| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第13-26页 |
| 1.1 多粘类芽孢杆菌概述 | 第13-14页 |
| 1.2 多粘类芽孢杆菌的应用 | 第14-19页 |
| 1.2.1 农业应用 | 第14-17页 |
| 1.2.1.1 产生植物激素 | 第14页 |
| 1.2.1.2 诱导和增强植物免疫抗性系统 | 第14-15页 |
| 1.2.1.3 产生抗菌物质 | 第15-17页 |
| 1.2.1.4 改良土壤 | 第17页 |
| 1.2.2 工业应用 | 第17-18页 |
| 1.2.3 医药应用 | 第18-19页 |
| 1.3 多粘类芽孢杆菌的分子遗传学研究 | 第19-20页 |
| 1.3.1 转化方法 | 第19页 |
| 1.3.2 基因敲除 | 第19-20页 |
| 1.4 微生物启动子研究 | 第20-22页 |
| 1.4.1 启动子分类 | 第20-22页 |
| 1.4.1.1 组成型启动子 | 第21页 |
| 1.4.1.2 诱导型启动子 | 第21页 |
| 1.4.1.3 时期特异性启动子 | 第21-22页 |
| 1.4.1.4 自诱导启动子 | 第22页 |
| 1.4.2 启动子克隆和筛选方法 | 第22页 |
| 1.5 多粘类芽孢杆菌定殖研究 | 第22-24页 |
| 1.5.1 抗生素抗性标记法 | 第23页 |
| 1.5.2 报告基因标记法 | 第23-24页 |
| 1.6 立题依据、研究内容及技术路线 | 第24-26页 |
| 1.6.1 立题依据 | 第24页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第24-25页 |
| 1.6.3 技术路线 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-39页 |
| 2.1 材料 | 第26-30页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第26-27页 |
| 2.1.2 培养基与溶液 | 第27-29页 |
| 2.1.2.1 培养基 | 第27-28页 |
| 2.1.2.2 常用溶液 | 第28-29页 |
| 2.1.3 酶、试剂与仪器 | 第29页 |
| 2.1.4 引物 | 第29-30页 |
| 2.2 方法 | 第30-39页 |
| 2.2.1 菌种活化和培养 | 第30页 |
| 2.2.2 基因组和质粒提取 | 第30页 |
| 2.2.3 质粒酶切验证 | 第30-31页 |
| 2.2.4 切胶回收 | 第31页 |
| 2.2.5 目的片段的扩增 | 第31-32页 |
| 2.2.6 目的DNA片段的连接 | 第32页 |
| 2.2.7 一步克隆方法 | 第32-33页 |
| 2.2.8 质粒和菌株的构建 | 第33-34页 |
| 2.2.9 菌株转化 | 第34-35页 |
| 2.2.9.1 大肠杆菌的热激转化 | 第34页 |
| 2.2.9.2 枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第34页 |
| 2.2.9.3 多粘类芽孢杆菌的感受态细胞制备及转化 | 第34-35页 |
| 2.2.10 启动子表达强度的验证 | 第35页 |
| 2.2.11 辣椒定殖试验 | 第35-37页 |
| 2.2.11.1 土壤定殖试验 | 第35-36页 |
| 2.2.11.2 水培定殖试验 | 第36-37页 |
| 2.2.12 荧光显微镜观察菌体荧光 | 第37-38页 |
| 2.2.13 液相色谱分离测定发酵产物 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-61页 |
| 3.1 多粘类芽孢杆菌SC2-M1中可功能性表达的gfp和质粒表达载体 | 第39-40页 |
| 3.1.1 在多粘类芽孢杆菌SC2-M1中可功能性表达的gfp基因 | 第39页 |
| 3.1.2 多粘类芽孢杆菌SC2-M1中质粒表达载体的选择 | 第39-40页 |
| 3.2 细菌通用启动子捕获载体的构建 | 第40-43页 |
| 3.2.1 以gfp为报告基因构建启动子捕获载体 | 第40-42页 |
| 3.2.2 启动子捕获载体的验证 | 第42-43页 |
| 3.3 多粘类芽孢杆菌SC2内源启动子的高通量筛选和鉴定 | 第43-48页 |
| 3.3.1 大肠杆菌DH5α中的启动子筛选 | 第44-45页 |
| 3.3.2 启动子信息分析 | 第45-46页 |
| 3.3.3 在枯草芽孢杆菌168中的启动子筛选 | 第46-47页 |
| 3.3.4 多粘类芽孢杆菌SC2-M1中的启动子筛选 | 第47-48页 |
| 3.4 多粘类芽孢杆菌SC2-M1中pLH-29、pLH-41和pLH-77启动子活性研究 | 第48-51页 |
| 3.4.1 不同培养时间下gfp表达量的变化 | 第48页 |
| 3.4.2 不同种类培养基中gfp表达量的变化 | 第48-50页 |
| 3.4.3 pLH-77启动子载体的稳定性试验 | 第50-51页 |
| 3.5 表达载体的可行性验证 | 第51-61页 |
| 3.5.1 用pLH-77启动子调控表达木糖异构酶 | 第51-55页 |
| 3.5.2 利用gfp超表达菌株在辣椒根际定殖试验 | 第55-61页 |
| 3.5.2.1 土壤盆栽试验 | 第56-58页 |
| 3.5.2.2 水培定殖试验 | 第58-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 攻读学位期间发表的论文及成果 | 第74页 |
