| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第13-27页 |
| 1.1 D-丙氨酸研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1.1 D-丙氨酸结构和特性 | 第13-14页 |
| 1.1.2 D-丙氨酸在细菌细胞壁中的作用 | 第14-17页 |
| 1.1.3 基于丙氨酸消旋酶的食品级表达系统的研究 | 第17-18页 |
| 1.2 芽胞杆菌表达系统研究进展 | 第18-22页 |
| 1.2.1 地衣芽胞杆菌表达系统 | 第18页 |
| 1.2.2 芽胞杆菌蛋白高效表达策略 | 第18-19页 |
| 1.2.3 食品级表达系统研究进展 | 第19-22页 |
| 1.3 聚γ-谷氨酸的研究进展 | 第22-26页 |
| 1.3.1 聚γ-谷氨酸性质及其应用 | 第22页 |
| 1.3.2 聚γ-谷氨酸生物合成途径及调控 | 第22-25页 |
| 1.3.3 聚γ-谷氨酸代谢工程育种 | 第25-26页 |
| 1.4 研究的目的与意义 | 第26-27页 |
| 第二章 基于丙氨酸消旋酶的地衣芽胞杆菌食品级表达系统的构建 | 第27-58页 |
| 2.1 前言 | 第27-28页 |
| 2.2 材料与方法 | 第28-45页 |
| 2.2.1 菌株与质粒 | 第28-29页 |
| 2.2.2 引物列表 | 第29-30页 |
| 2.2.3 培养基及培养条件 | 第30-31页 |
| 2.2.4 工具酶和试剂 | 第31页 |
| 2.2.5 缓冲液 | 第31-33页 |
| 2.2.6 主要实验仪器 | 第33-34页 |
| 2.2.7 分子水平操作 | 第34-37页 |
| 2.2.8 重组菌株的构建 | 第37-40页 |
| 2.2.9 重组质粒遗传稳定性的检测 | 第40页 |
| 2.2.10 地衣芽胞杆菌α-淀粉酶发酵 | 第40页 |
| 2.2.11 α-淀粉酶酶活的测定 | 第40-41页 |
| 2.2.12 SDS-PAGE检测 | 第41页 |
| 2.2.13 基因转录水平分析 | 第41-44页 |
| 2.2.14 数据处理 | 第44-45页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第45-57页 |
| 2.3.1 四环素添加对质粒遗传稳定性和α-淀粉酶表达的影响 | 第45-46页 |
| 2.3.2 地衣芽胞杆菌食品级表达系统的构建 | 第46-53页 |
| 2.3.3 调节丙氨酸消旋酶表达水平促α-淀粉酶高产 | 第53-57页 |
| 2.4 小结 | 第57-58页 |
| 第三章 通过调节D-丙氨酸代谢节点促聚γ-谷氨酸高产 | 第58-76页 |
| 3.1 前言 | 第58页 |
| 3.2 材料与方法 | 第58-64页 |
| 3.2.1 菌株与质粒 | 第58-59页 |
| 3.2.2 引物列表 | 第59-61页 |
| 3.2.3 培养基及培养条件 | 第61页 |
| 3.2.4 工具酶和试剂 | 第61页 |
| 3.2.5 缓冲液 | 第61页 |
| 3.2.6 主要实验仪器 | 第61页 |
| 3.2.7 分子水平操作 | 第61页 |
| 3.2.8 重组菌株的构建 | 第61页 |
| 3.2.9 聚γ-谷氨酸的发酵 | 第61-62页 |
| 3.2.10 聚γ-谷氨酸产量及菌体生物量的测定 | 第62页 |
| 3.2.11 乙偶姻、2,3-丁二醇和乙酸浓度测定 | 第62-63页 |
| 3.2.12 丙氨酸和谷氨酸浓度测定 | 第63页 |
| 3.2.13 丙酮酸和乳酸浓度测定 | 第63-64页 |
| 3.2.14 数据处理 | 第64页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第64-75页 |
| 3.3.1 D-丙氨酸添加对菌体生长和聚γ-谷氨酸合成的影响 | 第64-67页 |
| 3.3.2 D-丙氨酸代谢相关菌株的构建 | 第67-68页 |
| 3.3.3 D-丙氨酸代谢节点的调节对聚γ-谷氨酸合成的影响 | 第68-72页 |
| 3.3.4 D-丙氨酸代谢节点的调节对其他代谢产物合成的影响 | 第72-75页 |
| 3.4 小结 | 第75-76页 |
| 第四章 结论与展望 | 第76-78页 |
| 4.1 结论 | 第76-77页 |
| 4.2 展望 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第87页 |
