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玉米赤霉烯酮对小鼠T淋巴细胞活化的影响及机制

中文摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
英文缩略语第12-14页
上篇 文献综述第14-24页
    第一章 玉米赤霉烯酮毒性研究进展第14-18页
        1 ZEA的来源与结构第14页
        2 ZEA的污染状况第14-15页
        3 ZEA的吸收和代谢第15页
        4 ZEA的毒性作用第15-18页
            4.1 ZEA的细胞毒性第15页
            4.2 ZEA的生殖毒性第15-16页
            4.3 ZEA的致肿瘤毒性第16页
            4.4 ZEA的遗传毒性第16页
            4.5 ZEA的内分泌毒性第16页
            4.6 ZEA的免疫毒性第16-18页
    第二章 细胞免疫应答与T淋巴细胞活化第18-24页
        1 T细胞介导的免疫效应第18-20页
            1.1 细胞毒性T细胞介导的凋亡途径第18-19页
            1.2 通过淋巴因子互作效应杀伤靶细胞第19-20页
        2 T淋巴细胞活化第20-22页
            2.1 TCR信号途径第20-21页
            2.2 共刺激信号途径第21-22页
                2.2.1 共刺激信号第21-22页
        3 细胞因子和趋化因子第22-23页
        4 本研究的目的与意义第23-24页
下篇 实验部分第24-64页
    第三章 ZEA对T细胞的活化及活化信号表达的影响第24-36页
        1 材料第24-25页
            1.1 实验动物第24页
            1.2 主要试剂第24页
            1.3 主要仪器第24-25页
        2 试验方法第25-28页
            2.1 溶液及试剂的配制第25页
            2.2 T淋巴细胞原代培养第25-26页
                2.2.1 小鼠淋巴细胞分离第25页
                2.2.2 免疫磁珠负性分选T淋巴细胞第25页
                2.2.3 分离小鼠T淋巴细胞的计数与活率鉴定第25-26页
                2.2.4 分选T淋巴细胞纯度的鉴定第26页
            2.3 CCK-8法检测ZEA对小鼠T淋巴细胞活化前细胞活性的影响第26页
            2.4 CCK-8法检测ZEA对小鼠T淋巴细胞活化进程中细胞活性的影响第26页
            2.5 流式细胞术检测ZEA对小鼠T淋巴细胞各期活化标志的影响第26-28页
                2.5.1 检测ZEA对小鼠T淋巴细胞早期活化标志CD69的影响第26-27页
                2.5.2 检测ZEA对小鼠T淋巴细胞中期活化标志CD25的影响第27页
                2.5.3 检测ZEA对小鼠T淋巴细胞晚期活化标志CD71的影响第27-28页
            2.6 统计学分析第28页
        3 结果与分析第28-34页
            3.1 细胞提取结果及纯度鉴定第28-29页
            3.2 ZEA对活化前(静息期)小鼠T淋巴细胞活性的影响第29页
            3.3 ZEA对小鼠T淋巴细胞活化进程中细胞活性的影响第29-31页
            3.4 ZEA降低小鼠T淋巴细胞早期活化标志CD69的表达第31-32页
            3.5 ZEA降低小鼠T淋巴细胞中期活化标志CD25的表达第32-33页
            3.6 ZEA降低小鼠T淋巴细胞晚期活化标志CD71的表达第33-34页
        4 讨论第34-35页
        5 小结第35-36页
    第四章 ZEA对TCR活化信号通路的影响第36-50页
        1 材料第36-37页
            1.1 实验动物第36页
            1.2 主要试剂第36页
            1.3 主要仪器第36-37页
        2 方法第37-41页
            2.1 免疫磁珠负性分选T淋巴细胞第37页
            2.2 蛋白样品准备第37页
            2.3 蛋白质免疫印迹(Western Blot)第37-40页
            2.4 流式细胞术检测ZEA对小鼠T淋巴细胞共刺激信号的影响第40页
                2.4.1 检测ZEA对小鼠T淋巴细胞共刺激正向信号分子CD28的影响第40页
                2.4.2 检测ZEA对小鼠T淋巴细胞共刺激负向信号分子CD152的影响第40页
            2.5 统计学分析第40-41页
        3 结果与分析第41-48页
            3.1 ZEA抑制TCR信号途径中接头蛋白LAT的表达第41页
            3.2 ZEA抑制TCR信号途径中起始调控蛋白的表达第41-42页
            3.3 ZEA抑制TCR信号途径中核因子NF-AT信号通路的活性第42-43页
            3.4 ZEA抑制TCR信号途径中核因子NF-κB信号通路的活性第43-44页
            3.5 ZEA对TCR信号途径中核因子NF-AT、NF-κB入核表达的影响第44-45页
            3.6 ZEA对TCR信号途径中共刺激分子CD28表达的影响第45-46页
            3.7 ZEA对TCR信号途径中共刺激分子CD152表达的影响第46-47页
            3.8 ZEA对TCR信号途径中共刺激分子CD28下游PI3K-Akt-mTOR信号通路的影响第47-48页
        4 讨论第48-49页
        5 小结第49-50页
    第五章 ZEA对T淋巴细胞活化过程中细胞因子、趋化因子分泌及趋化因子受体表达的影响第50-64页
        1 材料第50-51页
            1.1 实验动物第50页
            1.2 主要试剂第50页
            1.3 主要仪器第50-51页
        2 方法第51-53页
            2.1 小鼠淋巴细胞分离第51页
            2.2 流式液相多重蛋白定量技术第51-52页
                2.2.1 制备可溶性蛋白标准品后混合可溶性蛋白捕获微球第51页
                2.2.2 制备可溶性蛋白PE标记的检测抗体及流式CBA检测第51-52页
            2.3 流式细胞术检测ZEA对小鼠T淋巴细胞趋化因子受体的影响第52页
                2.3.1 检测ZEA对小鼠T淋巴细胞趋化因子受体CCR2的影响第52页
                2.3.2 检测ZEA对小鼠T淋巴细胞趋化因子受体CCR7的影响第52页
            2.4 统计学分析第52-53页
        3 结果与分析第53-62页
            3.1 ZEA对小鼠T淋巴细胞分泌细胞因子IL-2、IL3、IL5、IL6和GM-CSF的影响第53-57页
            3.2 ZEA对小鼠T淋巴细胞分泌趋化因子MIP-1α和RANTES的影响第57-59页
            3.3 ZEA对小鼠T淋巴细胞趋化因子受体CCR2表达的影响第59-60页
            3.4 ZEA对小鼠T淋巴细胞趋化因子受体CCR7表达的影响第60-62页
        4 讨论第62-63页
        5 小结第63-64页
全文结论第64-65页
参考文献第65-76页
致谢第76-77页
攻读学位期间发表的学术论文目录第77-78页

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