摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
1 文献综述 | 第8-17页 |
1.1 杨树的主要研究 | 第8-9页 |
1.2 植物的转录因子 | 第9-10页 |
1.3 植物WRKY录因子的结构特征与分类 | 第10-12页 |
1.3.1 WRKY转录因子的结构特征 | 第10-11页 |
1.3.2 WRKY转录因子的分类 | 第11-12页 |
1.4 WRKY转录因子生物学功能的研究 | 第12-17页 |
1.4.1 WRKY转录因子在生物胁迫反应中的调控作用 | 第12-15页 |
1.4.2 WRKY转录因子在非生物逆境反应中的调控作用 | 第15-16页 |
1.4.3 WRKY转录因子调控植物生长发育、形态建成和代谢调控等过程 | 第16-17页 |
2 引言 | 第17-19页 |
2.1 课题的研究目的及意义 | 第17页 |
2.2 课题研究的内容 | 第17-18页 |
2.3 课题研究采用的技术路线 | 第18-19页 |
3 材料与方法 | 第19-36页 |
3.1 研究材料 | 第19页 |
3.1.1 植物材料 | 第19页 |
3.1.2 菌株和质粒 | 第19页 |
3.2 主要仪器设备 | 第19页 |
3.3 实验试剂 | 第19-21页 |
3.3.1 主要药品及分子生物学试剂 | 第19-20页 |
3.3.2 引物合成与测序 | 第20页 |
3.3.3 主要试剂、抗生素和培养基的配制 | 第20-21页 |
3.4 实验方法 | 第21-36页 |
3.4.1 PtrWRKY54基因的克隆及测序 | 第21-24页 |
3.4.2 基因的进化分析 | 第24页 |
3.4.3 序列分析 | 第24-25页 |
3.4.4 Pt WRKY54的表达模式分析 | 第25-26页 |
3.4.5 PtrWRKY54基因的亚细胞定位分析 | 第26-28页 |
3.4.6 PtrWRKY54的转录活性分析 | 第28-30页 |
3.4.7 过表达载体的构建载体构建 | 第30-32页 |
3.4.8 pRI201-AN-GUS-PtrWRKY54过表达载体转化农杆菌 | 第32-33页 |
3.4.9 农杆菌介导的PtrWRKY54转化南林95杨 | 第33-34页 |
3.4.10 PCR检测获得抗性苗 | 第34-35页 |
3.4.11 PCR阳性苗的组织化学染色 | 第35-36页 |
4 结果与分析 | 第36-49页 |
4.1 PtrWRKY54基因的克隆及测序 | 第36-37页 |
4.2 杨树PtrWRKY54的系统发育分析 | 第37-38页 |
4.2.1 杨树PtrWRKY54与其同源的WRKY的进化关系 | 第37页 |
4.2.2 杨树PtrWRKY54与抗病相关WRKY基因的进化树的构建 | 第37-38页 |
4.3 PtrWRKY54基因的序列分析 | 第38-41页 |
4.4 PtrWRKY54表达模式分析 | 第41-42页 |
4.5 PtrWRKY54的亚细胞定位 | 第42-44页 |
4.6 PtrWRKY54的转录活性分析 | 第44-45页 |
4.7 过量表达载体的构建 | 第45-46页 |
4.8 pRI201-AN-GUS-PtrWRKY54重组质粒导入农杆菌 | 第46-47页 |
4.9 过表达转基因杨树的获得和转基因植株的阳性检测 | 第47-49页 |
4.9.1 获得PtrWRKY54过表达转基因杨树 | 第47页 |
4.9.2 杨树抗性苗的PCR检测 | 第47-48页 |
4.9.3 PCR检测阳性苗的组织化学染色 | 第48-49页 |
5 讨论与结论 | 第49-52页 |
5.1 讨论 | 第49-51页 |
5.1.1 杨树PtrWRKY54基因的特征分析 | 第49页 |
5.1.2 杨树PtrWRKY54基因的表达模式 | 第49-50页 |
5.1.3 杨树WRKY基因的功能研究 | 第50-51页 |
5.2 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
附录A:中英文缩写与注释附录附录 | 第60-61页 |
附录B:杨树PtrWRKY54测序结果 | 第61-62页 |
附录C:载体图谱 | 第62-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
个人简介 | 第65页 |
成果清单 | 第65页 |