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三种茄科作物Pht1家族磷转运蛋白基因的克隆及表达调控分析

摘要第7-10页
ABSTRACT第10-12页
英文缩略符及其中英文对照表第13-15页
第一章 文献综述第15-34页
    1. 植物磷素营养的生理功能第15页
    2. 土壤中磷素资源的含量及利用现状第15-16页
    3. 植物对低磷胁迫的适应机制第16-22页
        3.1 植物根系形态上的适应第17-18页
        3.2 形成丛枝菌根第18-20页
        3.3 对根际难溶性磷的活化第20-22页
    4. 植物对磷素营养的吸收运输系统-磷转运蛋白第22-28页
        4.1 Pht1家族磷转运蛋白第23-26页
        4.2 Pht2家族磷转运蛋白第26-27页
        4.3 其它家族的磷转运蛋白第27-28页
    5. 植物中缺磷信号的传导及分子调控第28-32页
        5.1 PHR1介导的植物缺磷信号的调控第29-30页
        5.2 miR399参与的磷信号的调控第30-32页
        5.3 其它代谢途径的调控第32页
    6. 结语第32-34页
第二章 辣椒、茄子和烟草Pht1家族基因的克隆及生物信息学分析第34-48页
    1. 引言第34页
    2. 材料与方法第34-36页
        2.1 作物材料第34-35页
        2.2 菌种及克隆载体第35页
        2.3 DNA提取第35页
        2.4 PCR反应及引物第35页
        2.5 PCR产物测序第35页
        2.6 RNA提取和RACE-PCR扩增第35页
        2.7 序列分析第35-36页
        2.8 Southern Blot杂交第36页
    3. 结果与分析第36-46页
        3.1 茄子、辣椒和烟草Pht1基因片段的分离第36-37页
        3.2 茄子、辣椒和烟草Pht1基因全长cDNA的克隆第37-38页
        3.3 茄子、辣椒和烟草Pht1基因的序列分析第38-43页
        3.4 茄子、辣椒和烟草Pht1基因的结构功能域分析第43-45页
        3.5 磷转运蛋白基因的Southern杂交分析第45-46页
    4. 讨论第46-48页
第三章 磷饥饿及恢复供磷对茄子、辣椒和烟草生长及Pht1基因表达的影响第48-57页
    1. 引言第48-49页
    2. 材料与方法第49-50页
        2.1 植物材料与生长条件第49页
        2.2 植株收获及采样第49页
        2.3 植株全磷的测定第49页
        2.4 RNA提取及反转录第49页
        2.5 半定量RT-PCR及引物第49-50页
    3. 结果与分析第50-54页
        3.1 磷饥饿对茄子、辣椒和烟草生长的影响第50-52页
        3.2 磷饥饿及恢复供磷对茄子、辣椒和烟草Pht1基因表达的影响第52-54页
    4. 讨论第54-57页
第四章 丛枝菌根对茄子、辣椒和烟草的生长及,Pht1基因表达的影响第57-69页
    1. 引言第57-58页
    2. 材料与方法第58-60页
        2.1 植物材料与生长条件第58页
        2.2 供试菌种第58页
        2.3 植株收获及采样第58页
        2.4 植株全磷的测定第58-59页
        2.5 可溶性糖的测定第59页
        2.6 菌根真菌侵染率的测定第59页
        2.7 RNA提取及cDNA的合成第59页
        2.8 RT-PCR反应及引物第59页
        2.9 实时荧光定量PCR及引物第59-60页
    3. 结果与分析第60-66页
        3.1 菌根对茄子、辣椒和烟草生长的影响第60-61页
        3.2 菌根对茄子、辣椒和烟草磷吸收的影响第61-62页
        3.3 菌根对茄子、辣椒和烟草可溶性糖的影响第62-63页
        3.4 菌根对茄子、辣椒和烟草磷转运体基因表达的影响第63-66页
    4. 讨论第66-69页
        4.1 丛枝菌根对茄子、辣椒和烟草营养生长的影响第66-67页
        4.2 丛枝菌根对茄子、辣椒和烟草Phtl基因表达的影响第67-69页
第五章 茄子和烟草Pht1;3、Pht1;4及Pht1;5基因的时空表达模式分析第69-81页
    1. 引言第69页
    2. 材料与方法第69-72页
        2.1 作物材料第69-70页
        2.2 茄子和烟草Pht1;3,Pht1;4及Pht1;5启动子的分离第70页
        2.3 启动子片段融合pBI121表达载体的构建第70页
        2.4 农杆菌介导的烟草的转化第70-72页
    3. 结果与分析第72-79页
        3.1 Pht1;3,Pht1;4及Pht1;5启动子片段的分离第72-74页
        3.2 Pht1;3,Pht1;4及Pht1;5启动子与GUS基因融合第74-77页
        3.3 Pht1;3,Pht1;4及Pht1;5组织特异性分析第77-79页
    4. 讨论第79-81页
第六章 茄科植物Pht1;3,Pht1;4和Pht1;5启动子的调控机制分析第81-98页
    1. 引言第81-82页
    2. 材料与方法第82-84页
        2.1 供试材料第82页
        2.2 启动子片段的生物信息学分析第82页
        2.3 Pht1;3-1;5启动子不同缺失片段融合GUS表达载体的构建第82页
        2.4 酵母单杂交第82-84页
    3. 结果与分析第84-93页
        3.1 Pht1;3,Pht1;4及Pht1;5启动子的结构分析第84-86页
        3.2 含有不同长度Pht1;3-5启动子融合GUS的转基因烟草的获得第86-87页
        3.3 启动子的不同缺失突变体驱动GUS基因表达活性的检测第87-89页
        3.4 与Myc-box基序(motif)结合的转录因子的克隆第89-93页
    4. 讨论第93-98页
第七章 全文结论第98-100页
参考文献第100-121页
创新点第121-122页
附录第122-152页
在读期间发表的论文第152-153页
致谢第153页

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