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流式细胞术对细菌双杂交系统中蛋白—蛋白相互作用的定量分析

摘要第10-13页
Abstract第13-16页
第一章 绪论第17-61页
    1.1 蛋白质相互作用及其研究意义第17-18页
    1.2 蛋白质相互作用的研究方法第18-31页
        1.2.1 基于分子生物学方法的蛋白质相互作用研究技术第18-24页
        1.2.2 基于生物化学方法的蛋白质相互作用研究技术第24-27页
        1.2.3 基于生物物理学方法的蛋白质相互作用研究技术第27-30页
        1.2.4 基于生物信息学方法的蛋白质相互作用研究技术第30-31页
    1.3 基于腺苷酸环化酶重构的细菌双杂交(BACTH)系统第31-34页
        1.3.1 BACTH系统的原理第32-33页
        1.3.2 BACTH系统检测蛋白质相互作用的一般流程第33页
        1.3.3 BACTH系统的应用及发展第33-34页
    1.4 单细胞分析与流式细胞术第34-42页
        1.4.1 单细胞分析第34-36页
        1.4.2 流式细胞术简介第36-39页
        1.4.3 流式细胞术在蛋白质相互作用研究中的应用第39-40页
        1.4.4 超高灵敏流式检测装置简介第40-42页
    1.5 本论文的选题思路以及研究内容第42-44页
    参考文献第44-61页
第二章 双标签BACTH系统的构建第61-81页
    2.1 引言第61-62页
    2.2 实验部分第62-71页
        2.2.1 仪器与设备第62-63页
        2.2.2 材料与试剂第63-66页
        2.2.3 实验方法第66-71页
    2.3 结果与讨论第71-78页
        2.3.1 带标签双杂交质粒的构建第71-75页
        2.3.2 BACTH系统的构建第75-78页
    2.4 本章小结第78页
    参考文献第78-81页
第三章 细菌胞质蛋白流式检测方法的建立第81-113页
    3.1 引言第81-82页
    3.2 实验部分第82-87页
        3.2.1 仪器与设备第82-84页
        3.2.2 材料与试剂第84-85页
        3.2.3 实验方法第85-87页
    3.3 结果与讨论第87-108页
        3.3.1 BD FACSVerse与HSFCM的检测灵敏度对比第87-88页
        3.3.2 BACTH系统中蛋白质相互作用的HSFCM检测第88-93页
        3.3.3 BACTH系统中相互作用蛋白表达量的HSFCM检测第93-99页
        3.3.4 β-半乳糖苷酶的免疫荧光染色及检测第99-102页
        3.3.5 传统流式细胞仪对BACTH系统中蛋白表达的检测第102-105页
        3.3.6 BACTH系统中报告基因与相互作用蛋白表达的双参数检测第105-108页
    3.4 本章小结第108页
    参考文献第108-113页
第四章 BACTH系统蛋白质相互作用强度定量检测方法的建立第113-132页
    4.1 引言第113-114页
    4.2 实验部分第114-119页
        4.2.1 仪器与设备第114-115页
        4.2.2 材料与试剂第115-116页
        4.2.3 实验方法第116-119页
    4.3 结果与讨论第119-128页
        4.3.1 BACTH系统中相互作用蛋白表达与报告基因表达的关系第119-123页
        4.3.2 染色比例相关问题研究第123-126页
        4.3.3 不同相互作用蛋白对的相对报告基因表达量第126-128页
    4.4 本章小结第128-129页
    参考文献第129-132页
第五章 BACTH系统蛋白质相互作用强度定量检测方法的应用第132-155页
    5.1 引言第132-133页
    5.2 实验部分第133-141页
        5.2.1 仪器与设备第133页
        5.2.2 材料与试剂第133-136页
        5.2.3 实验方法第136-141页
    5.3 结果与讨论第141-150页
        5.3.1 利用相对报告基因表达量对一系列蛋白对的相互作用强度排序第141-147页
        5.3.2 基于BACTH系统的相互作用抑制剂筛选方法初探第147-150页
    5.4 本章小结第150-151页
    参考文献第151-155页
第六章 总结与展望第155-158页
    6.1 总结第155-156页
    6.2 展望第156-158页
在学期间发表的论文第158-159页
致谢第159页

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