乙型脑炎病毒四川株的分离鉴定及其生物学特性研究
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-25页 |
| 1 乙型脑炎病毒的病原学特性 | 第12-18页 |
| ·乙型脑炎病毒培养特性 | 第12-13页 |
| ·乙型脑炎病毒的分子生物学特性 | 第13-15页 |
| ·乙型脑炎病毒的分型 | 第15-16页 |
| ·乙型脑炎病毒的致病机制 | 第16-18页 |
| 2 乙型脑炎病毒的流行情况 | 第18-20页 |
| 3. 乙脑病毒的危害 | 第20页 |
| 4. 乙脑病毒的诊断方法 | 第20-23页 |
| ·乙型脑炎病毒的分离鉴定 | 第20-21页 |
| ·血清学检测 | 第21-22页 |
| ·传统的血清学方法 | 第21页 |
| ·酶联免疫法 | 第21页 |
| ·免疫荧光法 | 第21页 |
| ·滴金免疫法 | 第21-22页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第22-23页 |
| ·RT—PCR | 第22页 |
| ·套式RT—PCR(RT—Nested—PCR) | 第22页 |
| ·实时荧光PCR(Real—Time PCR) | 第22-23页 |
| 研究目的与意义 | 第23-25页 |
| 第二部分 实验研究 | 第25-49页 |
| 第一章 日本乙型脑炎病毒四川株的分离与鉴定 | 第25-38页 |
| 1 材料 | 第25-26页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·样品 | 第25页 |
| ·细胞系与实验动物 | 第25-26页 |
| ·主要试剂及配制 | 第26页 |
| ·细胞培养基 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·其它 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-30页 |
| ·样品的采集 | 第26-27页 |
| ·样品的处理 | 第27页 |
| ·蚊子样品的处理 | 第27页 |
| ·流产死胎的处理 | 第27页 |
| ·病毒的分离与培养 | 第27页 |
| ·乳鼠脑内接种 | 第27页 |
| ·细胞培养 | 第27页 |
| ·病毒的初步纯化 | 第27-28页 |
| ·病毒的鉴定 | 第28-30页 |
| ·电镜形态观察 | 第28页 |
| ·琼扩实验 | 第28页 |
| ·病毒微量中和试验(固定病毒稀释血清法) | 第28页 |
| ·间接免疫荧光实验(IFA) | 第28-29页 |
| ·间接ELISA实验 | 第29页 |
| ·病毒株的PCR鉴定 | 第29-30页 |
| 3、实验结果 | 第30-35页 |
| ·病毒分离结果 | 第30-32页 |
| ·乳鼠分离结果 | 第30-31页 |
| ·细胞培养结果 | 第31-32页 |
| ·病毒鉴定结果 | 第32-35页 |
| ·电镜超微结构检查结果 | 第32页 |
| ·琼扩实验结果 | 第32-33页 |
| ·中和实验结果 | 第33页 |
| ·间接免疫荧光实验结果 | 第33-34页 |
| ·间接ELISA实验结果 | 第34页 |
| ·RT-PCR鉴定结果 | 第34-35页 |
| 4. 讨论 | 第35-36页 |
| 5. 小结 | 第36-38页 |
| 第二章 乙型脑炎病毒生物学特性研究 | 第38-49页 |
| 1. 材料 | 第38页 |
| ·病毒、细胞、实验动物 | 第38页 |
| ·细胞培养基 | 第38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38页 |
| 2. 方法 | 第38-40页 |
| ·细胞培养特性 | 第38页 |
| ·血凝试验 | 第38-39页 |
| ·病毒滴度测定 | 第39页 |
| ·病毒细胞半数感染量(TCID50)的测定 | 第39页 |
| ·小鼠LD50测定 | 第39页 |
| ·病理切片观察 | 第39页 |
| ·核酸类型测定及理化性质测定 | 第39-40页 |
| ·病毒的核酸类型鉴定 | 第39-40页 |
| ·乙醚敏感试验 | 第40页 |
| ·氯仿敏感试验 | 第40页 |
| ·耐酸性试验 | 第40页 |
| ·胰蛋白酶敏感试验 | 第40页 |
| ·耐热性试验 | 第40页 |
| 3. 结果 | 第40-45页 |
| ·BHK21细胞培养特性 | 第40-41页 |
| ·TCID50测定 | 第41页 |
| ·小鼠LD50测定 | 第41-42页 |
| ·9-11g未成年小鼠LD50测定 | 第41-42页 |
| ·14-16g成年鼠LD50 | 第42页 |
| ·动物实验病理切片观察 | 第42-45页 |
| ·核酸类型及理化特性检测结果 | 第45页 |
| 4. 讨论 | 第45-47页 |
| ·病毒特性 | 第45-46页 |
| ·基因型与毒力关系 | 第46页 |
| ·小鼠感染模型 | 第46-47页 |
| ·小鼠致病性 | 第46-47页 |
| ·病理变化 | 第47页 |
| 5. 小结 | 第47-49页 |
| 全文结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 附录 | 第55页 |
