| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-15页 |
| ·酵母TOR 激酶的研究进展 | 第8-14页 |
| ·TOR 激酶的结构和组成 | 第9-10页 |
| ·TOR 对细胞生长的调控 | 第10-11页 |
| ·TOR 对蛋白质合成和稳定性的调控 | 第11-12页 |
| ·TOR 对转录的调控 | 第12-13页 |
| ·TOR 作为蛋白磷酸酯酶调控因子 | 第13-14页 |
| ·本课题的研究意义和主要内容 | 第14-15页 |
| 第二章 CaTOR1 基因的敲除和功能研究 | 第15-55页 |
| ·实验材料 | 第15-20页 |
| ·菌种和质粒 | 第15-16页 |
| ·主要培养基 | 第16-17页 |
| ·引物 | 第17页 |
| ·实验仪器 | 第17-18页 |
| ·实验化学试剂 | 第18-20页 |
| ·生物试剂、试剂盒 | 第20页 |
| ·主要实验方法 | 第20-28页 |
| ·白色念珠和大肠杆菌菌株的培养与保存 | 第20页 |
| ·液氮法提取白色念珠和酵母基因组DNA | 第20-21页 |
| ·PCR 扩增DNA 片段 | 第21页 |
| ·DNA 片断的切胶纯化 | 第21-22页 |
| ·DNA 的酶切与连接 | 第22-23页 |
| ·CaCl_2 制备感受态细胞 | 第23页 |
| ·转化CaCl_2 感受态细胞 | 第23-24页 |
| ·DNA 阳性克隆的筛选 | 第24-25页 |
| ·乙酸锂法转化白念珠菌细胞 | 第25页 |
| ·梯度稀释的实验方法 | 第25-26页 |
| ·用pET 系统表达基因CaTOR1 编码的部分蛋白 | 第26-27页 |
| ·白念珠菌的显微镜观察 | 第27-28页 |
| ·实验结果 | 第28-53页 |
| ·CaTOR1 基因的部分序列克隆和序列分析 | 第28-33页 |
| ·CaTor1p 和 ScTor1p 氨基酸序列的比较 | 第33-37页 |
| ·CaTOR1 基因的敲除 | 第37-41页 |
| ·CaTOR1 单等位基因缺失的表型筛选 | 第41-45页 |
| ·CaTOR1 单等位基因缺失细胞的菌丝诱导实验 | 第45-48页 |
| ·CaTor1p 部分蛋白的表达和多克隆抗体制备 | 第48-50页 |
| ·采用gap-repair 方法克隆CaTOR1 基因的尝试 | 第50-53页 |
| ·本章讨论 | 第53-55页 |
| 第三章 ScTCO89 基因新功能的发现 | 第55-64页 |
| ·实验材料 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-58页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第56-57页 |
| ·玻璃珠法提取酵母基因组DNA | 第57-58页 |
| ·酿酒酵母细胞的转化 | 第58页 |
| ·实验结果 | 第58-62页 |
| ·ScTCO89 基因的克隆 | 第58-61页 |
| ·ScTCO89 基因的功能研究 | 第61-62页 |
| ·本章讨论 | 第62-64页 |
| 第四章 酿酒酵母编码PP2C 蛋白磷酸酶基因的研究 | 第64-70页 |
| ·实验材料 | 第64-66页 |
| ·实验结果 | 第66-69页 |
| ·ScPTC6 基因的克隆 | 第66-67页 |
| ·ScPTC6 基因的功能研究 | 第67-69页 |
| ·本章讨论 | 第69-70页 |
| 第五章 总结和展望 | 第70-71页 |
| ·主要创新点 | 第70页 |
| ·相关工作展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 附录1 引物列表 | 第80-81页 |
| 附录2 测序后的CaTOR1 基因及推测编码的氨基酸 | 第81-84页 |
| 附录3 生化名词缩写 | 第84-85页 |
| 附录4 基因名词缩写 | 第85-86页 |
| 附录5 生物网络资源 | 第86-87页 |
| 发表论文和科研情况说明 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
