中文摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
英文缩略语 | 第12-14页 |
上篇 文献综述 | 第14-24页 |
第一章 玉米赤霉烯酮毒性研究进展 | 第14-18页 |
1 ZEA的来源与结构 | 第14页 |
2 ZEA的污染状况 | 第14-15页 |
3 ZEA的吸收和代谢 | 第15页 |
4 ZEA的毒性作用 | 第15-18页 |
4.1 ZEA的细胞毒性 | 第15页 |
4.2 ZEA的生殖毒性 | 第15-16页 |
4.3 ZEA的致肿瘤毒性 | 第16页 |
4.4 ZEA的遗传毒性 | 第16页 |
4.5 ZEA的内分泌毒性 | 第16页 |
4.6 ZEA的免疫毒性 | 第16-18页 |
第二章 细胞免疫应答与T淋巴细胞活化 | 第18-24页 |
1 T细胞介导的免疫效应 | 第18-20页 |
1.1 细胞毒性T细胞介导的凋亡途径 | 第18-19页 |
1.2 通过淋巴因子互作效应杀伤靶细胞 | 第19-20页 |
2 T淋巴细胞活化 | 第20-22页 |
2.1 TCR信号途径 | 第20-21页 |
2.2 共刺激信号途径 | 第21-22页 |
2.2.1 共刺激信号 | 第21-22页 |
3 细胞因子和趋化因子 | 第22-23页 |
4 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
下篇 实验部分 | 第24-64页 |
第三章 ZEA对T细胞的活化及活化信号表达的影响 | 第24-36页 |
1 材料 | 第24-25页 |
1.1 实验动物 | 第24页 |
1.2 主要试剂 | 第24页 |
1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
2 试验方法 | 第25-28页 |
2.1 溶液及试剂的配制 | 第25页 |
2.2 T淋巴细胞原代培养 | 第25-26页 |
2.2.1 小鼠淋巴细胞分离 | 第25页 |
2.2.2 免疫磁珠负性分选T淋巴细胞 | 第25页 |
2.2.3 分离小鼠T淋巴细胞的计数与活率鉴定 | 第25-26页 |
2.2.4 分选T淋巴细胞纯度的鉴定 | 第26页 |
2.3 CCK-8法检测ZEA对小鼠T淋巴细胞活化前细胞活性的影响 | 第26页 |
2.4 CCK-8法检测ZEA对小鼠T淋巴细胞活化进程中细胞活性的影响 | 第26页 |
2.5 流式细胞术检测ZEA对小鼠T淋巴细胞各期活化标志的影响 | 第26-28页 |
2.5.1 检测ZEA对小鼠T淋巴细胞早期活化标志CD69的影响 | 第26-27页 |
2.5.2 检测ZEA对小鼠T淋巴细胞中期活化标志CD25的影响 | 第27页 |
2.5.3 检测ZEA对小鼠T淋巴细胞晚期活化标志CD71的影响 | 第27-28页 |
2.6 统计学分析 | 第28页 |
3 结果与分析 | 第28-34页 |
3.1 细胞提取结果及纯度鉴定 | 第28-29页 |
3.2 ZEA对活化前(静息期)小鼠T淋巴细胞活性的影响 | 第29页 |
3.3 ZEA对小鼠T淋巴细胞活化进程中细胞活性的影响 | 第29-31页 |
3.4 ZEA降低小鼠T淋巴细胞早期活化标志CD69的表达 | 第31-32页 |
3.5 ZEA降低小鼠T淋巴细胞中期活化标志CD25的表达 | 第32-33页 |
3.6 ZEA降低小鼠T淋巴细胞晚期活化标志CD71的表达 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-35页 |
5 小结 | 第35-36页 |
第四章 ZEA对TCR活化信号通路的影响 | 第36-50页 |
1 材料 | 第36-37页 |
1.1 实验动物 | 第36页 |
1.2 主要试剂 | 第36页 |
1.3 主要仪器 | 第36-37页 |
2 方法 | 第37-41页 |
2.1 免疫磁珠负性分选T淋巴细胞 | 第37页 |
2.2 蛋白样品准备 | 第37页 |
2.3 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第37-40页 |
2.4 流式细胞术检测ZEA对小鼠T淋巴细胞共刺激信号的影响 | 第40页 |
2.4.1 检测ZEA对小鼠T淋巴细胞共刺激正向信号分子CD28的影响 | 第40页 |
2.4.2 检测ZEA对小鼠T淋巴细胞共刺激负向信号分子CD152的影响 | 第40页 |
2.5 统计学分析 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-48页 |
3.1 ZEA抑制TCR信号途径中接头蛋白LAT的表达 | 第41页 |
3.2 ZEA抑制TCR信号途径中起始调控蛋白的表达 | 第41-42页 |
3.3 ZEA抑制TCR信号途径中核因子NF-AT信号通路的活性 | 第42-43页 |
3.4 ZEA抑制TCR信号途径中核因子NF-κB信号通路的活性 | 第43-44页 |
3.5 ZEA对TCR信号途径中核因子NF-AT、NF-κB入核表达的影响 | 第44-45页 |
3.6 ZEA对TCR信号途径中共刺激分子CD28表达的影响 | 第45-46页 |
3.7 ZEA对TCR信号途径中共刺激分子CD152表达的影响 | 第46-47页 |
3.8 ZEA对TCR信号途径中共刺激分子CD28下游PI3K-Akt-mTOR信号通路的影响 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-49页 |
5 小结 | 第49-50页 |
第五章 ZEA对T淋巴细胞活化过程中细胞因子、趋化因子分泌及趋化因子受体表达的影响 | 第50-64页 |
1 材料 | 第50-51页 |
1.1 实验动物 | 第50页 |
1.2 主要试剂 | 第50页 |
1.3 主要仪器 | 第50-51页 |
2 方法 | 第51-53页 |
2.1 小鼠淋巴细胞分离 | 第51页 |
2.2 流式液相多重蛋白定量技术 | 第51-52页 |
2.2.1 制备可溶性蛋白标准品后混合可溶性蛋白捕获微球 | 第51页 |
2.2.2 制备可溶性蛋白PE标记的检测抗体及流式CBA检测 | 第51-52页 |
2.3 流式细胞术检测ZEA对小鼠T淋巴细胞趋化因子受体的影响 | 第52页 |
2.3.1 检测ZEA对小鼠T淋巴细胞趋化因子受体CCR2的影响 | 第52页 |
2.3.2 检测ZEA对小鼠T淋巴细胞趋化因子受体CCR7的影响 | 第52页 |
2.4 统计学分析 | 第52-53页 |
3 结果与分析 | 第53-62页 |
3.1 ZEA对小鼠T淋巴细胞分泌细胞因子IL-2、IL3、IL5、IL6和GM-CSF的影响 | 第53-57页 |
3.2 ZEA对小鼠T淋巴细胞分泌趋化因子MIP-1α和RANTES的影响 | 第57-59页 |
3.3 ZEA对小鼠T淋巴细胞趋化因子受体CCR2表达的影响 | 第59-60页 |
3.4 ZEA对小鼠T淋巴细胞趋化因子受体CCR7表达的影响 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-63页 |
5 小结 | 第63-64页 |
全文结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第77-78页 |