| 致谢 | 第1-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 1 文献综述 | 第17-40页 |
| ·引言 | 第17页 |
| ·油菜再生体系的研究进展 | 第17-21页 |
| ·基因型差异对油菜再生体系的影响 | 第18-19页 |
| ·外植体类型对油菜再生体系的影响 | 第19-20页 |
| ·培养基外源添加物质和激素对油菜再生体系的影响 | 第20-21页 |
| ·油菜遗传转化体系的研究进展 | 第21-27页 |
| ·油菜遗传转化的方法 | 第21-23页 |
| ·农杆菌侵染浓度 | 第23-24页 |
| ·预培养和共培养时间 | 第24-25页 |
| ·抗生素筛选浓度 | 第25-27页 |
| ·油菜再生和遗传转化过程中遇到的问题及解决办法 | 第27-28页 |
| ·外植体组织褐化现象 | 第27-28页 |
| ·试管苗玻璃化现象 | 第28页 |
| ·外源基因遗传转化在油菜育种中的应用 | 第28-36页 |
| ·抗病虫转基因油菜 | 第29-32页 |
| ·抗除草剂转基因油菜 | 第32-33页 |
| ·品质和农艺性状改良转基因油菜 | 第33-35页 |
| ·雄性不育转基因油菜 | 第35-36页 |
| ·转基因油菜的生态安全性 | 第36-37页 |
| ·本研究目的、意义及技术路线 | 第37-40页 |
| 2 油菜子叶柄外植体高效再生体系的建立 | 第40-54页 |
| ·前言 | 第40页 |
| ·材料与方法 | 第40-42页 |
| ·试验材料 | 第40页 |
| ·无菌苗的准备及子叶柄外植体的接种 | 第40-41页 |
| ·不同激素配比对子叶柄外植体愈伤组织分化的影响 | 第41页 |
| ·不同浓度AgNO_3对愈伤组织分化及再生芽褐化的影响 | 第41-42页 |
| ·不同蔗糖浓度对再生苗玻璃化的影响 | 第42页 |
| ·不同浓度IAA对再生苗生根的影响 | 第42页 |
| ·再生植株的获得 | 第42页 |
| ·数据分析 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-51页 |
| ·不同浓度2,4-D对油菜子叶柄外植体愈伤诱导率的影响 | 第42-43页 |
| ·不同激素配比对子叶柄外植体分化的影响 | 第43-45页 |
| ·不同浓度AgNO_3对愈伤组织的芽分化及再生芽褐化的影响 | 第45-48页 |
| ·不同蔗糖浓度对再生苗玻璃化的影响 | 第48页 |
| ·不同浓度IAA对再生苗诱导生根的影响 | 第48-50页 |
| ·再生植株的获得与移栽 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| ·外源调节激素对子叶柄外植体再生体系的影响 | 第51-52页 |
| ·硝酸银在愈伤组织分化和再生出芽培养过程中的作用 | 第52页 |
| ·蔗糖对再生苗玻璃化的影响 | 第52-54页 |
| 3 油菜子叶柄外植体农杆菌介导遗传转化体系的建立 | 第54-71页 |
| ·前言 | 第54页 |
| ·材料与方法 | 第54-58页 |
| ·试验材料 | 第54页 |
| ·目的基因的检测 | 第54-56页 |
| ·农杆菌的准备及共培养 | 第56-57页 |
| ·羧苄青霉素对子叶柄外植体愈伤组织诱导率及分化率的影响 | 第57页 |
| ·潮霉素对子叶柄外植体的筛选 | 第57页 |
| ·转化植株生根与移栽 | 第57-58页 |
| ·转化植株春化处理及子代的获得 | 第58页 |
| ·数据分析 | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-67页 |
| ·目的基因的检测 | 第58-60页 |
| ·不同浓度农杆菌和乙酰丁香酮对子叶柄外植体膨大率的影响 | 第60-61页 |
| ·羧苄青霉素对子叶柄外植体愈伤诱导率和芽再生率的影响 | 第61-64页 |
| ·潮霉素对子叶柄外植体芽再生率的筛选效果 | 第64-66页 |
| ·头孢霉素对再生植株生根的影响 | 第66页 |
| ·转化再生植株的移栽和子代的获得 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-71页 |
| ·农杆菌侵染浓度和乙酰丁香酮对子叶柄外植体生长的影响 | 第67-68页 |
| ·抑菌素对子叶柄外植体生长的影响 | 第68-69页 |
| ·潮霉素筛选浓度和乙酰丁香酮对转化效果的影响 | 第69-71页 |
| 4 转化再生植株的分子生物学检测及抗病虫效果分析 | 第71-88页 |
| ·前言 | 第71页 |
| ·材料与方法 | 第71-78页 |
| ·试验材料与试剂 | 第71页 |
| ·总DNA的提取及质量和浓度检测 | 第71-72页 |
| ·转化再生植株PCR检测 | 第72页 |
| ·Southern杂交 | 第72-76页 |
| ·总RNA的提取及质量和浓度检测 | 第76-77页 |
| ·Northern杂交 | 第77页 |
| ·T_0代植株抗虫性分析 | 第77-78页 |
| ·T_0代植株抗病性分析 | 第78页 |
| ·结果与分析 | 第78-86页 |
| ·转化再生植株和对照植株基因组DNA纯度和大小 | 第78-79页 |
| ·转化再生植株目的基因的PCR检测 | 第79-80页 |
| ·Southern杂交检测 | 第80-83页 |
| ·RNA质量检测及Northern杂交 | 第83页 |
| ·转化植株对小菜蛾的抗性分析 | 第83页 |
| ·转化植株对菌核病的抗性分析 | 第83-86页 |
| ·讨论 | 第86-88页 |
| ·蛋白质酶抑制基因和几丁质酶基因的抗病虫性评价 | 第86页 |
| ·受伤诱导特异启动子 | 第86-87页 |
| ·转化植株目的片段PCR扩增的模板用量 | 第87-88页 |
| 5 T_1代植株外源目的基因的遗传分离和抗病虫效果研究 | 第88-97页 |
| ·前言 | 第88页 |
| ·材料和方法 | 第88-90页 |
| ·试验材料与试剂 | 第88页 |
| ·外源目的基因的遗传分离 | 第88页 |
| ·T_1代阳性植株和对照植株总RNA的提取及质量和浓度检测 | 第88页 |
| ·RT-PCR | 第88-89页 |
| ·Northern杂交 | 第89页 |
| ·T_1代植株抗虫性分析 | 第89-90页 |
| ·T_1代植株抗病性分析 | 第90页 |
| ·结果与分析 | 第90-96页 |
| ·T_1代植株基因组DNA的质量和浓度检测 | 第90页 |
| ·外源目的基因在子代中的分离研究 | 第90-91页 |
| ·RT-PCR和Northern杂交 | 第91-92页 |
| ·T_1-11阳性植株对小菜蛾的抗性分析 | 第92-93页 |
| ·T_1-11阳性植株对菌核病的抗性分析 | 第93-96页 |
| ·讨论 | 第96-97页 |
| ·外源目的基因在T_1代植株中分离和表达效果 | 第96页 |
| ·T_1代阳性植株抗病虫性评价 | 第96-97页 |
| 6 论文创新点及今后研究方向 | 第97-98页 |
| ·论文创新点 | 第97页 |
| ·今后研究方向 | 第97-98页 |
| 7 参考文献 | 第98-111页 |
| 附录 博士期间论文发表情况 | 第111页 |
