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烟草打顶诱导的腋芽转录组分析及相关基因功能研究

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
英文缩略表第13-15页
第一章 前言第15-29页
    1.1 生长素对植物分枝发育的调控第15-17页
        1.1.1 生长素运输渠道控制模型第15-16页
        1.1.2 生长素间接抑制腋芽生长—第二信使模型第16-17页
    1.2 细胞分裂素对植物分枝发育的调控第17-18页
        1.2.1 细胞分裂素调控顶端分生组织大小第17页
        1.2.2 细胞分裂素促进腋芽生长第17-18页
        1.2.3 去顶后在茎节中合成细胞分裂素第18页
    1.3 独脚金内酯对植物分枝发育的调控第18-20页
        1.3.1 独脚金内酯抑制腋芽生长第18页
        1.3.2 独脚金内酯的合成第18-19页
        1.3.3 独脚金内酯的信号传导第19-20页
    1.4 生长素与细胞分裂素互作对植物分枝的调控第20-21页
        1.4.1 生长素调节IPT基因表达抑制细胞分裂素合成第20页
        1.4.2 生长素调节细胞分裂素氧化酶基因(CKX)表达抑制细胞分裂素合成第20-21页
    1.5 生长素与独脚金内酯互作对植物分枝的调控第21-23页
        1.5.1 独脚金内酯抑制生长素极性运输流第21-22页
        1.5.2 生长素调控独脚金内酯合成第22-23页
    1.6 细胞分裂素与独脚金内酯互作对植物分枝的调控第23-24页
    1.7 激素调控植物分枝的动态平衡第24-25页
    1.8 BRC1 基因对腋芽生长的调控第25-26页
    1.9 环境对植物分枝的影响第26-27页
        1.9.1 光对植物分枝的影响第26页
        1.9.2 营养元素对植物分枝的影响第26-27页
    1.10 展望第27页
    1.11 本研究的目的意义与技术路线第27-29页
        1.11.1 目的意义第27-28页
        1.11.2 技术路线第28-29页
第二章 烟草打顶诱导的腋芽转录组水平应答分析第29-54页
    2.1 材料与方法第29-32页
        2.1.1 植物材料第29页
        2.1.2 提取烟草组织RNA第29-30页
        2.1.3 cDNA第一条链的合成第30页
        2.1.4 RNA样品检测第30页
        2.1.5 RNA-seq的建库与测序第30-31页
        2.1.6 数据分析第31页
        2.1.7 定量PCR第31-32页
    2.2 结果与分析第32-49页
        2.2.1 腋芽的发育第33-34页
        2.2.2 转录组测序第34-35页
        2.2.3 GO富集分析第35-40页
        2.2.4 KEGG功能分析第40-43页
        2.2.5 植物信号转导转录表达模式第43-44页
        2.2.6 涉及腋芽生长的其它相关基因第44-45页
        2.2.7 烟草打顶前后根部转录组测序第45页
        2.2.8 qRT-PCR检测转录组数据的准确性第45-46页
        2.2.9 烟草打顶前后转录因子预测第46-47页
        2.2.10 参与腋芽发育转录因子MYB/GRAS/LOB显著差异基因的筛选第47-48页
        2.2.11 参与独角金内酯合成相关基因中的显著差异基因的筛选第48-49页
    2.3 讨论第49-54页
        2.3.1 腋芽转录组中DEGs的鉴定第49页
        2.3.2 碳水化合物代谢在腋芽生长中的作用第49-50页
        2.3.3 植物激素信号转导在腋芽生长中的作用第50-51页
        2.3.4 植物转录因子在腋芽生长中的作用第51-52页
        2.3.5 独角金内酯在腋芽生长中的作用第52-54页
第三章 转录因子MYB44和LOB11 的基因编辑第54-64页
    3.1 材料与方法第54-60页
        3.1.1 材料和试剂第54-55页
        3.1.2 候选目标基因的靶位点设计研究第55-56页
        3.1.3 目标基因的基因组编辑载体构建第56-58页
        3.1.4 烟草基因编辑遗传转化苗的获取第58-59页
        3.1.5 烟草基因编辑植株的鉴定第59-60页
    3.2 结果与分析第60-63页
        3.2.1 MYB44和LOB11 靶位点的设计第60-61页
        3.2.2 MYB44和LOB11 引物设计第61页
        3.2.3 基因编辑转化苗的获取第61-62页
        3.2.4 基因编辑苗的鉴定第62-63页
    3.3 讨论第63-64页
第四章 烟草NtMAX3和NtMAX4 基因克隆及功能分析第64-80页
    4.1 材料第64页
    4.2 方法第64-69页
        4.2.1 外源喷施GR24 处理打顶后烟株第64页
        4.2.2 总RNA提取第64-65页
        4.2.3 cDNA第一条链的合成第65页
        4.2.4 RACE克隆基因第65-68页
        4.2.5 NtMAX3和NtMAX4 RNAi载体和植物表达载体的构建转化第68-69页
        4.2.6 烟草遗传转化第69页
    4.3 结果与分析第69-78页
        4.3.1 外源施加独脚金内酯类似物GR24 对烟草打顶后腋芽发育的影响第69-70页
        4.3.2 NtMAX3和NtMAX4 基因克隆第70-73页
        4.3.3 NtMAX3和NtMAX4 RNAi载体的构建第73-75页
        4.3.4 NtMAX3和NtMAX4 全长序列的获取及过表达载体构建第75页
        4.3.5 NtMAX3和NtMAX4 基因功能分析第75-78页
    4.4 讨论第78-80页
第五章 烟草腋芽突变体鉴定及mbd3 突变体遗传分析第80-86页
    5.1 材料与方法第80页
        5.1.1 EMS诱变烟草突变群体创制第80页
        5.1.2 烟草腋芽突变体筛选方法第80页
        5.1.3 突变体筛选过程第80页
    5.2 结果与分析第80-84页
        5.2.1 EMS诱变烟草突变群体M2 代表型及突变率第80-83页
        5.2.2 EMS诱变腋芽多突变体第83页
        5.2.3 mbd3 突变体遗传分析及表型鉴定第83-84页
    5.3 讨论第84-86页
第六章 全文结论第86-88页
参考文献第88-97页
致谢第97-98页
作者简历第98页

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