| 摘要 | 第11-12页 |
| ABSTRACT | 第12页 |
| 中英文名称术语及缩写对照 | 第13-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-31页 |
| 1.1 肝癌简介 | 第15-17页 |
| 1.1.1 肝癌流行病学 | 第15-16页 |
| 1.1.2 肝癌的分类及常见致病因素 | 第16-17页 |
| 1.2 癌症治疗药物研究现状 | 第17-20页 |
| 1.2.1 肝癌治疗方法 | 第17-18页 |
| 1.2.2 目前的肝癌治疗药物 | 第18-20页 |
| 1.3 HIpPO通路 | 第20-24页 |
| 1.3.1 Hippo通路概述 | 第20-22页 |
| 1.3.2 Hippo通路与常见癌症 | 第22-24页 |
| 1.4 HIPPO信号通路下游的关键因子 | 第24-29页 |
| 1.4.1 YAP蛋白 | 第24-25页 |
| 1.4.2 TEAD蛋白家族 | 第25-26页 |
| 1.4.3 YAP和-TEAD的相互作用 | 第26-28页 |
| 1.4.4 YAP-TEAD转录活性与癌症 | 第28-29页 |
| 1.5 筛选出的候选化合物简介 | 第29-30页 |
| 1.5.1 C2071 | 第29-30页 |
| 1.5.2 C2076 | 第30页 |
| 1.6 本课题的意义及拟展开的工作 | 第30-31页 |
| 第二章 抑制YAP-TEAD转录活性的高通量筛选模型的建立和化合物筛选 | 第31-48页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第31-35页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第31页 |
| 2.1.2 菌株 | 第31页 |
| 2.1.3 常用试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.4 质粒载体 | 第32页 |
| 2.1.5 酶 | 第32页 |
| 2.1.6 试剂盒 | 第32-33页 |
| 2.1.7 实验仪器 | 第33页 |
| 2.1.8 常用溶液配制 | 第33-34页 |
| 2.1.9 实验耗材表 | 第34-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-40页 |
| 2.2.1 质粒构建 | 第35-37页 |
| 2.2.2 质粒转染 | 第37-38页 |
| 2.2.3 稳转细胞系的构建 | 第38-39页 |
| 2.2.4 荧光报告系统检测 | 第39页 |
| 2.2.5 细胞培养 | 第39页 |
| 2.2.6 细胞复苏 | 第39-40页 |
| 2.2.7 细胞消化 | 第40页 |
| 2.2.8 细胞冻存 | 第40页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第40-47页 |
| 2.3.1 高通量筛选模型的建立 | 第40-41页 |
| 2.3.2 基于高通量筛选模型的化合物筛选 | 第41-47页 |
| 2.4 小结 | 第47-48页 |
| 第三章 所筛选出的化合物的抗癌活性及初步安全性研究 | 第48-66页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第48-51页 |
| 3.1.1 细胞系 | 第48页 |
| 3.1.2 常用试剂 | 第48-49页 |
| 3.1.3 抗体 | 第49-50页 |
| 3.1.4 试剂盒 | 第50页 |
| 3.1.5 实验仪器 | 第50页 |
| 3.1.6 常用溶液配制 | 第50-51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51-55页 |
| 3.2.1 MTT法短期检测化合物对细胞毒性 | 第51-52页 |
| 3.2.2 MTT法长期检测化合物抗增殖能力 | 第52页 |
| 3.2.3 Western Blot(蛋白质印迹实验,WB)检测蛋白 | 第52-54页 |
| 3.2.4 划痕实验检测细胞迁移能力 | 第54页 |
| 3.2.5 transwell实验检测细胞侵袭能力 | 第54-55页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第55-64页 |
| 3.3.1 化合物对不同细胞系短期毒性的效果 | 第55-61页 |
| 3.3.2 化合物的抗增殖效果 | 第61-62页 |
| 3.3.3 化合物的抗迁移效果 | 第62-63页 |
| 3.3.4 化合物的抗侵袭效果 | 第63-64页 |
| 3.4 小结 | 第64-66页 |
| 第四章 鱼藤素和C2076发挥抗癌作用可能的潜在机理 | 第66-76页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第66页 |
| 4.1.1 试剂盒 | 第66页 |
| 4.1.2 仪器 | 第66页 |
| 4.2 实验方法 | 第66-70页 |
| 4.2.1 细胞凋亡 | 第66-67页 |
| 4.2.2 细胞周期 | 第67页 |
| 4.2.3 实时荧光定量PCR | 第67-70页 |
| 4.3 突验结果与讨论 | 第70-74页 |
| 4.3.1 化合物对Hippo通路重要下原癌基因的影响 | 第70-71页 |
| 4.3.2 化合物在促进细胞凋亡方面的效果 | 第71-72页 |
| 4.3.3 化合物对细胞周期的影响 | 第72-74页 |
| 4.4 小结 | 第74-76页 |
| 全文总结与展望 | 第76-79页 |
| 参考文献 | 第79-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
