| 致谢 | 第4-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-14页 |
| 1.1 miRNA基因的结构与功能 | 第8-10页 |
| 1.1.1 miRNA基因在基因组中的结构和位置 | 第8页 |
| 1.1.2 miRNA基因的转录和加工 | 第8-9页 |
| 1.1.3 miRNA的功能 | 第9页 |
| 1.1.4 miRNA基因表达的调节 | 第9-10页 |
| 1.2 花青素的生物学合成 | 第10-12页 |
| 1.2.1 花青素 | 第10页 |
| 1.2.2 花青素的合成 | 第10-11页 |
| 1.2.3 花青素的修饰与运输 | 第11页 |
| 1.2.4 稳定性及降解 | 第11-12页 |
| 1.2.5 花青素合成与积累的影响因素 | 第12页 |
| 1.3 拟南芥中bZIP转录因子HY5的功能 | 第12-14页 |
| 1.3.1 HY5参与拟南芥幼苗光形态建成 | 第12页 |
| 1.3.2 HY5是多种光信号和激素信号途径相互作用的一个关键调控因子 | 第12-13页 |
| 1.3.3 HY5在拟南芥中能够调控microRNA基因的表达 | 第13-14页 |
| 2 引言 | 第14-15页 |
| 3 材料与方法 | 第15-29页 |
| 3.1 实验材料 | 第15页 |
| 3.2 试剂与仪器 | 第15页 |
| 3.2.1 主要试剂和所需溶液 | 第15页 |
| 3.2.2 所需仪器 | 第15页 |
| 3.3 试验方法 | 第15-29页 |
| 3.3.1 植物组织DNA提取 | 第15-16页 |
| 3.3.2 植物总RNA的提取 | 第16页 |
| 3.3.3 重组载体的构建 | 第16-18页 |
| 3.3.4 重组载体转化农杆菌GV3101感受态细胞 | 第18页 |
| 3.3.5 花浸法浸染拟南芥 | 第18页 |
| 3.3.6 转基因植株的鉴定与分析 | 第18页 |
| 3.3.7 Westernblot蛋白分析 | 第18-21页 |
| 3.3.8 RNAblot分析(本实验所需的水均为1%DEPC处理水) | 第21-22页 |
| 3.3.9 qRT-PCR分析相关基因的表达 | 第22页 |
| 3.3.10 花青素的提取和测定 | 第22页 |
| 3.3.11 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第22-25页 |
| 3.3.12 实验所需引物 | 第25-29页 |
| 4 结果与分析 | 第29-43页 |
| 4.1 HY5下游靶miR858a通过抑制MYBL2基因的翻译正调控花青素的合成 | 第29-38页 |
| 4.1.1 转基因植株的获得、鉴定和表达分析 | 第29-32页 |
| 4.1.1.1 MIR858a-OX载体构建和转基因植株的鉴定分析 | 第29-30页 |
| 4.1.1.2 STTM858载体构建和转基因植株的鉴定分析 | 第30-31页 |
| 4.1.1.3 proMYBL2:MYBL2-HA表达载体的构建和转基因植株的获得与鉴定 | 第31-32页 |
| 4.1.2 miR858a能够促进花青素合成 | 第32-34页 |
| 4.1.3 miR858a通过翻译抑制调控MYBL2基因的表达 | 第34-36页 |
| 4.1.4 MIR858a基因的光诱导表达需要HY5的存在 | 第36页 |
| 4.1.5 HY5能够直接调控MYBL2基因的表达 | 第36-38页 |
| 4.2 HY5下游靶miRNA调控拟南芥光形态建成的初步分析 | 第38-43页 |
| 4.2.1 MIR402和MIR777组织特异性表达特征 | 第38-39页 |
| 4.2.2 MIR402和MIR777原位过表达转基因植株的获得和分析 | 第39-41页 |
| 4.2.3 STTM402和STTM777沉默转基因植株的获得 | 第41-42页 |
| 4.2.4 miR402和miR777靶基因在线预测 | 第42-43页 |
| 5 结论与讨论 | 第43-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| ABSTRACT | 第54-55页 |
