| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第9-24页 |
| 1.1 课题背景及研究目的和意义 | 第9-12页 |
| 1.2 对小鼠Dlk1-Dio3印记区间的相关研究 | 第12-15页 |
| 1.2.1 Dlk1-Dio3印记区间的相关介绍 | 第12-13页 |
| 1.2.2 Dlk1-Dio3印记区间的相关调控作用 | 第13-14页 |
| 1.2.3 Dlk1-Dio3印记区间中已知的差异甲基化区的研究 | 第14-15页 |
| 1.3 CRISPR/Cas9的相关研究 | 第15-21页 |
| 1.3.1 CRISPR/Cas9技术的原理简介 | 第15-16页 |
| 1.3.2 CRISPR/Cas9的国内外研究现状 | 第16-19页 |
| 1.3.3 有关CRISPR/Cas9技术的相关应用 | 第19-21页 |
| 1.4 显微操作技术的相关介绍 | 第21-23页 |
| 1.5 本研究的主要研究内容及技术路线 | 第23-24页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第24-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第24页 |
| 2.1.2 实验试剂与试剂盒 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要试剂的配置 | 第26-27页 |
| 2.1.5 生物信息学网站及数据分析软件 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-41页 |
| 2.2.1 显微注射用sgRNA的获得 | 第27-29页 |
| 2.2.2 sgRNA和Cas9mRNA的体外转录 | 第29页 |
| 2.2.3 假孕母鼠的获得 | 第29-30页 |
| 2.2.4 用于显微注射的受精卵的获得 | 第30-31页 |
| 2.2.5 显微注射 | 第31-32页 |
| 2.2.6 胚胎的体外培养 | 第32页 |
| 2.2.7 胚胎移植 | 第32-33页 |
| 2.2.8 术后母鼠的饲养 | 第33页 |
| 2.2.9 着床前胚胎总RNA的提取 | 第33页 |
| 2.2.10 逆转录cDNA | 第33-34页 |
| 2.2.11 组织DNA的提取 | 第34-35页 |
| 2.2.12 敲除小鼠的鉴定 | 第35-38页 |
| 2.2.13 小鼠组织的石蜡切片 | 第38-40页 |
| 2.2.14 HE染色 | 第40-41页 |
| 第3章 实验结果 | 第41-55页 |
| 3.1 CGI-2敲除小鼠的获得 | 第41-49页 |
| 3.1.1 sgRNA的设计与合成 | 第41-42页 |
| 3.1.2 Cas9mRNA的获得 | 第42页 |
| 3.1.3 用于显微注射的受精卵的获得 | 第42-43页 |
| 3.1.4 受精卵显微注射和体外培养 | 第43页 |
| 3.1.5 胚胎移植及阳性小鼠鉴定 | 第43-46页 |
| 3.1.6 CGI-2双等位敲除小鼠的获得 | 第46-47页 |
| 3.1.7 新生鼠的鉴定 | 第47-49页 |
| 3.2 ICR品系CGI-2双等位敲除鼠的获得及初步分析 | 第49-52页 |
| 3.2.1 ICR品系CGI-2双等位敲除鼠的获得 | 第49-50页 |
| 3.2.2 CGI-2敲除小鼠体重的初步分析 | 第50页 |
| 3.2.3 CGI-2敲除小鼠体征的初步分析 | 第50-51页 |
| 3.2.4 CGI-2敲除小鼠组织形态的初步分析 | 第51-52页 |
| 3.3 讨论 | 第52-55页 |
| 第4章 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 附录一 | 第64-65页 |
| 附录二 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
