| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-12页 |
| 引言 | 第12-18页 |
| 1 环氧合酶的研究进展 | 第12-18页 |
| ·环氧合酶的发现 | 第13页 |
| ·COX-1 和 COX-2 的生化特性 | 第13-15页 |
| ·基因结构 | 第13页 |
| ·蛋白结构 | 第13-15页 |
| ·COX-1 和 COX-2 的基因表达与调节 | 第15页 |
| ·雌激素和孕激素研究进展 | 第15-16页 |
| ·雌激素的生理作用 | 第15-16页 |
| ·对生殖器官的作用 | 第16页 |
| ·对输卵管的作用 | 第16页 |
| ·孕激素的生理作用 | 第16页 |
| ·孕激素对输卵管和子宫的作用 | 第16页 |
| ·前列腺素对输卵管功能的调节 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第17-18页 |
| 第一章 奶牛输卵管上皮细胞培养及形态学鉴定 | 第18-27页 |
| 1. 材料和方法 | 第18-21页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·动物组织 | 第18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·常用溶液的配置 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-21页 |
| ·牛输卵管上皮细胞原代培养方法的建立 | 第19页 |
| ·牛输卵管上皮细胞的纯化和传代培养 | 第19页 |
| ·体外培养的牛输卵管上皮细胞的显微镜观察及形态学鉴定 | 第19-20页 |
| ·牛输卵管上皮细胞的冷冻保存 | 第20页 |
| ·牛输卵管上皮细胞的解冻复苏 | 第20页 |
| ·输卵管免疫组化和输卵管上皮细胞的免疫组化 | 第20-21页 |
| ·输卵管免疫组化 | 第20-21页 |
| ·输卵管上皮细胞的免疫组化 | 第21页 |
| 2 结果 | 第21-25页 |
| ·牛输卵管上皮细胞的原代培养及鉴定 | 第21-22页 |
| ·牛输卵管上皮细胞的纯化和传代细胞的鉴定 | 第22-25页 |
| ·牛输卵管上皮细胞的纯化 | 第22-23页 |
| ·上皮细胞的鉴定 | 第23-25页 |
| ·形态学观察法 | 第24页 |
| ·组织免疫组化结果 | 第24-25页 |
| ·输卵管上皮细胞免疫组化结果 | 第25页 |
| 3 讨论 | 第25-26页 |
| 4 小结 | 第26-27页 |
| 第二章 17-β-雌二醇和孕酮对体外培养培养的奶牛输卵管上皮细胞环氧合酶表达的 影响 | 第27-51页 |
| 1. 材料和方法 | 第27-34页 |
| ·材料 | 第27-29页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·常用溶液的配置 | 第27-28页 |
| ·PCR 引物的设计及合成 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-34页 |
| ·COX-1、COX-2 和18sRNA 的RT-PCR 扩增 | 第29-30页 |
| ·奶牛输卵管总 RNA 的提取 | 第29页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第29-30页 |
| ·牛 COX-1、COX-2、185 rRNA 基因cDNA 序列的PCR 扩增 | 第30页 |
| ·17-β-雌二醇对奶牛输卵管上皮细胞环氧合酶表达的影响 | 第30-31页 |
| ·不同浓度的17-β-雌二醇的诱导 | 第30-31页 |
| ·不同作用时间的17-β-雌二醇的诱导 | 第31页 |
| ·孕酮对奶牛输卵管上皮细胞环氧合酶表达的影响 | 第31-32页 |
| ·不同浓度的孕酮诱导 | 第31页 |
| ·不同作用时间孕酮的诱导 | 第31-32页 |
| ·17β-雌二醇、孕酮对COX-1 C、OX-2 mRNA 转录影响的实时荧光定量PCR 检测 | 第32-33页 |
| ·诱导培养细胞总 RNA 的提取 | 第32页 |
| ·反转录 | 第32页 |
| ·实时荧光定量PCR 检测 | 第32-33页 |
| ·17β-雌二醇、孕酮对 COX-1、COX-2 蛋白质翻译情况影响的 Western blot 检测 | 第33-34页 |
| ·诱导培养细胞总蛋白的提取 | 第33页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳分析（SDS-PAGE） | 第33-34页 |
| ·Western blot 检测 | 第34页 |
| 2 结果 | 第34-49页 |
| ·奶牛输卵管组织总 RNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·COX-1、COX-2 和185RNA 的 RT-PCR 扩增 | 第35-37页 |
| ·COX-1、COX-21、851RNA实时荧光定量PCR标准曲线的制备 | 第35-37页 |
| ·实时荧光定量 PCR 实验结果数据处理 | 第37页 |
| ·17-β-雌二醇、孕酮对 COX-1、COX-2 mRNA 转录水平影响的实时荧光定量检测 | 第37-47页 |
| ·诱导培养细胞总 RNA 的提取 | 第37页 |
| ·17-β-雌二醇对 COX-1、COX-2 mRNA 转录水平的影响 | 第37-42页 |
| ·孕酮对 COX-1、COX-2 mRNA 转录水平的影响 | 第42-47页 |
| ·17-β-雌二醇、孕酮对 COX-1 C、OX-2 蛋白质翻译水平影响的 Western blotting 检测 | 第47-49页 |
| ·诱导培养细胞总蛋白的提取及电泳分析 | 第47页 |
| ·17-β-雌二醇对COX-1 C、OX-2 蛋白质翻译水平的影响 | 第47-48页 |
| ·孕酮对COX-1 C、OX-2 蛋白质翻译水平的影响 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-50页 |
| 4 小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
