| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-35页 |
| ·Ras-cAMP 信号通路及其主要作用元件 | 第12-26页 |
| ·Ras-cAMP 信号通路的主要作用元件 | 第14-22页 |
| ·Ras /cAMP/PKA 的下游靶标 | 第22-26页 |
| ·FGM 信号通路及其主要作用元件 | 第26-27页 |
| ·Sch9 和PKA 的相互作用关系 | 第27-28页 |
| ·TOR 信号通路 | 第28-30页 |
| ·TOR 的上游调控元件 | 第28-29页 |
| ·TOR 的下游元件 | 第29页 |
| ·TOR 信号通路与酿酒酵母时序寿命的关系 | 第29-30页 |
| ·TOR 信号通路和Ras/PKA 信号通路的相互作用关系 | 第30-32页 |
| ·TOR 信号通路和FGM 信号通路的相互作用关系 | 第32-33页 |
| ·本论文的研究思路 | 第33-35页 |
| 第二章 材料与方法 | 第35-58页 |
| ·实验材料 | 第35-45页 |
| ·质粒、菌株与引物 | 第35-40页 |
| ·主要实验仪器 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40-41页 |
| ·培养基 | 第41-43页 |
| ·主要溶液 | 第43-45页 |
| ·实验方法 | 第45-58页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第45-46页 |
| ·小规模提取大肠杆菌质粒法（CTAB 法） | 第46-47页 |
| ·酵母染色体的快速分离 | 第47页 |
| ·PCR 扩增反应 | 第47-48页 |
| ·DNA 的限制酶消化 | 第48页 |
| ·DNA 的连接反应 | 第48-49页 |
| ·DNA 的琼脂糖凝胶电泳 | 第49页 |
| ·从琼脂糖中回收DNA | 第49-50页 |
| ·酵母细胞的转化方法 | 第50页 |
| ·质粒缺口修复 | 第50页 |
| ·酵母中质粒的回收 | 第50-51页 |
| ·酵母交配型的验证 | 第51页 |
| ·不同交配型酵母细胞之间的杂交 | 第51-52页 |
| ·产孢及四分体孢子拆分 | 第52页 |
| ·Dilution 实验方法 | 第52页 |
| ·水浴热击实验方法 | 第52页 |
| ·cAMP 定量测量 | 第52-55页 |
| ·蛋白质浓度的定量（Bio-Rad 方法） | 第55-56页 |
| ·玻璃珠法提取酿酒酵母总蛋白 | 第56页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第56-57页 |
| ·Western blot 蛋白免疫实验 | 第57-58页 |
| 第三章 氮源通过TOR 调控Ras-cAMP 信号通路 | 第58-68页 |
| ·本章所用质粒的构建 | 第58-60页 |
| ·葡萄糖诱导的cAMP 信号需要氮源的存在 | 第60-62页 |
| ·雷帕霉素对葡萄糖诱导的cAMP 信号的影响 | 第62-63页 |
| ·表达TOR1-RR 等位基因可消除雷帕霉素对葡萄糖诱导的cAMP 信号的影响 | 第63-65页 |
| ·氮源缺乏条件和雷帕霉素对Cdc25 磷酸化的影响 | 第65-66页 |
| ·本章小结 | 第66-68页 |
| 第四章Sch9 对葡萄糖诱导的cAMP 信号的调控 | 第68-77页 |
| ·本章所用菌种及质粒的构建 | 第68-70页 |
| ·SCH9 基因的缺失 | 第68-69页 |
| ·质粒YCplac22-SCH92D3E 的构建 | 第69-70页 |
| ·缺失SCH9 对葡萄糖诱导的cAMP 信号的影响 | 第70-71页 |
| ·表达SCH92D3E 等位基因可减小雷帕霉素对葡萄糖诱导的cAMP 信号的影响 | 第71-74页 |
| ·缺失SCH9 使PKA 活性增强 | 第74-75页 |
| ·Sch9 通过PKA 的催化亚基调节Cdc25 的磷酸化 | 第75-76页 |
| ·本章小结 | 第76-77页 |
| 第五章 Rim15 和 Gis1 对葡萄糖诱导的 cAMP 信号的影响 | 第77-82页 |
| ·本章所需菌株的构建 | 第77-79页 |
| ·rim15Δ的构建 | 第77-78页 |
| ·gis1Δ的构建 | 第78-79页 |
| ·Rim15 对葡萄糖诱导的cAMP 信号的影响 | 第79-80页 |
| ·Gis1 对葡萄糖诱导的cAMP 信号的影响 | 第80-81页 |
| ·本章小结 | 第81-82页 |
| 第六章Sch9 对PKA 调节亚基Bcy1 的调控作用 | 第82-110页 |
| ·菌种及质粒的构建 | 第82-90页 |
| ·MSN2 基因的缺失 | 第82-83页 |
| ·MSN4 基因的缺失 | 第83-84页 |
| ·ZDS1 基因的缺失 | 第84-85页 |
| ·质粒YCplac22- BCY1-3xHA 的构建 | 第85-86页 |
| ·质粒YCplac22-GFP-BCY1 的构建 | 第86页 |
| ·质粒YCplac181-YAK1 的构建 | 第86-87页 |
| ·质粒YCplac22-SCH9-13xMYC 和YEplac181-SCH9 的构建 | 第87-88页 |
| ·质粒 YEplac195-ZDS1 的构建 | 第88-90页 |
| ·Sch9 调节Bcy1 的定位及磷酸化 | 第90-92页 |
| ·氮源缺乏条件下Bcy1 的定位 | 第92-94页 |
| ·雷帕霉素对Bcy1 定位的影响 | 第94-95页 |
| ·Zds1 调节Bcy1 的定位 | 第95-101页 |
| ·Yak1 调节Bcy1 的定位及磷酸化 | 第101-104页 |
| ·Msn2、Msn4 和 Rim15 调节 Bcy1 定位 | 第104-106页 |
| ·Bcy1 的定位与PKA 水平相关 | 第106-109页 |
| ·本章小结 | 第109-110页 |
| 第七章 Sch9 对PKA 催化亚基的调控作用 | 第110-123页 |
| ·质粒的构建 | 第110-113页 |
| ·质粒YCplac22-TPK1-GFP 的构建 | 第110-111页 |
| ·质粒YCplac22-TPK1-3xHA 的构建 | 第111页 |
| ·质粒YCplac33-tpk1wl-GFP的构建 | 第111-112页 |
| ·质粒YCplac22-TPK2-GFP 的构建 | 第112-113页 |
| ·质粒YEplac112-TPK3-GFP 的构建 | 第113页 |
| ·Sch9 调节Tpk1 的定位 | 第113-115页 |
| ·氮源对Tpk1 定位的影响 | 第115页 |
| ·雷帕霉素对Tpk1 定位的影响 | 第115-118页 |
| ·Tpk1 的细胞核定位不依赖于Bcy1 | 第118-119页 |
| ·Sch9 调节Tpk2 的定位 | 第119-121页 |
| ·Sch9 调节Tpk3 的定位 | 第121页 |
| ·本章小结 | 第121-123页 |
| 第八章总结与展望 | 第123-126页 |
| ·主要工作总结 | 第123-125页 |
| ·展望 | 第125-126页 |
| 参考文献 | 第126-137页 |
| 发表论文和科研情况说明 | 第137-138页 |
| 附录1 生化名词缩写 | 第138-139页 |
| 附录2 基因及其相应编码产物 | 第139-140页 |
| 致谢 | 第140页 |
