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高产人参皂苷糖基水解酶菌株的筛选、发酵及初步纯化工艺研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
引言第9-10页
1 文献综述第10-20页
    1.1 人参皂苷的研究概况第10-11页
        1.1.1 人参皂苷的分类与化学结构第10-11页
        1.1.2 人参皂苷的理化性质第11页
    1.2 人参皂苷的生理活性第11-13页
        1.2.1 人参皂苷的抗肿瘤作用第11-12页
        1.2.2 人参皂苷对中枢神经系统的作用第12页
        1.2.3 人参皂苷抗老年痴呆症作用第12页
        1.2.4 人参皂苷的免疫调节作用第12页
        1.2.5 人参皂苷对心脑血管及循环系统的作用第12-13页
        1.2.6 人参皂苷的抗疲劳、抗衰老作用第13页
    1.3 人参皂苷的提取分离方法第13-14页
    1.4 人参皂苷的含量分析方法第14页
    1.5 人参皂苷的糖基改造研究第14-18页
        1.5.1 微生物改造人参皂苷糖基第14-17页
        1.5.2 糖基酶转化人参皂苷途径第17-18页
        1.5.3 糖基酶的分离纯化第18页
    1.6 本研究的目的和意义第18-20页
2 人参皂苷糖基水解酶产生菌的筛选及产物分析方法建立第20-27页
    2.1 试验材料第20-21页
        2.1.1 试剂与药品第20页
        2.1.2 仪器与设备第20-21页
        2.1.3 培养基第21页
    2.2 试验方法第21-22页
        2.2.1 菌株活化第21页
        2.2.2 菌株孢子悬浮液的制备第21页
        2.2.3 琼脂块初筛第21页
        2.2.4 摇瓶复筛第21页
        2.2.5 酶液提取第21-22页
    2.3 分析方法第22-23页
        2.3.1 薄层层析法(TLC)第22页
        2.3.2 高效液相法(HPLC)第22-23页
        2.3.3 酶活力测定第23页
    2.4 结果与分析第23-26页
        2.4.1 TLC 法检测两株真菌的活性第23-24页
        2.4.2 HPLC 法检测两株真菌的活性第24-25页
        2.4.3 两株真菌的酶活力测定第25-26页
    2.5 讨论第26-27页
3 高产人参皂苷糖基水解酶菌株 CGMCC No.4316 的发酵工艺的研究第27-38页
    3.1 试验材料第27页
        3.1.1 试剂和药品第27页
        3.1.2 仪器和设备第27页
        3.1.3 培养基第27页
    3.2 试验方法第27-28页
        3.2.1 产酶发酵方法第27-28页
        3.2.2 酶液和生物量的制备第28页
        3.2.3 酶活力的测定第28页
        3.2.4 单因素试验设计第28页
        3.2.5 响应面设计第28页
    3.3 结果与分析第28-34页
        3.3.1 不同碳源对产酶量的影响第28-29页
        3.3.2 不同氮源对产酶量的影响第29-30页
        3.3.3 金属离子对产酶量的影响第30页
        3.3.4 表面活性剂对产酶量的影响第30页
        3.3.5 pH 对产酶量的影响第30-31页
        3.3.6 发酵时间对产酶量的影响第31页
        3.3.7 发酵温度对产酶量的影响第31-32页
        3.3.8 瓶装量对产酶量的影响第32-33页
        3.3.9 摇瓶转数对产酶量的影响第33页
        3.3.10 底物投料量对产酶量的影响第33-34页
    3.4 响应面设计优化工艺第34-36页
        3.4.1 二次回归拟合及方差分析第34页
        3.4.2 响应面试验结果分析第34-35页
        3.4.3 模型验证结果分析第35-36页
    3.5 讨论第36-38页
4 人参皂苷糖基水解酶及其转化产物的初步分离纯化第38-45页
    4.1 试验材料第38页
        4.1.1 试剂和药品第38页
        4.1.2 仪器和设备第38页
    4.2 试验方法第38-40页
        4.2.1 人参皂苷糖基水解酶的分离纯化第38-39页
        4.2.2 硅胶柱层析法分离纯化转化产物第39-40页
    4.3 结果与分析第40-43页
        4.3.1 蛋白质含量标准曲线绘制第40页
        4.3.2 人参皂苷糖基水解酶的分离纯化结果第40-42页
        4.3.3 转化产物的分离纯化结果第42-43页
    4.4 讨论第43-45页
5 人参叶粉末中人参皂苷 Rb1的提取纯化及含量测定第45-51页
    5.1 试验材料第45页
        5.1.1 试剂和药品第45页
        5.1.2 仪器和设备第45页
    5.2 试验方法第45-46页
        5.2.1 色谱条件第45页
        5.2.2 标准曲线绘制第45页
        5.2.3 乙醇加热回流提取第45-46页
        5.2.4 大孔吸附树脂纯化第46页
    5.3 结果与分析第46-50页
        5.3.1 人参皂苷 Rb_1标准曲线绘制第46-47页
        5.3.2 不同乙醇浓度对人参皂苷提取率的影响第47页
        5.3.3 不同提取时间对人参皂苷提取率的影响第47-48页
        5.3.4 不同提取液用量对人参皂苷提取率的影响第48页
        5.3.5 不同提取温度对人参皂苷提取率的影响第48-49页
        5.3.6 乙醇浓度对大孔吸附树脂纯化皂苷的影响第49页
        5.3.7 乙醇用量对大孔吸附树脂纯化皂苷的影响第49-50页
        5.3.8 人参叶皂苷粗体物粉末中人参皂苷 Rb1的含量第50页
    5.4 讨论第50-51页
结论第51-52页
参考文献第52-55页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第55-56页
致谢第56页

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