摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
引言 | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-20页 |
1.1 人参皂苷的研究概况 | 第10-11页 |
1.1.1 人参皂苷的分类与化学结构 | 第10-11页 |
1.1.2 人参皂苷的理化性质 | 第11页 |
1.2 人参皂苷的生理活性 | 第11-13页 |
1.2.1 人参皂苷的抗肿瘤作用 | 第11-12页 |
1.2.2 人参皂苷对中枢神经系统的作用 | 第12页 |
1.2.3 人参皂苷抗老年痴呆症作用 | 第12页 |
1.2.4 人参皂苷的免疫调节作用 | 第12页 |
1.2.5 人参皂苷对心脑血管及循环系统的作用 | 第12-13页 |
1.2.6 人参皂苷的抗疲劳、抗衰老作用 | 第13页 |
1.3 人参皂苷的提取分离方法 | 第13-14页 |
1.4 人参皂苷的含量分析方法 | 第14页 |
1.5 人参皂苷的糖基改造研究 | 第14-18页 |
1.5.1 微生物改造人参皂苷糖基 | 第14-17页 |
1.5.2 糖基酶转化人参皂苷途径 | 第17-18页 |
1.5.3 糖基酶的分离纯化 | 第18页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
2 人参皂苷糖基水解酶产生菌的筛选及产物分析方法建立 | 第20-27页 |
2.1 试验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 试剂与药品 | 第20页 |
2.1.2 仪器与设备 | 第20-21页 |
2.1.3 培养基 | 第21页 |
2.2 试验方法 | 第21-22页 |
2.2.1 菌株活化 | 第21页 |
2.2.2 菌株孢子悬浮液的制备 | 第21页 |
2.2.3 琼脂块初筛 | 第21页 |
2.2.4 摇瓶复筛 | 第21页 |
2.2.5 酶液提取 | 第21-22页 |
2.3 分析方法 | 第22-23页 |
2.3.1 薄层层析法(TLC) | 第22页 |
2.3.2 高效液相法(HPLC) | 第22-23页 |
2.3.3 酶活力测定 | 第23页 |
2.4 结果与分析 | 第23-26页 |
2.4.1 TLC 法检测两株真菌的活性 | 第23-24页 |
2.4.2 HPLC 法检测两株真菌的活性 | 第24-25页 |
2.4.3 两株真菌的酶活力测定 | 第25-26页 |
2.5 讨论 | 第26-27页 |
3 高产人参皂苷糖基水解酶菌株 CGMCC No.4316 的发酵工艺的研究 | 第27-38页 |
3.1 试验材料 | 第27页 |
3.1.1 试剂和药品 | 第27页 |
3.1.2 仪器和设备 | 第27页 |
3.1.3 培养基 | 第27页 |
3.2 试验方法 | 第27-28页 |
3.2.1 产酶发酵方法 | 第27-28页 |
3.2.2 酶液和生物量的制备 | 第28页 |
3.2.3 酶活力的测定 | 第28页 |
3.2.4 单因素试验设计 | 第28页 |
3.2.5 响应面设计 | 第28页 |
3.3 结果与分析 | 第28-34页 |
3.3.1 不同碳源对产酶量的影响 | 第28-29页 |
3.3.2 不同氮源对产酶量的影响 | 第29-30页 |
3.3.3 金属离子对产酶量的影响 | 第30页 |
3.3.4 表面活性剂对产酶量的影响 | 第30页 |
3.3.5 pH 对产酶量的影响 | 第30-31页 |
3.3.6 发酵时间对产酶量的影响 | 第31页 |
3.3.7 发酵温度对产酶量的影响 | 第31-32页 |
3.3.8 瓶装量对产酶量的影响 | 第32-33页 |
3.3.9 摇瓶转数对产酶量的影响 | 第33页 |
3.3.10 底物投料量对产酶量的影响 | 第33-34页 |
3.4 响应面设计优化工艺 | 第34-36页 |
3.4.1 二次回归拟合及方差分析 | 第34页 |
3.4.2 响应面试验结果分析 | 第34-35页 |
3.4.3 模型验证结果分析 | 第35-36页 |
3.5 讨论 | 第36-38页 |
4 人参皂苷糖基水解酶及其转化产物的初步分离纯化 | 第38-45页 |
4.1 试验材料 | 第38页 |
4.1.1 试剂和药品 | 第38页 |
4.1.2 仪器和设备 | 第38页 |
4.2 试验方法 | 第38-40页 |
4.2.1 人参皂苷糖基水解酶的分离纯化 | 第38-39页 |
4.2.2 硅胶柱层析法分离纯化转化产物 | 第39-40页 |
4.3 结果与分析 | 第40-43页 |
4.3.1 蛋白质含量标准曲线绘制 | 第40页 |
4.3.2 人参皂苷糖基水解酶的分离纯化结果 | 第40-42页 |
4.3.3 转化产物的分离纯化结果 | 第42-43页 |
4.4 讨论 | 第43-45页 |
5 人参叶粉末中人参皂苷 Rb1的提取纯化及含量测定 | 第45-51页 |
5.1 试验材料 | 第45页 |
5.1.1 试剂和药品 | 第45页 |
5.1.2 仪器和设备 | 第45页 |
5.2 试验方法 | 第45-46页 |
5.2.1 色谱条件 | 第45页 |
5.2.2 标准曲线绘制 | 第45页 |
5.2.3 乙醇加热回流提取 | 第45-46页 |
5.2.4 大孔吸附树脂纯化 | 第46页 |
5.3 结果与分析 | 第46-50页 |
5.3.1 人参皂苷 Rb_1标准曲线绘制 | 第46-47页 |
5.3.2 不同乙醇浓度对人参皂苷提取率的影响 | 第47页 |
5.3.3 不同提取时间对人参皂苷提取率的影响 | 第47-48页 |
5.3.4 不同提取液用量对人参皂苷提取率的影响 | 第48页 |
5.3.5 不同提取温度对人参皂苷提取率的影响 | 第48-49页 |
5.3.6 乙醇浓度对大孔吸附树脂纯化皂苷的影响 | 第49页 |
5.3.7 乙醇用量对大孔吸附树脂纯化皂苷的影响 | 第49-50页 |
5.3.8 人参叶皂苷粗体物粉末中人参皂苷 Rb1的含量 | 第50页 |
5.4 讨论 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-55页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第55-56页 |
致谢 | 第56页 |