| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 上篇 文献综述 稻瘟病菌功能基因研究进展 | 第13-24页 |
| 1 稻瘟病菌 | 第14-18页 |
| 1.1 稻瘟病菌研究概况 | 第14页 |
| 1.2 稻瘟病菌的侵染循环 | 第14-15页 |
| 1.3 稻瘟病菌致病相关基因 | 第15-18页 |
| 1.3.1 外界信号识别的相关基因 | 第15-16页 |
| 1.3.2 与产孢相关基因 | 第16页 |
| 1.3.3 附着胞分化相关基因 | 第16-17页 |
| 1.3.4 黑色素形成积累的相关基因 | 第17页 |
| 1.3.5 甘油合成的相关基因 | 第17页 |
| 1.3.6 参与侵入和侵入后扩展的相关基因 | 第17-18页 |
| 2 真菌基因簇 | 第18-20页 |
| 2.1 调节奎尼酸代谢的基因簇 | 第18-19页 |
| 2.2 调节乙醇代谢的基因簇 | 第19页 |
| 2.3 调节脯氨酸代谢的基因簇 | 第19-20页 |
| 3 稻瘟病菌中一个可能的基因簇 | 第20-22页 |
| 3.1 相关基因研究概况 | 第20-22页 |
| 3.1.1 Zn_2Cys_6锌指蛋白 | 第20页 |
| 3.1.2 糖转运蛋白 | 第20-21页 |
| 3.1.3 NLP蛋白家族 | 第21-22页 |
| 4 本研究的目的及意义 | 第22-24页 |
| 下篇 研究内容 | 第24-48页 |
| 1 材料与方法 | 第25-33页 |
| 1.1 供试菌株及培养条件 | 第25-26页 |
| 1.2 培养基 | 第26页 |
| 1.3 基因序列分析 | 第26页 |
| 1.4 聚合酶链反应(PCR) | 第26-27页 |
| 1.4.1 常规PCR | 第26-27页 |
| 1.4.2 实时荧光定量PCR | 第27页 |
| 1.5 基因敲除 | 第27-28页 |
| 1.5.1 基因敲除载体的构建及真菌转化 | 第27-28页 |
| 1.5.2 转化子的筛选及验证 | 第28页 |
| 1.5.3 突变体菌株单孢分离 | 第28页 |
| 1.6 稻瘟病菌DNA的提取 | 第28-29页 |
| 1.6.1 玻璃珠法(用于转化子的PCR验证) | 第28-29页 |
| 1.6.2 CTAB法 | 第29页 |
| 1.7 蛋白定位载体构建 | 第29-30页 |
| 1.8 突变体表型分析 | 第30-33页 |
| 1.8.1 生长速度及菌落形态 | 第30页 |
| 1.8.2 对不同碳源利用能力测定 | 第30页 |
| 1.8.3 对活性氧的耐受性及细胞壁完整性测定 | 第30页 |
| 1.8.4 有性生殖 | 第30-31页 |
| 1.8.5 致病性测定 | 第31-33页 |
| 2 结果分析 | 第33-46页 |
| 2.1 基因序列分析 | 第33-36页 |
| 2.2 MGG_10528和MGG_10529的亚细胞定位 | 第36-37页 |
| 2.3 基因敲除 | 第37-39页 |
| 2.4 基因的时空表达动态 | 第39-40页 |
| 2.5 表型分析 | 第40-46页 |
| 2.5.1 菌落形态及生长速度 | 第40-42页 |
| 2.5.2 致病性检测 | 第42页 |
| 2.5.3 对活性氧的耐受性 | 第42-43页 |
| 2.5.4 细胞壁强度测定 | 第43-44页 |
| 2.5.5 对不同碳源的利用能力 | 第44-45页 |
| 2.5.6 有性生殖 | 第45-46页 |
| 3 小节和讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录1 培养基配方 | 第54-57页 |
| 附录2 缓冲液配方 | 第57-58页 |
| 附录3 大肠杆菌转化 | 第58-59页 |
| 附录4 胶回收(DNA片段) | 第59-60页 |
| 附录5 小剂量DNA质粒的提取 | 第60-61页 |
| 附录6 农杆菌感受态的制备与转化 | 第61-62页 |
| 附录7 稻瘟病菌AtMT转化 | 第62-63页 |
| 附录8 缩略词 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |