72-74页
   ·实验方法第74-79页
 第二节 结果第79-82页
   ·预连接pTrc-CKS表达载体制备第79页
   ·石斑鱼Hepcidin表达目的片段的扩增及重组菌落的PCR鉴定第79页
   ·融合表达载体的构建及测序结果分析第79-81页
   ·pTrc-CKS/石斑鱼Hepcidin重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达第81-82页
 第三节 讨论第82-86页
第五章 原核表达融合蛋白的纯化和抗菌活性的测定第86-96页
 第一节 材料与方法第86-89页
   ·材料第86-87页
   ·实验方法第87-89页
 第二节 结果第89-93页
   ·石斑鱼Hepcidin融合表达产物的纯化第89页
   ·纯化表达产物的脱盐第89页
   ·纯化融合表达蛋白的浓度第89-91页
   ·纯化融合表达目的蛋白的纯度鉴定和酶切效果分析第91页
   ·表达产物抗菌活性测定第91-93页
 第三节 讨论第93-96页
第六章 结论第96-97页
参考文献第97-108页
在学期间参加的科研项目第108-109页
致谢第109-110页
作者简介第110页

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