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拟南芥AT14A蛋白介导细胞壁合成及其在响应干旱胁迫中的功能

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
中英文对照词第13-15页
第一章 文献综述第15-29页
   ·整合素蛋白第15-19页
     ·整合素蛋白的结构与功能第16-17页
     ·整合素蛋白的活化机制第17-19页
   ·植物类整合素蛋白的研究进展第19-23页
     ·植物类整合素蛋白存在与组织和细胞学定位第19-20页
     ·植物类整合素蛋白的功能第20-21页
     ·植物类整合素蛋白的研究展望第21-23页
   ·植物细胞壁的构成与功能第23-27页
     ·细胞壁的结构第23-25页
     ·细胞壁的功能第25-26页
     ·细胞壁的研究热点第26-27页
   ·结语第27-29页
第二章 AT14A 过表达和互补转基因植株及相关悬浮细胞培养体系的建立第29-41页
   ·引言第29-30页
   ·材料与方法第30-34页
     ·材料第30-31页
       ·植株材料第30页
       ·试剂(盒)第30页
       ·培养基第30页
       ·主要仪器第30-31页
     ·方法第31-34页
       ·拟南芥编码转AT14A 基因的TOPO 克隆第31-32页
         ·拟南芥叶片总RNA 的目的提取第31页
         ·第一链cDNA 的合成第31页
         ·AT14A 序列的PCR 扩增第31页
         ·PCR 产物的回收第31页
         ·目的片段与克隆载体的连接第31页
         ·重组质粒的转化第31页
         ·阳性克隆的PCR 鉴定第31-32页
       ·转AT14A-GFP 融合基因的双元载体的构建第32页
         ·重组质粒与表达载体质粒的小量提取第32页
         ·转AT14A-GFP 融合基因的双元载体的构建第32页
         ·根癌农杆菌阳性克隆的目的基因序列的PCR 鉴定第32页
         ·根癌农杆菌阳性克隆的GFP 序列的PCR 鉴定第32页
       ·拟南芥缺失型突变体at14a 纯度的鉴定第32页
       ·根癌农杆菌介导法培育转AT14A-GFP 融合基因拟南芥植株第32-33页
         ·根癌农杆菌的培养及其介导的拟南芥转化第32-33页
         ·转AT14A-GFP 融合基因拟南芥种子抗性筛选第33页
         ·转AT14A-GFP 融合基因拟南芥植株目的片段与GFP 的PCR 鉴定第33页
         ·转AT14A-GFP 融合基因拟南芥植株的GFP 表达定位第33页
       ·根癌农杆菌介导法培育转AT14A-GFP 融合基因拟南芥悬浮细胞第33-34页
         ·转AT14A-GFP 融合基因拟南芥悬浮细胞系的培育第33-34页
         ·转AT14A-GFP 融合基因拟南芥悬浮细胞系中总DNA 的目的片段与GFP 的PCR 鉴定第34页
         ·转AT14A-GFP 融合基因拟南芥悬浮细胞的GFP 表达定位第34页
   ·结果分析第34-40页
     ·拟南芥叶片总RNA 的提取第34页
     ·拟南芥叶片第一链cDNA 的合成第34-35页
     ·拟南芥AT14A 序列TOPO 克隆的PCR 扩增第35页
     ·转AT14A-GFP 融合基因的双元载体的DH5α阳性克隆的PCR 鉴定第35页
     ·转AT14A-GFP 融合基因的农杆菌阳性克隆的PCR 鉴定第35-36页
     ·拟南芥缺失突变at14a 纯度的鉴定第36页
     ·转AT14A-GFP 融合基因植株的获得与鉴定第36-38页
       ·转AT14A-GFP 融合基因植株的抗性筛选第36-37页
       ·转AT14A-GFP 融合基因植株的PCR 鉴定第37-38页
     ·转AT14A-GFP 融合基因悬浮细胞的获得与鉴定第38-40页
       ·转AT14A-GFP 融合基因愈伤的筛选第38-39页
       ·转AT14A-GFP 融合基因悬浮细胞的PCR 鉴定第39-40页
   ·讨论第40-41页
第三章 AT14A 蛋白对细胞壁合成的影响第41-54页
   ·引言第41-42页
   ·材料与方法第42-47页
     ·实验材料第42页
     ·主要仪器第42页
     ·实验方法第42-47页
       ·透射电子显微镜观察第42页
       ·各基因型植株和悬浮细胞细胞壁组分的测定第42-43页
         ·纤维素测定方法第42-43页
         ·果胶质测定方法第43页
       ·拟南芥细胞壁蛋白的分析第43-47页
         ·细胞壁蛋白的提取第43-44页
         ·蛋白质含量的测定第44页
         ·双向电泳第44-47页
           ·溶液配制第44-45页
           ·蛋白质样品预处理第45页
           ·第一向固相pH 梯度等电聚焦第45-46页
           ·第二向电泳SDS-PAGE第46页
           ·硝酸银凝胶染色第46页
           ·胶的保存第46-47页
           ·采集和分析细胞壁蛋白质组的2-DE 胶图第47页
   ·结果分析第47-52页
     ·各基因型悬浮细胞系细胞壁的差异比较第47-48页
     ·各基因型植株体系细胞壁的差异比较第48-49页
       ·各基因型植株下胚轴超薄切片细胞壁的差异比较第48-49页
       ·各基因型植株气孔细胞壁的差异比较第49页
     ·各基因型植株和悬浮细胞细胞壁组分差异比较第49-51页
       ·纤维素含量差异比较第49-50页
       ·果胶质含量差异比较第50-51页
     ·拟南芥细胞壁蛋白双向电泳胶分析结果第51-52页
   ·讨论第52-54页
第四章 AT14A 蛋白在拟南芥响应干旱胁迫中的生理功能分析第54-60页
   ·引言第54页
   ·植物材料第54页
   ·试验方法第54-55页
     ·干旱处理方法第54-55页
     ·土壤含水量测定第55页
     ·叶片水势测定第55页
     ·气孔导度测定第55页
     ·叶片内源ABA 含量测定第55页
   ·结果与分析第55-58页
     ·四基因型拟南芥响应干旱胁迫的形态学变化第55-56页
     ·干旱处理对土壤含水量的影响第56页
     ·干旱处理对四基因型拟南芥叶片气孔导度的影响第56-57页
     ·干旱处理对四基因型拟南芥叶片水势的影响第57页
     ·干旱处理对四基因型拟南芥叶片ABA 含量的影响第57-58页
   ·讨论第58-60页
第五章 总结与讨论第60-62页
参考文献第62-69页
附录第69-77页
致谢第77-78页
攻读硕士学位期间发表的论文目录第78页

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