| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-14页 |
| 第1章 绪论 | 第15-25页 |
| 1.1 甲醛危害 | 第15-17页 |
| 1.1.1 甲醛对植物的氧化损伤 | 第15-16页 |
| 1.1.2 甲醛对动物的毒性 | 第16-17页 |
| 1.2 生物代谢甲醛的研究 | 第17-21页 |
| 1.2.1 甲醛的同化途径 | 第17-19页 |
| 1.2.2 甲醛的氧化途径 | 第19-21页 |
| 1.3 甲醛脱氢酶的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4 利用基因工程技术提高植物吸收甲醛能力的研究 | 第22-23页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第23-25页 |
| 第2章 ANFALDH 在真菌甲醛代谢中的作用 | 第25-45页 |
| 2.1 引言 | 第25-26页 |
| 2.2 实验材料 | 第26页 |
| 2.2.1 菌种及质粒材料 | 第26页 |
| 2.2.2 实验药品 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-32页 |
| 2.3.1 真菌材料处理 | 第26页 |
| 2.3.2 总 RNA 提取及 cDNA 合成 | 第26-27页 |
| 2.3.3 Real-Time PCR | 第27-28页 |
| 2.3.4 酶活性检测 | 第28-29页 |
| 2.3.5 全长基因的克隆 | 第29-31页 |
| 2.3.6 构建酵母表达载体 | 第31页 |
| 2.3.7 酿酒酵母的转化及生理功能分析 | 第31-32页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第32-43页 |
| 2.4.1 Aspergillus nomius SGFA1 甲醛代谢相关基因的表达分析 | 第32-36页 |
| 2.4.2 AnFALDH 的克隆及序列分析 | 第36-40页 |
| 2.4.3 AnFALDH 基因酵母表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 2.4.4 AnFALDH 基因对酵母的转化 | 第41-42页 |
| 2.4.5 AnFALDH 基因提高酿酒酵母的甲醛降解能力 | 第42-43页 |
| 2.5 本章小结 | 第43-45页 |
| 第3章 CCFALDH 在吊兰代谢甲醛中的作用 | 第45-57页 |
| 3.1 引言 | 第45页 |
| 3.2 实验材料 | 第45-46页 |
| 3.2.1 菌种、质粒及植物材料 | 第45页 |
| 3.2.2 实验药品 | 第45-46页 |
| 3.3 实验方法 | 第46-48页 |
| 3.3.1 吊兰的处理 | 第46页 |
| 3.3.2 叶绿素含量测定 | 第46页 |
| 3.3.3 Real-Time PCR | 第46页 |
| 3.3.4 吊兰甲醛脱氢酶活性检测 | 第46-47页 |
| 3.3.5 基因的克隆 | 第47-48页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第48-55页 |
| 3.4.1 吊兰甲醛处理后的表型分析 | 第48页 |
| 3.4.2 吊兰在不同处理时间下 FALDH 基因的表达 | 第48-49页 |
| 3.4.3 吊兰在不同处理时间下 FALDH 的酶活性变化 | 第49页 |
| 3.4.4 CcFALDH 基因的克隆与序列分析 | 第49-55页 |
| 3.5 本章小结 | 第55-57页 |
| 第4章 CCFALDH 基因对烟草的转化及功能分析 | 第57-71页 |
| 4.1 引言 | 第57-58页 |
| 4.2 实验材料 | 第58页 |
| 4.2.1 菌种、质粒及植物材料 | 第58页 |
| 4.2.2 实验药品 | 第58页 |
| 4.2.3 仪器设备 | 第58页 |
| 4.3 实验方法 | 第58-62页 |
| 4.3.1 植物过表达载体的构建 | 第58-59页 |
| 4.3.2 烟草的遗传转化 | 第59页 |
| 4.3.3 植物 DNA 提取及 PCR 检测 | 第59-60页 |
| 4.3.4 转基因烟草的 Southern blot 检测 | 第60-61页 |
| 4.3.5 转基因烟草的 Northern blot 检测 | 第61页 |
| 4.3.6 烟草种子的甲醛抗性筛选 | 第61页 |
| 4.3.7 叶绿素含量测定 | 第61页 |
| 4.3.8 植物 FALDH 酶活性测定 | 第61页 |
| 4.3.9 甲醛含量的测定 | 第61-62页 |
| 4.3.10 植物叶面积的测定 | 第62页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第62-70页 |
| 4.4.1 植物表达载体 pBICcFALDH 的构建 | 第62-64页 |
| 4.4.2 pBICcFALDH 对烟草的遗传转化 | 第64页 |
| 4.4.3 转 CcFALDH 基因烟草的分子生物学检测 | 第64-66页 |
| 4.4.4 转基因烟草种子在含甲醛培养基上的萌发 | 第66-67页 |
| 4.4.5 转基因烟草对甲醛抗性表型的检测 | 第67-68页 |
| 4.4.6 甲醛脱氢酶活性检测 | 第68-69页 |
| 4.4.7 转基因烟草吸收液态甲醛能力 | 第69页 |
| 4.4.8 转基因烟草吸收气体甲醛能力 | 第69-70页 |
| 4.5 本章小结 | 第70-71页 |
| 第5章 讨论 | 第71-77页 |
| 5.1 ASPERGILLUS NOMIUS SGFA1 代谢甲醛的途径 | 第71-73页 |
| 5.2 CCFALDH 基因的序列特性 | 第73-74页 |
| 5.3 基因改良植物用于环境甲醛的净化 | 第74-75页 |
| 5.4 对后续工作的设想 | 第75-76页 |
| 5.5 论文的主要创新点 | 第76-77页 |
| 结论 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
