| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 0 前言 | 第14-29页 |
| ·分子生物学与流行病学特征 | 第14-17页 |
| ·形态 | 第14-15页 |
| ·基因型 | 第15-16页 |
| ·流行病学特征 | 第16-17页 |
| ·水产品中 NVs 的流行特征及污染状况 | 第17-19页 |
| ·水产品中NVS的检测技术研究现状 | 第19-27页 |
| ·水产品中NVs 的富集 | 第19-20页 |
| ·病毒RNA 的提取 | 第20页 |
| ·NVs 分析检测方法 | 第20-27页 |
| ·本论文的研究目的和意义 | 第27-29页 |
| 1 贝类中诺如病毒定性检测方法的研究 | 第29-40页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·阳性病毒 | 第29页 |
| ·染毒贝类样品 | 第29页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第29-30页 |
| ·实验仪器 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-34页 |
| ·贝类样品中NVs 富集 | 第30-31页 |
| ·病毒RNA 提取 | 第31页 |
| ·引物 | 第31-32页 |
| ·反转录(RT) | 第32页 |
| ·PCR 反应体系的优化 | 第32-33页 |
| ·特异性与灵敏度实验 | 第33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第33-34页 |
| ·实验结果及分析 | 第34-38页 |
| ·PCR 正交实验结果及最优体系 | 第34-36页 |
| ·方法的特异性 | 第36-37页 |
| ·方法的灵敏度 | 第37-38页 |
| ·最优引物筛选 | 第38页 |
| ·小结 | 第38-40页 |
| 2 贝类中诺如病毒富集方法的研究 | 第40-46页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·阳性病毒 | 第40页 |
| ·实验样品 | 第40页 |
| ·实验试剂 | 第40-41页 |
| ·实验仪器 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-42页 |
| ·实验设计 | 第41页 |
| ·病毒粒子富集 | 第41-42页 |
| ·病毒RNA 提取与病毒回收率的测定 | 第42页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第42页 |
| ·数据处理与分析 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-45页 |
| ·病毒RNA 的浓度与回收率 | 第42-43页 |
| ·RT-PCR 检测结果 | 第43-44页 |
| ·PEG 浓度影响 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 3 贝类中诺如病毒SYBR GREEN I 实时荧光定量方法研究 | 第46-57页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·阳性病毒 | 第46页 |
| ·实验试剂 | 第46页 |
| ·实验仪器 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-49页 |
| ·引物 | 第47页 |
| ·RNA 提取 | 第47页 |
| ·常规RT-PCR | 第47页 |
| ·标准质粒制备 | 第47-48页 |
| ·荧光定量PCR 反应 | 第48-49页 |
| ·特异性与灵敏度实验 | 第49页 |
| ·重复性实验 | 第49页 |
| ·贝类样品的检测 | 第49页 |
| ·数据处理 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-55页 |
| ·标准质粒准确性 | 第49-51页 |
| ·标准曲线 | 第51-52页 |
| ·荧光收集温度的选择 | 第52-53页 |
| ·方法的特异性 | 第53-54页 |
| ·方法的灵敏度 | 第54页 |
| ·方法的重复性 | 第54-55页 |
| ·贝类样品的检测 | 第55页 |
| ·小结 | 第55-57页 |
| 4 贝类中诺如病毒一步法TAQMAN 荧光定量方法的研究 | 第57-66页 |
| ·实验材料 | 第57-58页 |
| ·阳性病毒 | 第57页 |
| ·实验试剂 | 第57-58页 |
| ·实验仪器 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-60页 |
| ·引物与TaqMan 探针 | 第58页 |
| ·病毒RNA 提取 | 第58页 |
| ·常规RT-PCR | 第58页 |
| ·标准cRNA 的构建 | 第58-59页 |
| ·一步法实时荧光定量RT-PCR 反应 | 第59页 |
| ·特异性与灵敏度实验 | 第59页 |
| ·重复性实验 | 第59页 |
| ·贝类样品的检测 | 第59-60页 |
| ·数据处理 | 第60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-65页 |
| ·cRNA 标准品的准确性 | 第60-61页 |
| ·扩增曲线与标准曲线 | 第61-62页 |
| ·方法的特异性 | 第62-63页 |
| ·方法的灵敏度 | 第63-64页 |
| ·方法的重复性 | 第64页 |
| ·贝类样品的检测 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 5 贝类中实时NASBA 检测方法初探 | 第66-74页 |
| ·实验材料 | 第66-67页 |
| ·阳性病毒 | 第66页 |
| ·实验试剂 | 第66-67页 |
| ·实验方法 | 第67-68页 |
| ·引物与分子信标 | 第67页 |
| ·常规RT-PCR | 第67页 |
| ·标准cRNA 的构建 | 第67页 |
| ·实时NASBA 反应 | 第67页 |
| ·特异性与灵敏度实验 | 第67-68页 |
| ·贝类样品的检测 | 第68页 |
| ·结果与讨论 | 第68-72页 |
| ·实时NSABA 引物Nor-F/Nor-R 的常规RT-PCR | 第68页 |
| ·扩增曲线 | 第68-70页 |
| ·基线确定与标准曲线 | 第70-71页 |
| ·方法的特异性 | 第71页 |
| ·方法的灵敏度 | 第71-72页 |
| ·贝类样品的检测 | 第72页 |
| ·小结 | 第72-74页 |
| 6 山东半岛地区贝类中NVS 污染状况及阳性分离株初步鉴定 | 第74-81页 |
| ·实验材料 | 第74-75页 |
| ·实验样品 | 第74-75页 |
| ·实验试剂 | 第75页 |
| ·实验仪器 | 第75页 |
| ·实验方法 | 第75-77页 |
| ·引物 | 第75页 |
| ·贝类样品中NVs 的富集 | 第75页 |
| ·NVs 的RNA 提取 | 第75-76页 |
| ·常规RT-PCR 检测 | 第76页 |
| ·荧光定量RT-PCR 检测 | 第76页 |
| ·阳性NVs 克隆测序 | 第76页 |
| ·序列分析与遗传进化树构建 | 第76-77页 |
| ·结果与分析 | 第77-79页 |
| ·NVs 检测结果与分析 | 第77-78页 |
| ·贝类中阳性NVs 序列分析与遗传进化树 | 第78-79页 |
| ·阳性毒株型别 | 第79页 |
| ·小结 | 第79-81页 |
| 7 总结 | 第81-83页 |
| 8 展望 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第90页 |
