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端粒、端粒酶活性在氯化镧诱导MDCC-MSB1细胞凋亡的机制研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1. 前言第12-18页
   ·稀土元素与肿瘤细胞凋亡第12-15页
     ·稀土元素与DNA 损伤第12-13页
     ·稀土对细胞周期的影响第13-14页
     ·稀土对肿瘤相关基因表达的影响第14-15页
   ·端粒及端粒酶与肿瘤的关系第15-17页
     ·端粒酶活性与肿瘤的发生第15-16页
     ·端粒长度在肿瘤中的改变第16-17页
   ·稀土对端粒酶的影响第17页
   ·试验的目的与意义第17-18页
2. 材料与方法第18-24页
   ·主要仪器与材料第18-19页
     ·主要仪器第18页
     ·主要试剂第18-19页
     ·试验药品及细胞株第19页
   ·MDCC-MSB1 细胞培养及处理第19页
   ·检测项目与方法第19-23页
     ·LaCl_3 诱导MSB1 细胞凋亡的形态学观察第19-20页
     ·细胞DNA 损伤的检测第20-21页
     ·流式细胞仪检测细胞周期与细胞凋亡第21页
     ·流式荧光原位杂交法(Flow-Fish)检测端粒长度的变化第21-22页
     ·TRAP-PCR 银染法检测端粒酶活性第22页
     ·实时定量PCR 染料法检测肿瘤细胞chTERT 基因mRNA 的表达量变化第22-23页
   ·实验数据分析与统计第23-24页
3. 结果与分析第24-40页
   ·LaCl_3 诱导MDCC-MSB1 细胞凋亡的形态学检测结果第24-28页
     ·LaCl_3 作用MDCC-MSB1 细胞不同时间的形态学观察第24页
     ·AO/EB 双荧光染色检测结果第24-26页
     ·苏木素-伊红(HE)染色观察结果第26页
     ·透射电镜对细胞超微结构观察结果第26-28页
   ·LaCl_3 致MDCC-MSB1 细胞DNA 损伤的检测结果第28-32页
     ·DNA Ladder 检测结果第28-29页
     ·脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测结果第29-30页
     ·碱性SCGE 法检测结果第30-31页
     ·细胞DNA 片段化百分率检测结果第31-32页
   ·LaCl_3 对MDCC-MSB1 细胞周期影响的检测结果第32-34页
     ·LaCl_3 对细胞周期影响的检测结果第32-33页
     ·流式细胞仪法检测细胞凋亡的结果第33-34页
   ·流式荧光原位杂交法(Flow-Fish)检测端粒长度的结果第34-36页
   ·TRAP-PCR 银染法检测端粒酶活性的结果第36页
   ·实时定量PCR 染料法检测肿瘤细胞chTERT 基因m RNA 的表达量变化第36-40页
     ·chTERT 基因PCR 产物鉴定结果第36-38页
     ·实时定量PCR 法检测MDCC-MSB1 细胞chTERT 基因表达的结果第38-40页
4. 讨论第40-47页
   ·LaCl_3 对MDCC-MSB1 肿瘤细胞凋亡形态学的影响第40-41页
     ·光学显微镜观察MDCC-MSB1 细胞凋亡形态学变化第40页
     ·透射电镜观察MDCC-MSB1 细胞凋亡的形态学变化第40-41页
   ·LaCl_3 对MDCC-MSB1 肿瘤细胞DNA 损伤的影响第41-43页
     ·DNA Ladder与DNA片段化法检测LaCl_3对MDCC-MSB1肿瘤细胞DNA损伤的影响第41-42页
     ·TUNEL 法检测LaCl_3 对MDCC-MSB1 肿瘤细胞DNA 损伤的影响第42页
     ·SCGE 法检测LaCl_3 对MDCC-MSB1 肿瘤细胞DNA 损伤的影响第42-43页
   ·LaCl_3 对MDCC-MSB1 细胞周期及细胞型的影响第43-45页
   ·LaCl_3 对MDCC-MSB1 细胞端粒长度、端粒酶活性及chTERT mRNA 表达的影响第45-47页
5. 结论第47-48页
致谢第48-49页
参考文献第49-54页
攻读学位期间发表的学术论文第54页

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