| 内容提要 | 第1-8页 |
| 第1章 前言 | 第8-24页 |
| ·嗜热古菌、硫化叶菌属及Sulfolobus Tokodaii 简介 | 第8-12页 |
| ·嗜热古菌简介 | 第8-9页 |
| ·硫化叶菌属简介 | 第9-10页 |
| ·嗜热古菌Sulfolobus Tokodaii | 第10-12页 |
| ·糖苷酶简介 | 第12-16页 |
| ·糖苷酶的概述及分类 | 第12-13页 |
| ·糖苷酶的家族 | 第13-14页 |
| ·作用机制 | 第14-16页 |
| ·β-半乳糖苷酶简介 | 第16-22页 |
| ·β-半乳糖苷酶概述及来源 | 第16-17页 |
| ·β-半乳糖苷酶的分类 | 第17-18页 |
| ·β-半乳糖苷酶的结构 | 第18-19页 |
| ·β-半乳糖苷酶的基因工程研究 | 第19-21页 |
| ·β-半乳糖苷酶应用 | 第21-22页 |
| ·研究背景和设计思想 | 第22-24页 |
| 第2章 蛋白质序列分析和结构预测 | 第24-33页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·生物信息学工具 | 第24页 |
| ·分子生物学软件 | 第24页 |
| ·网络资源 | 第24页 |
| ·结果与讨论 | 第24-33页 |
| ·蛋白质序列的motif 搜索 | 第24-25页 |
| ·蛋白序列的一级结构分析 | 第25-28页 |
| ·蛋白序列的二级结构预测 | 第28-29页 |
| ·序列同源性分析 | 第29页 |
| ·同源模建 | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第3章 pET-28b-ST0773 在大肠杆菌中的表达 | 第33-45页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·实验材料与仪器 | 第33-35页 |
| ·实验材料 | 第33-35页 |
| ·实验仪器 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-38页 |
| ·古细菌Sulfolobus Tokodaii strain 7 的培养 | 第35页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第35页 |
| ·引物的设计 | 第35-36页 |
| ·目的基因的PCR 扩增及纯化 | 第36页 |
| ·PCR 纯化产物的双酶切及纯化 | 第36-37页 |
| ·载体DNA 限制性酶切和纯化 | 第37页 |
| ·目的基因与载体的连接 | 第37页 |
| ·重组质粒的转化及鉴定 | 第37页 |
| ·不同温度诱导目的基因表达 | 第37页 |
| ·不同浓度的IPTG 诱导目的基因表达 | 第37-38页 |
| ·结果与讨论 | 第38-45页 |
| ·古细菌的基因组提取 | 第38页 |
| ·目的基因扩增 | 第38页 |
| ·载体DNA 双酶切回收 | 第38-39页 |
| ·重组质粒pET-28b-ST0773 的构建 | 第39页 |
| ·重组质粒pET-28b-ST0773 的鉴定 | 第39-40页 |
| ·不同温度诱导表达BL21-pET-28b-ST0773 | 第40-41页 |
| ·不同温度诱导表达BLP-pET-28b-ST0773 | 第41-42页 |
| ·不同浓度IPTG 诱导表达BLP-pET-28b-ST0773 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第4章 不同表达载体表达ST0773 | 第45-60页 |
| ·引言 | 第45页 |
| ·实验材料与仪器 | 第45-46页 |
| ·实验材料 | 第45-46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-51页 |
| ·采用不同表达载体表达ST0773 的工程质粒构建全过程. | 第46-48页 |
| ·突变体的构建 | 第48-49页 |
| ·构建不同表达载体所用引物的设计 | 第49-50页 |
| ·目的基因的PCR 扩增和纯化 | 第50页 |
| ·PCR 产物的酶切及纯化 | 第50-51页 |
| ·载体DNA 限制性酶切和纯化 | 第51页 |
| ·目的基因与载体的连接 | 第51页 |
| ·重组质粒的转化及鉴定 | 第51页 |
| ·不同温度诱导三种工程菌的表达 | 第51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-59页 |
| ·pET-15b-ST0773 全质粒PCR | 第51-52页 |
| ·目的基因扩增 | 第52页 |
| ·载体双切回收 | 第52-53页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第53-54页 |
| ·重组质粒PCR 鉴定 | 第54页 |
| ·目的基因的序列测定 | 第54页 |
| ·不同温度诱导表达pET-15b-ST0773 | 第54-55页 |
| ·不同温度诱导表达pET-32a-ST0773 | 第55-56页 |
| ·不同温度诱导表达pHUE-ST0773 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| ·展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 中文摘要 | 第69-71页 |
| Abstract | 第71-73页 |
