中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
中英文对照词 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-29页 |
·整合素蛋白 | 第15-19页 |
·整合素蛋白的结构与功能 | 第16-17页 |
·整合素蛋白的活化机制 | 第17-19页 |
·植物类整合素蛋白的研究进展 | 第19-23页 |
·植物类整合素蛋白存在与组织和细胞学定位 | 第19-20页 |
·植物类整合素蛋白的功能 | 第20-21页 |
·植物类整合素蛋白的研究展望 | 第21-23页 |
·植物细胞壁的构成与功能 | 第23-27页 |
·细胞壁的结构 | 第23-25页 |
·细胞壁的功能 | 第25-26页 |
·细胞壁的研究热点 | 第26-27页 |
·结语 | 第27-29页 |
第二章 AT14A 过表达和互补转基因植株及相关悬浮细胞培养体系的建立 | 第29-41页 |
·引言 | 第29-30页 |
·材料与方法 | 第30-34页 |
·材料 | 第30-31页 |
·植株材料 | 第30页 |
·试剂(盒) | 第30页 |
·培养基 | 第30页 |
·主要仪器 | 第30-31页 |
·方法 | 第31-34页 |
·拟南芥编码转AT14A 基因的TOPO 克隆 | 第31-32页 |
·拟南芥叶片总RNA 的目的提取 | 第31页 |
·第一链cDNA 的合成 | 第31页 |
·AT14A 序列的PCR 扩增 | 第31页 |
·PCR 产物的回收 | 第31页 |
·目的片段与克隆载体的连接 | 第31页 |
·重组质粒的转化 | 第31页 |
·阳性克隆的PCR 鉴定 | 第31-32页 |
·转AT14A-GFP 融合基因的双元载体的构建 | 第32页 |
·重组质粒与表达载体质粒的小量提取 | 第32页 |
·转AT14A-GFP 融合基因的双元载体的构建 | 第32页 |
·根癌农杆菌阳性克隆的目的基因序列的PCR 鉴定 | 第32页 |
·根癌农杆菌阳性克隆的GFP 序列的PCR 鉴定 | 第32页 |
·拟南芥缺失型突变体at14a 纯度的鉴定 | 第32页 |
·根癌农杆菌介导法培育转AT14A-GFP 融合基因拟南芥植株 | 第32-33页 |
·根癌农杆菌的培养及其介导的拟南芥转化 | 第32-33页 |
·转AT14A-GFP 融合基因拟南芥种子抗性筛选 | 第33页 |
·转AT14A-GFP 融合基因拟南芥植株目的片段与GFP 的PCR 鉴定 | 第33页 |
·转AT14A-GFP 融合基因拟南芥植株的GFP 表达定位 | 第33页 |
·根癌农杆菌介导法培育转AT14A-GFP 融合基因拟南芥悬浮细胞 | 第33-34页 |
·转AT14A-GFP 融合基因拟南芥悬浮细胞系的培育 | 第33-34页 |
·转AT14A-GFP 融合基因拟南芥悬浮细胞系中总DNA 的目的片段与GFP 的PCR 鉴定 | 第34页 |
·转AT14A-GFP 融合基因拟南芥悬浮细胞的GFP 表达定位 | 第34页 |
·结果分析 | 第34-40页 |
·拟南芥叶片总RNA 的提取 | 第34页 |
·拟南芥叶片第一链cDNA 的合成 | 第34-35页 |
·拟南芥AT14A 序列TOPO 克隆的PCR 扩增 | 第35页 |
·转AT14A-GFP 融合基因的双元载体的DH5α阳性克隆的PCR 鉴定 | 第35页 |
·转AT14A-GFP 融合基因的农杆菌阳性克隆的PCR 鉴定 | 第35-36页 |
·拟南芥缺失突变at14a 纯度的鉴定 | 第36页 |
·转AT14A-GFP 融合基因植株的获得与鉴定 | 第36-38页 |
·转AT14A-GFP 融合基因植株的抗性筛选 | 第36-37页 |
·转AT14A-GFP 融合基因植株的PCR 鉴定 | 第37-38页 |
·转AT14A-GFP 融合基因悬浮细胞的获得与鉴定 | 第38-40页 |
·转AT14A-GFP 融合基因愈伤的筛选 | 第38-39页 |
·转AT14A-GFP 融合基因悬浮细胞的PCR 鉴定 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
第三章 AT14A 蛋白对细胞壁合成的影响 | 第41-54页 |
·引言 | 第41-42页 |
·材料与方法 | 第42-47页 |
·实验材料 | 第42页 |
·主要仪器 | 第42页 |
·实验方法 | 第42-47页 |
·透射电子显微镜观察 | 第42页 |
·各基因型植株和悬浮细胞细胞壁组分的测定 | 第42-43页 |
·纤维素测定方法 | 第42-43页 |
·果胶质测定方法 | 第43页 |
·拟南芥细胞壁蛋白的分析 | 第43-47页 |
·细胞壁蛋白的提取 | 第43-44页 |
·蛋白质含量的测定 | 第44页 |
·双向电泳 | 第44-47页 |
·溶液配制 | 第44-45页 |
·蛋白质样品预处理 | 第45页 |
·第一向固相pH 梯度等电聚焦 | 第45-46页 |
·第二向电泳SDS-PAGE | 第46页 |
·硝酸银凝胶染色 | 第46页 |
·胶的保存 | 第46-47页 |
·采集和分析细胞壁蛋白质组的2-DE 胶图 | 第47页 |
·结果分析 | 第47-52页 |
·各基因型悬浮细胞系细胞壁的差异比较 | 第47-48页 |
·各基因型植株体系细胞壁的差异比较 | 第48-49页 |
·各基因型植株下胚轴超薄切片细胞壁的差异比较 | 第48-49页 |
·各基因型植株气孔细胞壁的差异比较 | 第49页 |
·各基因型植株和悬浮细胞细胞壁组分差异比较 | 第49-51页 |
·纤维素含量差异比较 | 第49-50页 |
·果胶质含量差异比较 | 第50-51页 |
·拟南芥细胞壁蛋白双向电泳胶分析结果 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
第四章 AT14A 蛋白在拟南芥响应干旱胁迫中的生理功能分析 | 第54-60页 |
·引言 | 第54页 |
·植物材料 | 第54页 |
·试验方法 | 第54-55页 |
·干旱处理方法 | 第54-55页 |
·土壤含水量测定 | 第55页 |
·叶片水势测定 | 第55页 |
·气孔导度测定 | 第55页 |
·叶片内源ABA 含量测定 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-58页 |
·四基因型拟南芥响应干旱胁迫的形态学变化 | 第55-56页 |
·干旱处理对土壤含水量的影响 | 第56页 |
·干旱处理对四基因型拟南芥叶片气孔导度的影响 | 第56-57页 |
·干旱处理对四基因型拟南芥叶片水势的影响 | 第57页 |
·干旱处理对四基因型拟南芥叶片ABA 含量的影响 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
第五章 总结与讨论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
附录 | 第69-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第78页 |