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鼠伤寒沙门氏菌LPS诱导雏鸡胸腺损伤机制的转录组学研究

摘要第9-12页
ABSTRACT第12-15页
缩略词表第16-17页
1 前言第17-31页
    1.1 研究问题的由来第17-18页
    1.2 文献综述第18-31页
        1.2.1 胸腺功能简介第18-19页
        1.2.2 胸腺的免疫屏障第19-20页
        1.2.3 胸腺是病原微生物的靶器官第20-23页
        1.2.4 S.Typhimurium感染对免疫相关器官的影响第23-24页
        1.2.5 LPS在S.Typhimurium感染中的作用第24-26页
        1.2.6 LncRNAs研究概述第26-27页
        1.2.7 LncRNAs在免疫系统中的作用第27-30页
        1.2.8 转录组研究在鸡疾病研究中的应用第30-31页
    1.3 本研究的目的和意义第31页
2 材料和方法第31-49页
    2.1 试验动物第31页
    2.2 试验仪器第31-32页
    2.3 主要试剂第32-33页
    2.4 试剂配制第33-34页
    2.5 主要生物信息学分析工具第34-35页
    2.6 S.Typhimurium培养与感染试验第35页
    2.7 SalmonellaLPS刺激试验第35页
    2.8 雏鸡胸腺取材第35-36页
    2.9 组织包埋与切片第36页
    2.10 苏木素伊红染色第36-37页
    2.11 甲苯胺蓝染色第37页
    2.12 TUNEL染色第37-38页
    2.13 Formamide-MAb染色第38页
    2.14 免疫组织化学染色第38-39页
    2.15 流式细胞术检测第39-40页
    2.16 胸腺RNA提取第40页
    2.17 RNA质量检测第40页
    2.18 Poly(A)+RNA-seq建库及测序第40-41页
    2.19 Poly(A)+RNA-seq数据分析第41-42页
    2.20 rRNA-depletedRNA-seq建库及测序第42-44页
    2.21 rRNA-depletedRNA-seq数据分析第44-46页
    2.22 实时荧光定量PCR第46-49页
3 结果第49-105页
    3.1 S.Typhimurium感染对雏鸡胸腺的影响第49-53页
        3.1.1 感染诱导胸腺急性萎缩第49-50页
        3.1.2 感染未破坏胸腺组织结构第50页
        3.1.3 感染加剧胸腺皮质区细胞死亡第50-53页
    3.2 SalmonellaLPS刺激对雏鸡胸腺的影响第53-62页
        3.2.1 LPS刺激诱导胸腺急性萎缩第53-55页
        3.2.2 LPS刺激未破坏胸腺组织结构第55页
        3.2.3 LPS刺激加剧胸腺皮质区细胞死亡第55-58页
        3.2.4 LPS刺激对chT1+、CD4+/CD8+细胞比例的影响第58页
        3.2.5 LPS刺激增加胸腺髓质肥大细胞的数量第58页
        3.2.6 LPS刺激促进胸腺皮质LEP100表达第58-62页
    3.3 基于Poly(A)+RNA-seq的mRNAs的表达和功能分析第62-81页
        3.3.1 RNA质检结果第62-63页
        3.3.2 碱基质量结果第63-65页
        3.3.3 数据比对结果第65-66页
        3.3.4 样本间相关性分析第66页
        3.3.5 mRNAs在胸腺损伤中差异表达第66-69页
        3.3.6 mRNAs富集于免疫与细胞分裂等过程第69-71页
        3.3.7 mRNAs富集于炎症与细胞周期等通路第71-74页
        3.3.8 实时荧光定量PCR验证第74-81页
    3.4 基于rRNA-depletedRNA-seq的lncRNAs的表达和功能分析第81-105页
        3.4.1 RNA质检结果第81-83页
        3.4.2 碱基质量结果第83-86页
        3.4.3 数据比对结果第86-87页
        3.4.4 鉴定出5520个lncRNAs第87-89页
        3.4.5 LncRNAs基因特征第89-90页
        3.4.6 样本间相关性分析第90-91页
        3.4.7 LncRNAs在胸腺损伤中差异表达第91页
        3.4.8 LncRNAs靶基因预测第91-94页
        3.4.9 LncRNAs靶基因富集于免疫与细胞分裂等过程第94-96页
        3.4.10 LncRNAs靶基因富集于激酶、细胞因子与细胞周期等通路第96-98页
        3.4.11 TLR-MAPKs-Cytokines和细胞周期通路可视化分析第98-103页
        3.4.12 实时荧光定量PCR验证第103-105页
4 讨论第105-112页
    4.1 S.Typhimurium感染与雏鸡胸腺损伤第105-106页
    4.2 SalmonellaLPS刺激与雏鸡胸腺损伤第106页
    4.3 雏鸡胸腺损伤与胸腺输出功能第106-107页
    4.4 雏鸡胸腺损伤反应中mRNAs与lncRNAs的表达第107-108页
    4.5 TLR介导的炎症反应在胸腺损伤反应中的作用第108-111页
    4.6 LncRNAs的靶基因在胸腺损伤反应中的作用第111-112页
5 小结第112-114页
    5.1 本研究的主要结论第112页
    5.2 本研究的创新与特色第112页
    5.3 本研究进一步工作的建议第112-114页
参考文献第114-127页
附录1 补充数据第127-144页
附录2 个人简介第144-145页
附录3 发表学术论文第145-147页
致谢第147-148页

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