| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-26页 |
| 1.1 PPCPs类物质概述 | 第10-17页 |
| 1.1.1 PPCPs的定义、分类与环境水平 | 第10-11页 |
| 1.1.2 PPCPs的环境行为与生态毒理效应 | 第11-13页 |
| 1.1.3 双氯芬酸 | 第13-15页 |
| 1.1.4 辛伐他汀 | 第15-17页 |
| 1.2 外源物质在生物体内的解毒代谢过程 | 第17-23页 |
| 1.2.1 Phase0、PhaseⅠ、PhaseⅡ和PhaseⅢ相代谢 | 第17-19页 |
| 1.2.2 Nrf2核转录因子和抗氧化酶相关因子 | 第19-20页 |
| 1.2.3 孕烷受体PXR | 第20-22页 |
| 1.2.4 MAPK通路 | 第22-23页 |
| 1.3 食蚊鱼 | 第23-24页 |
| 1.4 研究目的及其意义 | 第24-26页 |
| 第二章 实验方法 | 第26-48页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.1 实验设备、试剂与药品 | 第26-27页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第27页 |
| 2.2 食蚊鱼Nrf2和PXR及其下游基因核心片段的克隆 | 第27-34页 |
| 2.2.1 食蚊鱼肝脏总RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.2 食蚊鱼第一链cDNA的合成 | 第28-29页 |
| 2.2.3 食蚊鱼解毒相关基因核心片段的引物设计和合成 | 第29-32页 |
| 2.2.4 食蚊鱼解毒相关基因核心片段的克隆 | 第32-34页 |
| 2.3 食蚊鱼Nrf2和PXR及其下游基因基因实时荧光定量检测方法的建立 | 第34-38页 |
| 2.3.1 食蚊鱼解毒相关基因的实时荧光引物设计和合成 | 第34-36页 |
| 2.3.2 食蚊鱼实时荧光定量检测第一链cDNA的合成 | 第36-37页 |
| 2.3.3 实时荧光定量检测PCR扩增以及扩增产物的纯化 | 第37页 |
| 2.3.4 实时荧光定量检测目的片段克隆与基因重组 | 第37页 |
| 2.3.5 重组质粒的提取与浓度检测 | 第37页 |
| 2.3.6 食蚊鱼解毒相关基因实时荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第37-38页 |
| 2.4 食蚊鱼Nrf2和PXR特异性一抗抗体的合成与MAPK通路蛋白一抗抗体的选择 | 第38-40页 |
| 2.4.1 食蚊鱼Nrf2、PXR蛋白特异性一抗抗体的合成与预实验 | 第38-40页 |
| 2.4.2 食蚊鱼ERK、JNK和p38蛋白特异性一抗抗体预实验 | 第40页 |
| 2.5 DCF、SV对食蚊鱼96hLC_50急性毒性实验 | 第40-41页 |
| 2.6 DCF对食蚊鱼暴露实验 | 第41页 |
| 2.7 SV对食蚊鱼暴露实验 | 第41-42页 |
| 2.8 DCF、SV暴露下的食蚊鱼酶活实验 | 第42页 |
| 2.9 DCF、SV暴露下的食蚊鱼Western Blotting实验 | 第42页 |
| 2.10 DCF、SV暴露下的食蚊鱼肝脏HE染色切片和免疫组化实验 | 第42-44页 |
| 2.10.1 食蚊鱼肝脏组织脱水操作过程 | 第42-43页 |
| 2.10.2 组织包埋与固定 | 第43页 |
| 2.10.3 组织切片与HE染色 | 第43-44页 |
| 2.10.4 免疫组化SP法染色 | 第44页 |
| 2.11 DCF、SV暴露下的食蚊鱼肝脏组织切片透射电镜观察 | 第44-46页 |
