内容提要 | 第1-7页 |
第1章 前言 | 第7-17页 |
·重组蛋白质原核表达的概况 | 第7页 |
·融合标签(Fusion Tags) | 第7-12页 |
·增加重组蛋白的产量 | 第8页 |
·增加重组蛋白的可溶性 | 第8-10页 |
·方便重组蛋白的纯化 | 第10-11页 |
·融合标签的移除 | 第11-12页 |
·泛素及SUMO融合表达标签 | 第12-15页 |
·泛素融合表达系统 | 第12-13页 |
·SUMO融合表达系统 | 第13-15页 |
·论文的研究目的及设计思路 | 第15-17页 |
·论文的研究目的 | 第15-16页 |
·论文设计思路 | 第16-17页 |
第2章 材料与方法 | 第17-25页 |
·所用试剂和实验材料 | 第17-18页 |
·所用仪器 | 第18页 |
·实验方法 | 第18-25页 |
·融合表达载体的构建 | 第18-22页 |
·大肠杆菌表达重组的融合蛋白 | 第22-23页 |
·纯化SUMO2-ubiquitin-eGFP蛋白 | 第23页 |
·表达纯化重组的去泛素化酶的催化结构域Usp2-cc | 第23-24页 |
·去泛素化酶切割SUMO2-ubiquitin-eGFP融合蛋白 | 第24页 |
·纯化重组的eGFP | 第24页 |
·检测eGFP的荧光强度 | 第24-25页 |
第3章 结果及讨论 | 第25-39页 |
·融合表达载体的构建 | 第25-27页 |
·融合表达载体(pHS1E、pHS2E、pHS2-UE、pHU-S2E)的鉴定 | 第25页 |
·MMP13 和eGFP融合蛋白表达载体的鉴定 | 第25-27页 |
·比较人SUMO1、SUMO2 融合表达系统和His_6、Ubiquitin融合表达系统 | 第27-30页 |
·人SUMO融合表达系统对MMP13 表达的影响 | 第27-28页 |
·人SUMO融合表达系统对eGFP表达的影响 | 第28-30页 |
·SUMO2-ubiquitin-eGFP和ubiquitin-SUMO2-eGFP融合蛋白表达情况和可溶性的分析 | 第30-32页 |
·重组eGFP蛋白的纯化 | 第32-36页 |
·去泛素化酶(DUBs)的原核表达与纯化 | 第32-33页 |
·SUMO2-ubiquitin-eGFP融合蛋白的纯化 | 第33-34页 |
·SUMO2-ubiquitin-eGFP融合蛋白标签的切除 | 第34-35页 |
·重组eGFP蛋白的进一步纯化 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-39页 |
结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-46页 |
攻读硕士学位期间发表的文章 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
中文摘要 | 第48-50页 |
Abstract | 第50-52页 |