| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-15页 |
| 1.1 引言 | 第11页 |
| 1.2 酰亚胺类化合物的研究进展 | 第11页 |
| 1.3 黄酮类化合物的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.3.1 黄酮类化合物概述 | 第11-12页 |
| 1.3.2 黄酮类化合物对细胞生长的抑制 | 第12页 |
| 1.3.3 黄酮类化合物影响细胞信号转导 | 第12页 |
| 1.3.4 黄酮类化合物诱导细胞凋亡 | 第12-13页 |
| 1.3.5 黄酮类化合物抑制细胞的迁移 | 第13页 |
| 1.4 细胞凋亡 | 第13-15页 |
| 1.4.1 死亡受体途径 | 第13-14页 |
| 1.4.2 线粒体凋亡途径 | 第14-15页 |
| 第2章 实验材料，试剂，仪器 | 第15-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 实验细胞株 | 第15页 |
| 2.1.2 实验器材 | 第15页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第15-16页 |
| 2.2 实验试剂配置 | 第16-22页 |
| 2.2.1 细胞培养试剂配制 | 第16-17页 |
| 2.2.2 MTT溶液的配制 | 第17页 |
| 2.2.3 荧光染色试剂配制 | 第17-18页 |
| 2.2.4 Western blot实验试剂配制 | 第18-22页 |
| 2.2.5 动物实验使用试剂配制 | 第22页 |
| 2.3 实验试剂及器材 | 第22-25页 |
| 第3章 实验方法 | 第25-37页 |
| 3.1 细胞培养 | 第25-26页 |
| 3.1.1 细胞复苏 | 第25页 |
| 3.1.2 细胞换液 | 第25页 |
| 3.1.3 细胞传代 | 第25-26页 |
| 3.2. MTT法检测WYX72对肿瘤细胞增殖情况的影响 | 第26-27页 |
| 3.2.1 细胞接种 | 第26页 |
| 3.2.2 加入WYX72 | 第26页 |
| 3.2.3 加入MTT | 第26页 |
| 3.2.4 测量吸光度 | 第26-27页 |
| 3.3 高内涵细胞成像系统检测细胞生长情况 | 第27-28页 |
| 3.3.1 AO/EB/Hoechst 33342染色 | 第27页 |
| 3.3.2 Rh123染色 | 第27-28页 |
| 3.3.3 DCFH-DA染色 | 第28页 |
| 3.4 FACSort流式细胞仪检测细胞死亡 | 第28-29页 |
| 3.4.1 Annexin V/PI染色 | 第28-29页 |
| 3.4.2 PI染色 | 第29页 |
| 3.4.3 Rh123染色 | 第29页 |
| 3.5 细胞划痕实验 | 第29-30页 |
| 3.5.1 接种细胞 | 第30页 |
| 3.5.2 划细胞并加入WYX72 | 第30页 |
| 3.5.3 拍照 | 第30页 |
| 3.5.4 细胞迁移率计算 | 第30页 |
| 3.6 线粒体的提取 | 第30-31页 |
| 3.6.1 细胞处理 | 第30-31页 |
| 3.6.2 线粒体提取 | 第31页 |
| 3.7 Western Blot | 第31-33页 |
| 3.7.1 细胞处理 | 第31-32页 |
| 3.7.2 细胞裂解 | 第32页 |
| 3.7.3 Western Blot操作 | 第32-33页 |
| 3.8 WYX72体内抗肿瘤活性研究 | 第33-36页 |
| 3.8.1 H22实体瘤模型 | 第33-35页 |
| 3.8.2 H22肺转移模型 | 第35-36页 |
| 3.8.3 CT-26肺转移模型 | 第36页 |
| 3.9 统计学方法 | 第36-37页 |
| 第4章 实验结果 | 第37-71页 |
| 4.1 WYX72对肿瘤细胞增殖的影响 | 第37-39页 |
| 4.2 高内涵细胞成像系统检测Hep G2、SMMC-7721细胞生长情况 | 第39-46页 |
| 4.2.1 AO/EB染色，检测化合物WYX72对Hep G2、SMMC-7721细胞死亡的影响 | 第39-42页 |
| 4.2.2 Rh123染色检测化合物WYX72对Hep G2、SMMC-7721细胞线粒体膜电位的影响 | 第42-44页 |
| 4.2.3 DCFH-DA染色检测化合物WYX72对Hep G2、SMMC-7721细胞内活性氧含量的影响 | 第44-46页 |
| 4.3 FACSort流式细胞仪检测细胞死亡 | 第46-57页 |
| 4.3.1 Annexin V/PI染色检测化合物WYX72对Hep G2、SMMC-7721细胞凋亡的影响 | 第46-51页 |
| 4.3.2 PI染色检测化合物WYX72对Hep G2、SMMC-7721细胞周期的影响41 | 第51-53页 |
| 4.3.3 Rh123染色化合物WYX72作用Hep G、SMMC-7721细胞后，细胞线粒体膜电位的变化情况 | 第53-57页 |
| 4.4 细胞划痕实验检测化合物WYX72作用Hep G2、SMMC-7721细胞后，对细胞迁移能力的影响 | 第57-59页 |
| 4.5 采用Western Blot检测化合物WYX72作用Hep G2、SMMC-7721细胞后相关蛋白的表达 | 第59-65页 |
| 4.6 化合物WYX72体内抗肿瘤作用的研究 | 第65-71页 |
| 4.6.1 化合物WYX72对H22实体瘤各项指标的影响 | 第65-67页 |
| 4.6.2 化合物WYX72对H22肺转移各项指标的影响 | 第67-68页 |
| 4.6.3 化合物WYX72对CT-26肺转移各项指标的影响 | 第68-71页 |
| 第5章 实验讨论 | 第71-75页 |
| 第6章 实验结论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-83页 |
| 附录 | 第83-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
