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用基因组重排和进化工程进行菊糖芽孢乳杆菌菌种改进

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-10页
第一章 文献综述第10-36页
   ·乳酸的结构、性质和应用第10-12页
     ·乳酸的结构和性质第10-11页
     ·D-乳酸的应用及商业生产第11-12页
   ·D-乳酸的生物合成第12-17页
     ·菌种选育第13-14页
     ·培养条件的优化第14-16页
     ·基因工程技术的应用第16-17页
   ·基因组重排技术第17-26页
     ·基因组重排的定义第18页
     ·基因组重排的技术基础第18-19页
     ·基因组重排的研究方法第19-21页
     ·基因组重排的国内外研究进展第21-26页
   ·进化工程第26-31页
     ·进化工程的原理与方法第26-27页
     ·进化工程的应用进展第27-31页
   ·统计学方法优化工艺条件第31-34页
     ·Plackett-Burman 实验设计第32页
     ·最陡爬坡法第32页
     ·响应面方法第32-33页
     ·响应面方法的应用第33-34页
   ·选题背景及研究内容第34-36页
第二章 基因组重排亲本菌株库的构建第36-56页
   ·实验材料第36-39页
     ·菌种第36页
     ·实验仪器第36-37页
     ·实验药品与试剂第37-38页
     ·培养基第38页
     ·培养方法第38-39页
   ·实验方法第39-44页
     ·出发菌株生化特性研究第39页
     ·分析方法第39-42页
     ·诱变与梯度筛选第42-44页
   ·实验结果与讨论第44-55页
     ·出发菌株的形态学研究第44-45页
     ·出发菌株的发酵曲线第45-46页
     ·出发菌株的pH 适应性研究第46-47页
     ·诱变剂量的确定第47-48页
     ·紫外诱变结果第48-52页
     ·硫酸二乙酯诱变结果第52-53页
     ·pH 梯度筛选结果第53页
     ·突变株稳定性分析第53-55页
   ·本章小结第55-56页
第三章 基因组重排构建基因多样性菌群第56-78页
   ·实验材料第56-57页
     ·菌种第56-57页
     ·实验仪器第57页
     ·实验试剂第57页
     ·培养基及溶液第57页
   ·实验方法第57-60页
     ·原生质体的制备第57-58页
     ·原生质体的再生与融合第58页
     ·基因组重排参数的计算第58-59页
     ·基因组重排第59-60页
   ·实验结果与讨论第60-77页
     ·原生质体制备的影响因素第60-63页
     ·中心组合设计第63-66页
     ·RSM 模型第66-68页
     ·原生质体的制备第68-69页
     ·原生质体融合的影响因素第69-73页
     ·基因组重排构建遗传多样性菌群第73-76页
     ·融合子的产乳酸能力稳定性检验第76-77页
   ·本章小结第77-78页
第四章 人工选择下的适应进化第78-91页
   ·实验材料第78-79页
     ·菌种第78-79页
     ·实验仪器第79页
     ·实验试剂第79页
     ·培养基第79页
   ·实验方法第79-81页
     ·选择压力的的确定第79页
     ·菌株代时的确定第79-80页
     ·恒定pH 下的进化培养第80页
     ·梯度pH 下的进化培养第80页
     ·进化工程的研究流程第80-81页
   ·实验结果与讨论第81-90页
     ·菌株代时的确定第81-82页
     ·选择压力的确定第82-84页
     ·进化策略的选择第84-86页
     ·两种pH 调控进化的比较第86-89页
     ·菌群进化适应性研究第89-90页
   ·本章小结第90-91页
第五章 改进表型的高通量筛选第91-101页
   ·实验材料第92页
     ·菌种第92页
     ·实验仪器第92页
     ·实验试剂第92页
     ·培养基第92页
   ·实验方法第92-93页
     ·96 孔板的细胞培养第92-93页
     ·菌株筛选流程第93页
     ·D-乳酸及OD 值的测定第93页
   ·实验结果与讨论第93-100页
     ·菌株培养时间的确定第93-95页
     ·提取溶剂的确定第95页
     ·检测方法的确定第95-96页
     ·筛选剂的确定第96-98页
     ·进化株的高通量筛选第98-100页
   ·本章小结第100-101页
第六章 D-乳酸耐酸高产进化工程菌的表征第101-124页
   ·实验材料第103-104页
     ·菌种第103页
     ·实验仪器第103页
     ·实验试剂第103-104页
     ·培养基第104页
   ·实验方法第104-109页
     ·胞外主要代谢产物的检测第104-106页
     ·胞内主要代谢产物的检测第106-108页
     ·酶活分析第108-109页
   ·结果与讨论第109-122页
     ·代谢物组学研究第109-114页
     ·代谢通量分析第114-121页
     ·出发菌株和进化工程菌株酶活分析第121-122页
   ·本章小结第122-124页
第七章 响应面法优化进化工程菌发酵培养工艺条件第124-142页
   ·实验材料第125页
     ·菌种第125页
     ·实验仪器第125页
     ·实验试剂第125页
     ·培养基第125页
     ·培养方法第125页
   ·实验方法第125-127页
     ·D-乳酸的测定第125-126页
     ·实验设计和数据分析第126-127页
   ·实验结果与讨论第127-141页
     ·单因素实验研究第127-133页
     ·Plackett-Burman 实验设计法筛选重要因素第133-135页
     ·最陡爬坡实验第135-136页
     ·响应面法优化发酵工艺条件第136-141页
   ·本章小结第141-142页
第八章 结论与展望第142-145页
   ·结论和创新点第142-143页
     ·主要结论第142-143页
     ·创新点第143页
   ·展望第143-145页
参考文献第145-157页
论文发表及参与科研项目第157-158页
致谢第158页

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