| 2.12 实验数据处理方法 | 第46-48页 |
| 第三章 食蚊鱼Nrf2通路在双氯芬酸、辛伐他汀暴露下响应变化 | 第48-93页 |
| 3.1 食蚊鱼Nrf2和PXR及其下游基因核心片段的克隆结果及其进化遗传分析 | 第48-56页 |
| 3.2 食蚊鱼Nrf2和PXR及其下游靶基因荧光定量检测方法构建结果与分析 | 第56-57页 |
| 3.3 食蚊鱼Nrf2通路在DCF、SV暴露下基因转录水平变化与分析 | 第57-65页 |
| 3.3.1 DCF暴露下食蚊鱼Nrf2及其下游基因的变化与分析 | 第57-62页 |
| 3.3.2 SV暴露下食蚊鱼Nrf2及其下游基因的变化与分析 | 第62-65页 |
| 3.4 食蚊鱼Nrf2通路相关酶活和其他指标在DCF、SV暴露下响应 | 第65-72页 |
| 3.4.1 DCF暴露下食蚊鱼CAT、SOD、GST酶活,以及GSH和MDA含量变化 | 第66-69页 |
| 3.4.2 SV暴露下食蚊鱼CAT、SOD、GST酶活,以及GSH和MDA含量 | 第69-72页 |
| 3.5 食蚊鱼Nrf2蛋白在DCF、SV暴露下Western Blotting响应变化 | 第72-76页 |
| 3.5.1 DCF暴露下食蚊鱼Nrf2蛋白表达变化与分析 | 第72-74页 |
| 3.5.2 SV暴露下食蚊鱼Nrf2蛋白表达变化与分析 | 第74-76页 |
| 3.6 食蚊鱼MAPK通路蛋白在SV暴露下的响应 | 第76-84页 |
| 3.6.1 SV暴露下食蚊鱼ERK、JNK和p38蛋白表达变化与分析 | 第76-83页 |
| 3.6.2 SV暴露下食蚊鱼MAPK通路与Nrf2、PXR通路变化的联系 | 第83-84页 |
| 3.7 SV暴露下食蚊鱼肝脏组织HE染色切片和透射电镜变化 | 第84-88页 |
| 3.8 SV暴露下食蚊鱼肝脏组织Nrf2蛋白免疫组化实验结果 | 第88-90页 |
| 3.9 DCF暴露对食蚊鱼Nrf2通路各层面的影响与联系 | 第90-91页 |
| 3.10 SV暴露对食蚊鱼Nrf2通路各层面的影响与联系 | 第91-93页 |
| 第四章 食蚊鱼PXR通路在双氯芬酸、辛伐他汀暴露下响应变化 | 第93-111页 |
| 4.1 食蚊鱼PXR通路在DCF、SV暴露下基因转录水平的变化 | 第93-100页 |
| 4.1.1 DCF暴露下食蚊鱼PXR及其下游基因的变化与分析 | 第93-97页 |
| 4.1.2 SV暴露下食蚊鱼PXR及其下游基因的变化与分析 | 第97-100页 |
| 4.2 食蚊鱼PXR通路相关酶活在DCF、SV暴露下的响应 | 第100-102页 |
| 4.2.1 DCF暴露下食蚊鱼ERND酶活变化与分析 | 第100-101页 |
| 4.2.2 SV暴露下食蚊鱼ERND酶活变化与分析 | 第101-102页 |
| 4.3 食蚊鱼PXR蛋白在DCF、SV暴露下Western Blotting响应 | 第102-106页 |
| 4.3.1 DCF暴露下食蚊鱼PXR蛋白表达变化与分析 | 第103-104页 |
| 4.3.2 SV暴露下食蚊鱼PXR蛋白表达变化与分析 | 第104-106页 |
| 4.4 SV暴露下食蚊鱼肝脏组织切片透射电镜观察结果 | 第106-108页 |
| 4.5 DCF暴露对食蚊鱼PXR通路各层面的影响与联系 | 第108-109页 |
| 4.6 SV暴露对食蚊鱼PXR通路各层面的影响与联系 | 第109-111页 |
| 第五章 总结与展望 | 第111-114页 |
| 参考文献 | 第114-126页 |
| 在学期间发表论文清单 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127页 |
