| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第17-19页 |
| 1 绪论 | 第19-28页 |
| 1.1 雌激素替代疗法 | 第19-20页 |
| 1.2 卵巢器官和组织的移植 | 第20-21页 |
| 1.3 组织细胞的微囊化和移植 | 第21-27页 |
| 1.3.1 细胞微囊的性能要求 | 第22-23页 |
| 1.3.2 微囊化细胞研究现状 | 第23-24页 |
| 1.3.3 海藻酸-壳聚糖-海藻酸(ACA)微囊 | 第24-26页 |
| 1.3.4 静电液滴发生法 | 第26-27页 |
| 1.4 本文的内容和意义 | 第27-28页 |
| 2 ACA微囊制备条件的研究 | 第28-45页 |
| 2.1 前言 | 第28-29页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第29-30页 |
| 2.2.1 仪器 | 第29-30页 |
| 2.2.2 试剂 | 第30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-35页 |
| 2.3.1 主要溶液配制 | 第30-31页 |
| 2.3.2 静电液滴发生法制备ACA微囊 | 第31-32页 |
| 2.3.3 海藻酸钙凝胶微球直径测定 | 第32页 |
| 2.3.4 ACA微囊的膨胀率(Sw)测定 | 第32-33页 |
| 2.3.5 ACA微囊在BSA溶液中孵育 | 第33-34页 |
| 2.3.6 ACA微囊在γ-球蛋白溶液中孵育 | 第34-35页 |
| 2.3.7 统计学分析 | 第35页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第35-43页 |
| 2.4.1 静电液滴发生法影响海藻酸钙凝胶微球直径的因素 | 第35-39页 |
| 2.4.2 交联反应时间和壳聚糖溶液浓度对ACA微囊膨胀率(Sw)的影响 | 第39-41页 |
| 2.4.3 ACA微囊的BSA透过性 | 第41-42页 |
| 2.4.4 ACA微囊对γ-球蛋白的阻隔能力 | 第42-43页 |
| 2.5 本章小结 | 第43-45页 |
| 3 ACA微囊化非洲爪蟾卵巢细胞和移植 | 第45-68页 |
| 3.1 前言 | 第45-46页 |
| 3.2 实验材料 | 第46-48页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第46页 |
| 3.2.2 仪器 | 第46-47页 |
| 3.2.3 试剂 | 第47-48页 |
| 3.3 实验方法 | 第48-54页 |
| 3.3.1 主要溶液配制 | 第48页 |
| 3.3.2 雌性非洲爪蟾的去势 | 第48-49页 |
| 3.3.3 卵巢细胞的原代培养 | 第49页 |
| 3.3.4 PMSG处理原代培养非洲爪蟾卵巢细胞 | 第49-50页 |
| 3.3.5 原代非洲爪蟾卵巢细胞免疫组化染色 | 第50页 |
| 3.3.6 非洲爪蟾卵巢细胞的ACA微囊化和体外培养 | 第50-51页 |
| 3.3.7 体外培养ACA微囊化细胞的成活率检测 | 第51页 |
| 3.3.8 微囊化非洲爪蟾卵巢细胞WST-1检测 | 第51页 |
| 3.3.9 ACA微囊化非洲爪蟾卵巢细胞移植 | 第51-52页 |
| 3.3.10 非洲爪蟾血清样本的收集 | 第52-53页 |
| 3.3.11 ELISA法检测样本E2和P4浓度 | 第53页 |
| 3.3.12 移植微囊的回收和CFDA-SE处理 | 第53-54页 |
| 3.3.13 统计学分析 | 第54页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第54-67页 |
| 3.4.1 原代非洲爪蟾卵巢细胞形态观察 | 第54-55页 |
| 3.4.2 原代非洲爪蟾卵巢细胞鉴定 | 第55页 |
| 3.4.3 PMSG对非洲爪蟾卵巢细胞E2和P4分泌的影响 | 第55-57页 |
| 3.4.4 制备ACA微囊的壳聚糖浓度对非洲爪蟾卵巢细胞成活率的影响 | 第57-60页 |
| 3.4.5 非洲爪蟾卵巢细胞ACA微囊化后的生理活性变化 | 第60-61页 |
| 3.4.6 ACA微囊化非洲爪蟾卵巢细胞的体外E2和P4分泌能力 | 第61-62页 |
| 3.4.7 ACA微囊化非洲爪蟾卵巢细胞移植后的E2分泌 | 第62-63页 |
| 3.4.8 ACA微囊化非洲爪蟾卵巢细胞移植后的P4分泌 | 第63-65页 |
