摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
1. 文献综述 | 第11-24页 |
1.1 线粒体(mitochondrion) | 第11-12页 |
1.2 线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA) | 第12-14页 |
1.3 mtDNA的复制与转录 | 第14-16页 |
1.4 mtDNA拷贝数(mtDNA copy number) | 第16-18页 |
1.5 mtDNA甲基化 | 第18-20页 |
1.6 Long PCR | 第20-22页 |
1.7 实时荧光定量PCR(Q-PCR) | 第22-24页 |
2. 研究目的及意义 | 第24-25页 |
3. 材料与方法 | 第25-36页 |
3.1 试验材料 | 第25-27页 |
3.1.1 试验动物 | 第25页 |
3.1.2 样品采集 | 第25页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第25-26页 |
3.1.4 实验所需试剂(盒) | 第26-27页 |
3.2 试验方法 | 第27-36页 |
3.2.1 DNA提取及检测 | 第27-28页 |
3.2.2 总RNA提取及检测 | 第28-29页 |
3.2.3 PCR引物设计及合成 | 第29-31页 |
3.2.4 Long PCR | 第31-32页 |
3.2.5 定量各样品中mtDNA拷贝数 | 第32页 |
3.2.6 mRNA反转录 | 第32-33页 |
3.2.7 定量各样品中线粒体基因及核基因相关基因表达 | 第33页 |
3.2.8 mtDNA甲基化检测 | 第33-35页 |
3.2.9 数据分析 | 第35-36页 |
4. 试验结果 | 第36-45页 |
4.1 各扩增片段扩增效果无差异 | 第36-37页 |
4.2 样品mtDNA不存在大片段缺失 | 第37-39页 |
4.3 组织中mtDNA拷贝数存在差异 | 第39-41页 |
4.4 TWINKLE基因表达量与mtDNA拷贝数有显著线性关系 | 第41-42页 |
4.5 线粒体基因表达量与mtDNA拷贝数存在显著线性关系 | 第42-44页 |
4.6 mtDNA D-loop区域存在甲基化 | 第44-45页 |
5. 讨论 | 第45-48页 |
5.1 mtDNA扩增片段选择分析 | 第45页 |
5.2 mtDNA拷贝数的时空差异性分析 | 第45-47页 |
5.3 核基因及线粒体基因与mtDNA拷贝数关联性分析 | 第47页 |
5.4 mtDNA D-loop区域甲基化分析 | 第47-48页 |
6. 结论 | 第48-49页 |
7. 参考文献 | 第49-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第56页 |