| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-30页 |
| 1.1 青霉素G酰化酶简介 | 第12-14页 |
| 1.2 PGA的固定化 | 第14-17页 |
| 1.2.1 细胞固定化 | 第15页 |
| 1.2.2 酶的固定化 | 第15-17页 |
| 1.2.2.1 无机载体 | 第15-16页 |
| 1.2.2.2 有机载体 | 第16-17页 |
| 1.2.2.3 交联酶聚集体 | 第17页 |
| 1.3 PGA在手性合成中的应用 | 第17-28页 |
| 1.3.1 6-APA和 7-ADCA的制备 | 第18-19页 |
| 1.3.2 β内酰胺抗生素的合成 | 第19-25页 |
| 1.3.2.1 温度和p H对β内酰胺抗生素合成的影响 | 第20-21页 |
| 1.3.2.2 底物浓度对β内酰胺抗生素合成的影响 | 第21页 |
| 1.3.2.3 反应介质对β内酰胺抗生素合成的影响 | 第21-23页 |
| 1.3.2.4 原位产物移除技术 | 第23页 |
| 1.3.2.5 β内酰胺抗生素一锅合成法 | 第23-25页 |
| 1.3.3 手性化合物的拆分 | 第25-28页 |
| 1.3.3.1 氨基酸 | 第25-26页 |
| 1.3.3.2 氨基酸酯 | 第26-27页 |
| 1.3.3.3 氨基腈 | 第27页 |
| 1.3.3.4 氨基醇 | 第27页 |
| 1.3.3.5 酮和酸 | 第27-28页 |
| 1.3.4 前手性化合物的不对称水解 | 第28页 |
| 1.3.5 多肽的合成 | 第28页 |
| 1.4 本论文的选题意义及研究内容 | 第28-30页 |
| 第二章 重组青霉素G酰化酶催化合成头孢克洛及其酶学性质的研究 | 第30-48页 |
| 2.1 引言 | 第30-31页 |
| 2.2 材料与方法 | 第31-37页 |
| 2.2.1 菌株 | 第31页 |
| 2.2.2 培养基 | 第31-32页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第32页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第32-33页 |
| 2.2.5 酶液的制备 | 第33页 |
| 2.2.6 重组青霉素G酰化酶催化合成头孢克洛 | 第33-35页 |
| 2.2.6.1 体系pH对于头孢克洛合成的影响 | 第34页 |
| 2.2.6.2 反应温度对于头孢克洛合成的影响 | 第34页 |
| 2.2.6.3 加酶量对于头孢克洛合成的影响 | 第34页 |
| 2.2.6.4 底物比例对于头孢克洛合成的影响 | 第34页 |
| 2.2.6.5 底物浓度对于头孢克洛合成的影响 | 第34-35页 |
| 2.2.7 青霉素G酰化酶催化合成β内酰胺抗生素的动力学研究 | 第35-36页 |
| 2.2.7.1 活化酰基供体水解反应的动力学参数测定（K_m、V_(max)） | 第35页 |
| 2.2.7.2 β内酰胺抗生素水解反应的动力学参数测定（K_m、V_(max)） | 第35页 |
| 2.2.7.3 β内酰胺抗生素合成反应的动力学参数测定（β_0、γ） | 第35-36页 |
| 2.2.8 液相检测方法 | 第36-37页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第37-47页 |
| 2.3.1 7-ACCA和头孢克洛的液相检测结果 | 第37-38页 |
| 2.3.2 反应体系pH对头孢克洛合成反应的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.3 温度对头孢克洛合成反应的影响 | 第39-40页 |
| 2.3.4 加酶量对头孢克洛合成反应的影响 | 第40-42页 |
| 2.3.5 底物比例对头孢克洛合成反应的影响 | 第42-43页 |
| 2.3.6 底物浓度对头孢克洛合成反应的影响 | 第43-44页 |
| 2.3.7 青霉素G酰化酶催化合成β内酰胺抗生素的动力学研究 | 第44-47页 |
| 2.3.7.1 活化酰基供体以及β内酰胺抗生素水解反应的动力学参数测定 | 第44-45页 |
| 2.3.7.2 青霉素G酰化酶催化合成β内酰胺抗生素的动力学参数测定 | 第45-47页 |
| 2.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 第三章 固定化青霉素G酰化酶催化合成头孢克洛的研究 | 第48-67页 |
| 3.1 引言 | 第48-49页 |
| 3.2 材料与方法 | 第49-54页 |
| 3.2.1 酶源与载体 | 第49页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第49页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第49-50页 |
| 3.2.4 固定化青霉素G酰化酶的制备 | 第50-51页 |
| 3.2.5 固定化青霉素G酰化酶催化合成头孢克洛 | 第51-53页 |
| 3.2.5.1 体系pH对于头孢克洛合成的影响 | 第51-52页 |
| 3.2.5.2 反应温度对于头孢克洛合成的影响 | 第52页 |
| 3.2.5.3 底物比例对于头孢克洛合成的影响 | 第52页 |
| 3.2.5.4 加酶量对于头孢克洛合成的影响 | 第52页 |
| 3.2.5.5 底物浓度对于头孢克洛合成的影响 | 第52-53页 |
| 3.2.6 固定化青霉素G酰化酶的稳定性研究 | 第53页 |
| 3.2.6.1 固定化青霉素G酰化酶的储藏稳定性 | 第53页 |
| 3.2.6.2 固定化青霉素G酰化酶的pH稳定性 | 第53页 |
| 3.2.6.3 固定化青霉素G酰化酶的温度稳定性 | 第53页 |
| 3.2.6.4 固定化青霉素G酰化酶的操作稳定性 | 第53页 |
| 3.2.7 固定化青霉素G酰化酶的底物特异性 | 第53-54页 |
| 3.2.8 检测方法 | 第54页 |
| 3.2.8.1 固定化青霉素G酰化酶的酶活定义 | 第54页 |
| 3.2.8.2 头孢克洛、头孢氨苄、头孢拉定的液相检测方法 | 第54页 |
| 3.2.8.3 头孢羟氨苄的液相检测方法 | 第54页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第54-66页 |
| 3.3.1 头孢克洛、头孢氨苄、头孢羟氨苄、头孢拉定、7-ADCA、7-ACCA的液相检测结果 | 第54-56页 |
| 3.3.2 固定化青霉素G酰化酶的最适反应pH以及p H稳定性 | 第56-57页 |
| 3.3.3 固定化青霉素G酰化酶的最适反应温度以及温度稳定性 | 第57-59页 |
| 3.3.4 酰基侧链与母核的摩尔比对头孢克洛合成的影响 | 第59-60页 |
| 3.3.5 加酶量对头孢克洛合成的影响 | 第60-61页 |
| 3.3.6 7-ACCA浓度对头孢克洛合成的影响 | 第61-62页 |
| 3.3.7 固定化青霉素G酰化酶的底物特异性 | 第62-65页 |
| 3.3.8 固定化青霉素G酰化酶催化合成头孢克洛的操作稳定性 | 第65-66页 |
| 3.4 本章小结 | 第66-67页 |
| 第四章 结论与展望 | 第67-69页 |
| 4.1 结论 | 第67-68页 |
| 4.2 展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