| 3.4.9 移植后回收的细胞微囊 | 第65-67页 |
| 3.5 本章小结 | 第67-68页 |
| 4 共微囊化大鼠GCs/TCs的E2和P4体内释放 | 第68-89页 |
| 4.1 前言 | 第68-69页 |
| 4.2 实验材料 | 第69-70页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第69-70页 |
| 4.2.2 仪器 | 第70页 |
| 4.2.3 试剂 | 第70页 |
| 4.3 实验方法 | 第70-76页 |
| 4.3.1 主要溶液配制 | 第70页 |
| 4.3.2 大鼠GCs的原代培养 | 第70-71页 |
| 4.3.3 大鼠TCs的原代培养 | 第71-72页 |
| 4.3.4 大鼠GCs和TCs生长曲线制作 | 第72页 |
| 4.3.5 大鼠GCs和TCs免疫组化染色 | 第72页 |
| 4.3.6 大鼠GCs和TCs的共微囊化 | 第72-73页 |
| 4.3.7 GCs/TCs微囊的CFDA-SE处理 | 第73页 |
| 4.3.8 雌性大鼠去势 | 第73-74页 |
| 4.3.9 大鼠实验分组和细胞微囊移植 | 第74-75页 |
| 4.3.10 大鼠采血和血清样本制备 | 第75页 |
| 4.3.11 血清E2和P4水平检测 | 第75页 |
| 4.3.12 移植微囊的回收和CFDA-SE处理 | 第75-76页 |
| 4.3.13 统计学分析 | 第76页 |
| 4.4 结果和讨论 | 第76-88页 |
| 4.4.1 原代大鼠GCs和TCs的形态观察 | 第76-78页 |
| 4.4.2 原代大鼠GCs和TCs的鉴定 | 第78-79页 |
| 4.4.3 GCs/TCs微囊的形态 | 第79-81页 |
| 4.4.4 微囊内GCs和TCs数量比例对E2分泌的影响 | 第81-82页 |
| 4.4.5 微囊内GCs和TCs数量比例对P4分泌的影响 | 第82-83页 |
| 4.4.6 GCs/TCs微囊的异体移植对去势雌性大鼠E2分泌水平的影响 | 第83-84页 |
| 4.4.7 GCs/TCs微囊的异体移植对去势雌性大鼠P4分泌水平的影响 | 第84-86页 |
| 4.4.8 移植后回收的细胞微囊 | 第86-88页 |
| 4.5 本章小结 | 第88-89页 |
| 5 模拟卵泡自然结构的大鼠GCs和TCs微囊化模式 | 第89-105页 |
| 5.1 前言 | 第89-90页 |
| 5.2 实验材料 | 第90-91页 |
| 5.2.1 实验动物 | 第90页 |
| 5.2.2 仪器 | 第90页 |
| 5.2.3 试剂 | 第90-91页 |
| 5.3 实验方法 | 第91-95页 |
| 5.3.1 大鼠GCs和TCs的原代培养 | 第91页 |
| 5.3.2 玻璃器皿的硅化 | 第91页 |
| 5.3.3 大鼠GCs的微载体培养 | 第91-92页 |
| 5.3.4 微载体培养GCs的生长曲线制作 | 第92页 |
| 5.3.5 GCs、GCsMs、GCs+TCs和GCsMs+TCs微囊制备和体外培养 | 第92-93页 |
| 5.3.6 微囊化细胞的WST-1检测 | 第93-94页 |
| 5.3.7 大鼠实验分组和移植 | 第94-95页 |
| 5.3.8 ELISA法检测血清E2和P4水平 | 第95页 |
| 5.3.9 移植微囊的回收和CFDA-SE处理 | 第95页 |
| 5.3.10 统计学分析 | 第95页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第95-104页 |
| 5.4.1 大鼠GCs的微载体生长 | 第95-97页 |
| 5.4.2 微载体培养对微囊化GCs生理活性的影响 | 第97-99页 |
| 5.4.3 微囊化细胞在体外培养条件下的E2和P4分泌水平 | 第99-101页 |
| 5.4.4 异体移植模拟卵泡对去势雌性大鼠E2和P4分泌水平的影响 | 第101-103页 |
| 5.4.5 移植后回收的模拟卵泡 | 第103-104页 |
| 5.5 本章小结 | 第104-105页 |
| 6 全文总结 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-124页 |
| 综述 | 第124-143页 |
| 参考文献 | 第133-143页 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第143页 |
