| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 乳腺生物反应器研究进展 | 第13-21页 |
| ·乳腺特异表达研究概况 | 第13-15页 |
| ·乳腺特异性表达调控元件 | 第15-18页 |
| ·酪蛋白基因调控序列 | 第15-16页 |
| ·乳球蛋白基因调控序列 | 第16-18页 |
| ·β-乳球蛋白基因调控序列 | 第16-17页 |
| ·乳清酸蛋白基因调控序列 | 第17-18页 |
| ·转基因动物制备方法 | 第18-19页 |
| ·目前组织特异表达存在的问题及解决方案 | 第19-21页 |
| ·“位置效应”及其如何克服 | 第19-20页 |
| ·核基质附着区 | 第19-20页 |
| ·位点控制区 | 第20页 |
| ·酵母人工染色体（YAC）的应用 | 第20-21页 |
| 2 人乳铁蛋白的研究进展 | 第21-24页 |
| ·人乳铁蛋白的结构 | 第22页 |
| ·人乳铁蛋白的生物学功能 | 第22-23页 |
| ·利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的现状 | 第23-24页 |
| 3 展望 | 第24-25页 |
| 第二章 人乳铁蛋白乳腺特异性表达载体的构建 | 第25-37页 |
| 1 材料 | 第25-26页 |
| ·仪器 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25-26页 |
| ·质粒与菌株 | 第26页 |
| ·DNA 分析软件 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-28页 |
| ·常规分子生物学操作方法 | 第26页 |
| ·DNA 回收与纯化 | 第26页 |
| ·DNA 片段末端的补平 | 第26-27页 |
| ·连接反应体系 | 第27页 |
| ·乳腺特异性表达载体BCL 构建 | 第27页 |
| ·质粒PEH 的构建 | 第27页 |
| ·质粒BCL 的构建 | 第27页 |
| ·乳腺特异性表达载体PMH 的构建 | 第27-28页 |
| ·质粒PMV 的构建 | 第27-28页 |
| ·质粒PMH 的构建 | 第28页 |
| ·乳腺特异性表达载体ACF 构建 | 第28页 |
| ·质粒PCEF 的构建 | 第28页 |
| ·质粒ACF 的构建 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-32页 |
| ·重组质粒BCL 酶切鉴定结果 | 第28-30页 |
| ·重组质粒PMH 酶切鉴定结果 | 第30-31页 |
| ·重组质粒ACF 酶切鉴定结果 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-37页 |
| 第三章 转基因小鼠制备及整合检测与表达检测 | 第37-52页 |
| 1 材料 | 第37-38页 |
| ·仪器 | 第37-38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·试验动物 | 第38页 |
| ·DNA 分析软件 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-43页 |
| ·转基因小鼠的制备 | 第38-39页 |
| ·显微注射片段的准备 | 第38-39页 |
| ·超数排卵 | 第39页 |
| ·取卵 | 第39页 |
| ·显微注射 | 第39页 |
| ·输卵管胚胎移植 | 第39页 |
| ·转基因小鼠的整合检测 | 第39-41页 |
| ·鼠尾基因组DNA 提取 | 第39-40页 |
| ·转基因小鼠PCR 方法检测 | 第40-41页 |
| ·转基因小鼠乳汁的表达检测 | 第41-43页 |
| ·乳汁收集及处理 | 第41页 |
| ·小鼠乳清的提取 | 第41页 |
| ·转基因小鼠乳清的酶联免疫（ELISA）检测 | 第41-42页 |
| ·转基因小鼠乳清的的蛋白印迹（Western Blot）检测 | 第42-43页 |
| ·转基因小鼠乳清的SDS-PAGE 电泳 | 第42页 |
| ·转基因小鼠乳汁蛋白的Western Blot 检测 | 第42-43页 |
| 3 结果 | 第43-49页 |
| ·转基因小鼠整合检测结果 | 第43-47页 |
| ·BCL 转基因小鼠整合检测结果 | 第43-45页 |
| ·PMH 转基因小鼠整合检测结果 | 第45-46页 |
| ·ACF 转基因小鼠整合检测结果 | 第46-47页 |
| ·转基因小鼠乳清的酶联免疫（ELISA）检测结果 | 第47-49页 |
| ·转基因小鼠乳清的蛋白印迹（Western Blot）检测结果 | 第49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 攻读硕士研究生期间发表论文目录 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
