| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| 0. 引言 | 第11-12页 |
| 1. 荧光定量 PCR（qRT-PCR）中内参基因的选择 | 第12-16页 |
| 1.1 荧光定量 PCR 的发展 | 第12-14页 |
| 1.2 内参基因在荧光定量 PCR 中的应用 | 第14-16页 |
| 2. Nodal 信号通路相关基因的研究进展 | 第16-21页 |
| 2.1 Nodal 信号通路简介 | 第16-19页 |
| 2.2 lefty 基因的研究进展 | 第19-20页 |
| 2.3 pitx2 基因的研究进展 | 第20-21页 |
| 3. 轴丝动力蛋白重链 dnah9 基因的研究进展 | 第21-26页 |
| 3.1 纤毛结构简介 | 第21-22页 |
| 3.2 原发性纤毛运动障碍( primary ciliary dyskinesia, PCD )与纤毛运动 | 第22-23页 |
| 3.3 动力蛋白臂的组装 | 第23-24页 |
| 3.4 纤毛与胚胎的不对称发育 | 第24-26页 |
| 第二章 半滑舌鳎发育期、组织及化学处理的内参基因筛选 | 第26-42页 |
| 1. 材料和方法 | 第27-30页 |
| 1.1 舌鳎胚胎、幼鱼及成鱼组织的收集和制备 | 第27页 |
| 1.2 RNA 提取 | 第27-28页 |
| 1.3 去除 DNA 以及 cDNA 第一链合成 | 第28页 |
| 1.4 候选内参基因及引物设计 | 第28-29页 |
| 1.5 实时荧光定量 PCR | 第29-30页 |
| 1.6 数据分析 | 第30页 |
| 2. 结果 | 第30-39页 |
| 2.1 引物 RT-PCR 扩增产物特异性检测 | 第30-32页 |
| 2.2 各引物扩增效率和实验偏差 | 第32页 |
| 2.3 mRNA 在不同样品中的表达丰度变化 | 第32-35页 |
| 2.4 geNorm 软件分析 | 第35-36页 |
| 2.5 BestKeeper 软件分析 | 第36-39页 |
| 3. 讨论 | 第39-42页 |
| 第三章 半滑舌鳎 lefty 和 pitx2 的克隆与表达分析 | 第42-55页 |
| 1. 材料与方法 | 第42-45页 |
| 1.1 实验材料的收集与准备 | 第42-43页 |
| 1.2 RNA 提取 | 第43页 |
| 1.3 去除 DNA 以及 cDNA 第一链合成 | 第43-44页 |
| 1.4 本文中需要用到的引物 | 第44页 |
| 1.5 核心片段的获得 | 第44页 |
| 1.6 lefty 基因和 pitx2 基因的 cDNA 序列分析 | 第44-45页 |
| 1.7 lefty 和 pitx2 发育阶段与信号阻断表达差异 | 第45页 |
| 2 结果 | 第45-53页 |
| 2.1 半滑舌鳎 lefty 和 pitx2 开放阅读框的获取 | 第45-46页 |
| 2.2 lefty 基因的同源聚类分析和进化树构建 | 第46-48页 |
| 2.3 pitx2 基因的同源聚类分析和进化树构建 | 第48-50页 |
| 2.4 半滑舌鳎 lefty 基因在不同发育时期的表达分析 | 第50-51页 |
| 2.5 半滑舌鳎 pitx2 基因的双内参标定 | 第51-52页 |
| 2.6 Nodal 通路阻断后 lefty 基因和 pitx2 基因的表达量变化 | 第52-53页 |
| 3. 讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 褐牙鲆（Paralichthys olivaceus）轴丝动力蛋白 dnah9 的克隆及表达分析 | 第55-74页 |
| 1. 实验材料和方法 | 第55-65页 |
| 1.1 实验材料 | 第55-57页 |
| 1.2 实验方法 | 第57-65页 |
| 2. 结果 | 第65-72页 |
| 2.1 牙鲆 dnah9 基因 cDNA 全序列的获得 | 第65-66页 |
| 2.2 牙鲆基因组中 dnah9 基因的克隆 | 第66-67页 |
| 2.3 基因序列及结构分析 | 第67页 |
| 2.4 进化树的构建 | 第67-69页 |
| 2.5 各胚胎发育阶段表达量分析 | 第69-72页 |
| 3. 讨论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 个人简历 | 第82-83页 |
