| 中文摘要 | 第12-14页 |
| ABSTRACT | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-27页 |
| 1.1 氨酰-tRNA合成酶 | 第17-20页 |
| 1.1.1 氨酰-tRNA合成酶的催化特性 | 第17-18页 |
| 1.1.2 氨酰-tRNA合成酶的分类 | 第18页 |
| 1.1.3 氨酰-tRNA合成酶结构与功能的进化 | 第18-19页 |
| 1.1.4 氨酰-tRNA合成酶的应用前景 | 第19-20页 |
| 1.2 赖氨酰-tRNA合成酶 | 第20-21页 |
| 1.3 编程性核糖体移码 | 第21-23页 |
| 1.4 八肋游仆虫 | 第23-25页 |
| 1.5 本课题的研究思路及意义 | 第25-27页 |
| 1.5.1 本课题的研究思路 | 第25-26页 |
| 1.5.2 本课题的研究意义 | 第26-27页 |
| 第二章 八肋游仆虫氨酰-tRNA合成酶基因序列分析 | 第27-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28页 |
| 2.2.1 八肋游仆虫aaRS基因的鉴定 | 第28页 |
| 2.2.2 生物信息学分析 | 第28页 |
| 2.2.3 进化分析 | 第28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-36页 |
| 2.3.1 八肋游仆虫aaRS基因的鉴定 | 第28-31页 |
| 2.3.2 两套EoaaRS基因 | 第31页 |
| 2.3.3 多个EoaaRS基因在翻译过程中需发生编程性核糖体移码 | 第31-33页 |
| 2.3.4 EoaaRS含有多种特殊结构域 | 第33-34页 |
| 2.3.5 八肋游仆虫GlyRS和LysRS系统进化树分析 | 第34-36页 |
| 2.4 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 八肋游仆虫赖氨酰-tRNA合成酶的克隆和表达纯化 | 第38-52页 |
| 3.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1 菌株和载体 | 第38页 |
| 3.1.2 引物、主要酶及分子生物学试剂 | 第38页 |
| 3.1.3 主要实验试剂的配制 | 第38页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第38-39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-44页 |
| 3.2.1 八肋游仆虫的培养和收集 | 第39页 |
| 3.2.2 八肋游仆虫LysRS基因的克隆 | 第39-42页 |
| 3.2.3 定点突变 | 第42页 |
| 3.2.4 重组表达质粒pET-28a-LysRS-1的构建 | 第42页 |
| 3.2.5 重组蛋白的表达纯化 | 第42-44页 |
| 3.2.6 重组蛋白EoLysRS-1的热稳定性 | 第44页 |
| 3.3 结果与分析 | 第44-50页 |
| 3.3.1 八肋游仆虫LysRS基因的克隆与序列分析 | 第44-45页 |
| 3.3.2 八肋游仆虫LysRS氨基酸序列比对分析 | 第45-47页 |
| 3.3.3 重组表达质粒pET-28a-LysRS-1的构建 | 第47-48页 |
| 3.3.4 重组蛋白EoLysRS-1的表达纯化 | 第48-49页 |
| 3.3.5 重组蛋白EoLysRS-1的热稳定性检测 | 第49-50页 |
| 3.4 讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 八肋游仆虫编程性核糖体移码体外检测系统的构建 | 第52-60页 |
| 4.1 实验材料 | 第52页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第52页 |
| 4.1.2 引物、主要酶及分子生物学试剂 | 第52页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第52页 |
| 4.2 实验方法 | 第52-56页 |
| 4.2.1 八肋游仆虫tRNA~(Lys)体外转录模板的制备 | 第52-54页 |
| 4.2.2 八肋游仆虫tRNA~(Lys)的体外转录 | 第54页 |
| 4.2.3 体外转录产物的纯化 | 第54页 |
| 4.2.4 萤火虫荧光素酶移码报告质粒的构建 | 第54-55页 |
| 4.2.5 八肋游仆虫特殊tRNA~(Lys-1)对移码的影响 | 第55-56页 |
| 4.3 结果与分析 | 第56-58页 |
| 4.3.1 八肋游仆虫tRNA~(Lys)的体外转录 | 第56-57页 |
| 4.3.2 萤火虫荧光素酶移码报告质粒的构建 | 第57页 |
| 4.3.3 八肋游仆虫特殊tRNA~(Lys-1)对移码的影响 | 第57-58页 |
| 4.4 讨论 | 第58-60页 |
| 总结与展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 附录1 缩略语 | 第70-71页 |
| 附录2 常用试剂配制 | 第71-73页 |
| 附录3 主要仪器设备 | 第73-74页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 个人简况及联系方式 | 第76-77页 |
