| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-40页 |
| 1.1 普瑞巴林 | 第12-21页 |
| 1.1.1 普瑞巴林简介 | 第12-13页 |
| 1.1.2 普瑞巴林的市场前景 | 第13-14页 |
| 1.1.3 普瑞巴林的合成方法 | 第14-21页 |
| 1.2 腈水解酶概述 | 第21-28页 |
| 1.2.1 腈水解酶的来源和分类 | 第21-23页 |
| 1.2.2 腈水解酶的结构特点及催化机理 | 第23-25页 |
| 1.2.3 腈水解酶的应用 | 第25-28页 |
| 1.3 固定化技术 | 第28-31页 |
| 1.3.1 固定化酶方法 | 第28-30页 |
| 1.3.2 固定化载体的研究 | 第30-31页 |
| 1.3.3 固定化腈水解酶的研究进展 | 第31页 |
| 1.4 课题背景 | 第31-34页 |
| 1.4.1 本课题的研究背景与意义 | 第31-32页 |
| 1.4.2 本课题的主要研究内容 | 第32-34页 |
| 参考文献 | 第34-40页 |
| 第二章 重组腈水解酶的产酶条件优化 | 第40-55页 |
| 2.1 前言 | 第40-41页 |
| 2.2 材料与方法 | 第41-44页 |
| 2.2.1 菌种及培养基 | 第41页 |
| 2.2.2 主要实验仪器和试剂 | 第41-42页 |
| 2.2.3 菌体培养方法 | 第42页 |
| 2.2.4 含腈水解酶静息细胞的制备 | 第42页 |
| 2.2.5 生物量的测定 | 第42页 |
| 2.2.6 酶活测定 | 第42-43页 |
| 2.2.7 腈水解酶的SDS-PAGE分析 | 第43-44页 |
| 2.2.8 分析及计算方法 | 第44页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第44-52页 |
| 2.3.1 碳源对重组菌产酶的影响 | 第44-45页 |
| 2.3.2 氮源对重组菌产酶的影响 | 第45-46页 |
| 2.3.3 金属离子对重组菌产酶的影响 | 第46-47页 |
| 2.3.4 诱导剂的类型及其浓度对重组菌产酶的影响 | 第47-48页 |
| 2.3.5 加入诱导剂的时间对重组菌产酶的影响 | 第48-49页 |
| 2.3.6 不同的诱导温度对重组菌产酶的影响 | 第49-50页 |
| 2.3.7 培养初始pH对重组菌产酶的影响 | 第50-51页 |
| 2.3.8 蛋白电泳图分析 | 第51-52页 |
| 2.4 本章小结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 第三章 腈水解酶固定化方法的选择及其条件优化 | 第55-72页 |
| 3.1 前言 | 第55-56页 |
| 3.2 材料与方法 | 第56-60页 |
| 3.2.1 菌种及培养基 | 第56页 |
| 3.2.2 主要实验仪器和试剂 | 第56-57页 |
| 3.2.3 含腈水解酶静息细胞和腈水解酶粗酶液的制备 | 第57-58页 |
| 3.2.4 蛋白含量的测定方法 | 第58页 |
| 3.2.5 海藻酸钠凝胶包埋固定化细胞方法 | 第58-59页 |
| 3.2.6 海藻酸钠-聚乙烯醇包埋细胞固定化方法 | 第59页 |
| 3.2.7 固定化腈水解酶的树脂筛选 | 第59页 |
| 3.2.8 树脂固定化腈水解酶的制备 | 第59页 |
| 3.2.9 游离酶与固定化酶的活力测定 | 第59页 |
| 3.2.10 分析及计算方法 | 第59-60页 |
| 3.2.11 固定化腈水解酶的酶活回收率及吸附率的计算 | 第60页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第60-69页 |
| 3.3.1 蛋白标准曲线的绘制 | 第60-61页 |
| 3.3.2 海藻酸钠凝胶包埋固定化细胞的操作稳定性 | 第61-62页 |
| 3.3.3 海藻酸钠-聚乙烯醇包埋固定化细胞的操作稳定性 | 第62页 |
| 3.3.4 固定化腈水解酶的树脂筛选 | 第62-63页 |
| 3.3.5 固定化温度对酶固定化的影响 | 第63-64页 |
| 3.3.6 固定化时间对酶固定化的影响 | 第64-65页 |
| 3.3.7 固定化缓冲液类型对酶固定化的影响 | 第65-66页 |
| 3.3.8 固定化缓冲液pH对酶固定化的影响 | 第66-67页 |
| 3.3.9 缓冲液浓度对酶固定化的影响 | 第67-68页 |
| 3.3.10 加树脂量对酶固定化的影响 | 第68-69页 |
| 3.4 本章小结 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-72页 |
| 第四章 固定化腈水解酶拆分外消旋异丁基丁二腈及无效单体的回收 | 第72-86页 |
| 4.1 前言 | 第72-73页 |
| 4.2 材料与方法 | 第73-77页 |
| 4.2.1 菌种及培养基 | 第73页 |
| 4.2.2 主要实验仪器和试剂 | 第73-74页 |
| 4.2.3 固定化腈水解酶的制备 | 第74页 |
| 4.2.4 反应温度对固定化腈水解酶催化IBSN的影响及其温度稳定性 | 第74页 |
| 4.2.5 反应体系pH对固定化腈水解酶催化的影响及其pH稳定性 | 第74-75页 |
| 4.2.6 固定化腈水解酶的操作稳定性 | 第75页 |
| 4.2.7 R-异丁基丁二腈的分离纯化 | 第75-76页 |
| 4.2.8 R-异丁基丁二腈的外消旋化 | 第76-77页 |
| 4.2.9 分析和计算方法 | 第77页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第77-84页 |
| 4.3.1 反应温度对固定化腈水解酶催化IBSN的影响 | 第77-78页 |
| 4.3.2 固定化腈水解酶的温度稳定性 | 第78-80页 |
| 4.3.3 反应体系中pH对固定化腈水解酶催化IBSN的影响 | 第80-81页 |
| 4.3.4 固定化腈水解酶的pH稳定性 | 第81-82页 |
| 4.3.5 固定化腈水解酶的操作稳定性 | 第82-83页 |
| 4.3.6 异丁基丁二腈外消旋化结果 | 第83-84页 |
| 4.4 本章小结 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-86页 |
| 第五章 结论与展望 | 第86-88页 |
| 5.1 结论 | 第86-87页 |
| 5.2 展望 | 第87-88页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文情况 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
