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可溶性人SUMO融合表达系统的研究

内容提要第1-7页
第1章 前言第7-17页
   ·重组蛋白质原核表达的概况第7页
   ·融合标签(Fusion Tags)第7-12页
     ·增加重组蛋白的产量第8页
     ·增加重组蛋白的可溶性第8-10页
     ·方便重组蛋白的纯化第10-11页
     ·融合标签的移除第11-12页
   ·泛素及SUMO融合表达标签第12-15页
     ·泛素融合表达系统第12-13页
     ·SUMO融合表达系统第13-15页
   ·论文的研究目的及设计思路第15-17页
     ·论文的研究目的第15-16页
     ·论文设计思路第16-17页
第2章 材料与方法第17-25页
   ·所用试剂和实验材料第17-18页
   ·所用仪器第18页
   ·实验方法第18-25页
     ·融合表达载体的构建第18-22页
     ·大肠杆菌表达重组的融合蛋白第22-23页
     ·纯化SUMO2-ubiquitin-eGFP蛋白第23页
     ·表达纯化重组的去泛素化酶的催化结构域Usp2-cc第23-24页
     ·去泛素化酶切割SUMO2-ubiquitin-eGFP融合蛋白第24页
     ·纯化重组的eGFP第24页
     ·检测eGFP的荧光强度第24-25页
第3章 结果及讨论第25-39页
   ·融合表达载体的构建第25-27页
     ·融合表达载体(pHS1E、pHS2E、pHS2-UE、pHU-S2E)的鉴定第25页
     ·MMP13 和eGFP融合蛋白表达载体的鉴定第25-27页
   ·比较人SUMO1、SUMO2 融合表达系统和His_6、Ubiquitin融合表达系统第27-30页
     ·人SUMO融合表达系统对MMP13 表达的影响第27-28页
     ·人SUMO融合表达系统对eGFP表达的影响第28-30页
   ·SUMO2-ubiquitin-eGFP和ubiquitin-SUMO2-eGFP融合蛋白表达情况和可溶性的分析第30-32页
   ·重组eGFP蛋白的纯化第32-36页
     ·去泛素化酶(DUBs)的原核表达与纯化第32-33页
     ·SUMO2-ubiquitin-eGFP融合蛋白的纯化第33-34页
     ·SUMO2-ubiquitin-eGFP融合蛋白标签的切除第34-35页
     ·重组eGFP蛋白的进一步纯化第35-36页
   ·讨论第36-39页
结论第39-40页
参考文献第40-46页
攻读硕士学位期间发表的文章第46-47页
致谢第47-48页
中文摘要第48-50页
Abstract第50-52页

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