| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-29页 |
| 1.1 问题的来由 | 第13页 |
| 1.2 文献综述 | 第13-27页 |
| 1.2.1 结核病研究进展 | 第13-19页 |
| 1.2.2 结核疫苗研究进展 | 第19-23页 |
| 1.2.3 结核菌特异保护性抗原的研究进展 | 第23-25页 |
| 1.2.4 分子佐剂的研究进展 | 第25-27页 |
| 1.3 目的意义 | 第27-29页 |
| 2 材料方法 | 第29-52页 |
| 2.1 材料 | 第29-36页 |
| 2.1.1 菌种 | 第29页 |
| 2.1.2 多抗及蛋白 | 第29页 |
| 2.1.3 质粒 | 第29-30页 |
| 2.1.4 引物 | 第30-31页 |
| 2.1.5 试剂及其配方 | 第31-35页 |
| 2.1.6 培养基及血清 | 第35-36页 |
| 2.1.7 实验动物 | 第36页 |
| 2.1.8 仪器 | 第36页 |
| 2.2 方法 | 第36-52页 |
| 2.2.1 重组质粒的构建 | 第36-43页 |
| 2.2.2 重组质粒pET32a-GARCE、pET32a-GARCE的表达 | 第43-45页 |
| 2.2.3 重组BCG的构建 | 第45-46页 |
| 2.2.4 重组BCG外源基因的表达与鉴定 | 第46-47页 |
| 2.2.5 重组BCG生物特性鉴定 | 第47-49页 |
| 2.2.6 动物实验 | 第49-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-69页 |
| 3.1 重组质粒的构建 | 第52-57页 |
| 3.1.1 PCR扩增GM-CSF，Ag85B,Rv3872,CFP10/ESAT6基因 | 第52页 |
| 3.1.2 利用SOE串联扩增各目的基因 | 第52-54页 |
| 3.1.3 重组质粒的构建与鉴定 | 第54-57页 |
| 3.2 编码目的基因重组质粒的表达 | 第57-61页 |
| 3.2.1 大肠杆菌的表达 | 第57-58页 |
| 3.2.2 重组BCG的表达 | 第58-61页 |
| 3.3 重组BCG的生物学特性 | 第61-64页 |
| 3.3.1 重组BCG的菌落形态 | 第61-62页 |
| 3.3.2 重组BCG的抗酸染色结果 | 第62-63页 |
| 3.3.3 重组BCG的生长曲线 | 第63页 |
| 3.3.4 重组BCG的稳定性 | 第63-64页 |
| 3.4 动物实验 | 第64-69页 |
| 3.4.1 体液免疫水平的评价 | 第64-66页 |
| 3.4.2 细胞免疫水平的评价 | 第66-68页 |
| 3.4.3 临床症状 | 第68页 |
| 3.4.4 病理切片 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-74页 |
| 4.1 融合蛋白的克隆表达及特性 | 第69-71页 |
| 4.2 重组BCG的免疫学评价 | 第71-73页 |
| 4.3 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-83页 |
| 致谢 | 第83页 |