| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 1 引言 | 第13-19页 |
| 1.1 研究背景及意义 | 第13页 |
| 1.2 研究现状 | 第13-16页 |
| 1.2.1 新的抗生素 | 第13-14页 |
| 1.2.2 β-内酰胺酶抑制剂 | 第14页 |
| 1.2.3 基于免疫系统的治疗 | 第14页 |
| 1.2.4 疫苗治疗 | 第14页 |
| 1.2.5 外排泵抑制剂 | 第14-15页 |
| 1.2.6 群体感应抑制剂 | 第15页 |
| 1.2.7 纳米颗粒 | 第15页 |
| 1.2.8 噬菌体治疗 | 第15-16页 |
| 1.3 研究目的及意义 | 第16页 |
| 1.4 研究内容及技术路线 | 第16-19页 |
| 2 噬菌体PaP1 DNA聚合酶gp90无外切酶活性突变体的制备、表达、纯化以及活性检测 | 第19-37页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第19-23页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第21-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 pET28b-gp90无外切酶活性突变体的引物设计 | 第23页 |
| 2.2.2 pET28b-gp90无外切酶活性突变体的制备 | 第23-25页 |
| 2.2.3 DNA聚合酶gp90及其突变体的表达 | 第25-26页 |
| 2.2.4 DNA聚合酶gp90及其突变体的纯化 | 第26页 |
| 2.2.5 DNA聚合酶gp90及其突变体的活性实验 | 第26-29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-35页 |
| 2.3.1 pET28b-gp90 外切酶突变体的制备 | 第29-30页 |
| 2.3.2 pET28b-gp90 及其外切酶突变体的小量诱导表达结果 | 第30-31页 |
| 2.3.3 pET28b-gp90 及其外切酶突变体的大量诱导表达结果 | 第31-32页 |
| 2.3.4 pET28b-gp90 及其外切酶突变体的蛋白纯化结果 | 第32-33页 |
| 2.3.5 DNA聚合酶gp90及其突变体的活性实验结果 | 第33-35页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第35-37页 |
| 3 噬菌体PaP1 DNA聚合酶gp90 exo~-通过 8-oxoG损伤的动力学机制 | 第37-49页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第37-39页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第37页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第37-38页 |
| 3.1.3 试剂配制 | 第38页 |
| 3.1.4 DNA底物合成 | 第38-39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-42页 |
| 3.2.1 Gp90 exo~-通过 8-oxoG的全长延伸实验 | 第39页 |
| 3.2.2 稳态动力学分析gp90 exo~-通过G/8-oxoG的单点插入实验 | 第39-40页 |
| 3.2.3 稳态动力学分析gp90 exo~-通过G/8-oxoG的下一位延伸实验 | 第40页 |
| 3.2.4 稳态前动力学分析gp90 exo~-通过G/8-oxoG的单点插入实验 | 第40-41页 |
| 3.2.5 Gp90 exo~-与不同DNA（G/8-oxoG）的生物物理相互作用 | 第41-42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-47页 |
| 3.3.1 Gp90 exo~-通过G/8-oxoG的全长延伸实验结果 | 第42-43页 |
| 3.3.2 稳态动力学研究gp90 exo~-通过G/8-oxoG的单点插入实验结果 | 第43-44页 |
| 3.3.3 稳态动力学研究gp90 exo~-通过G/8-oxoG的下一位延伸实验结果 | 第44页 |
| 3.3.4 稳态前动力学分析gp90 exo~-通过G/8-oxoG的单点插入实验结果 | 第44-45页 |
| 3.3.5 Gp90 exo~-与不同DNA（G/8-oxoG）的生物物理相互作用结果 | 第45-47页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第47-49页 |
| 4 噬菌体PaP1 DNA聚合酶gp90 exo~-通过O~6-MeG损伤的动力学机制 | 第49-63页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第49-51页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第49页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第49-50页 |
| 4.1.3 试剂配制 | 第50页 |
| 4.1.4 DNA底物合成 | 第50-51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-54页 |
| 4.2.1 Gp90 exo~-通过O~6-MeG的全长延伸实验 | 第51-52页 |
| 4.2.2 稳态动力学分析gp90 exo~-通过G/O~6-MeG的单点插入实验 | 第52页 |
| 4.2.3 稳态动力学分析gp90 exo~-通过G/O~6-MeG的下一位延伸实验 | 第52页 |
| 4.2.4 稳态前动力学分析gp90 exo~-通过G/O~6-MeG的单点插入实验 | 第52-53页 |
| 4.2.5 Gp90 exo~-与不同DNA（G/O~6-MeG）的生物物理相互作用 | 第53-54页 |
| 4.2.6 快速荧光动力学方法检测dNTP与gp90 exo~--DNA复合物的结合实验 | 第54页 |
| 4.3 结果与分析 | 第54-61页 |
| 4.3.1 Gp90 exo~-通过G/O~6-MeG的全长延伸实验结果 | 第54-55页 |
| 4.3.2 稳态动力学研究gp90 exo~-通过G/O~6-MeG的单点插入实验结果 | 第55-56页 |
| 4.3.3 稳态动力学研究gp90 exo~-通过G/O~6-MeG的下一位延伸实验结果 | 第56页 |
| 4.3.4 稳态前动力学分析gp90 exo~-通过G/O~6-MeG的单点插入实验结果 | 第56-58页 |
| 4.3.5 Gp90 exo~-与不同DNA（G/O~6-MeG）的生物物理相互作用结果 | 第58-60页 |
| 4.3.6 快速荧光动力学方法检测dNTP与gp90 exo~--DNA复合物的结合机制 | 第60-61页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第61-63页 |
| 5 总结与展望 | 第63-65页 |
| 5.1 总结 | 第63-64页 |
| 5.2 展望 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
