| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-18页 |
| 1.1 NF-κB概述 | 第10-12页 |
| 1.1.1 NF-κB/Rel家族 | 第10-11页 |
| 1.1.2 IκB家族 | 第11-12页 |
| 1.1.3 IκB激酶(IκB kinase,IKK) | 第12页 |
| 1.2 NF-κB的活化调节机制 | 第12-13页 |
| 1.3 NF-κB活化的信号转导途径 | 第13-15页 |
| 1.3.1 TNF-α信号传导途径 | 第14-15页 |
| 1.3.2 IL-1/TLR信号传导途径 | 第15页 |
| 1.4 NF-κB的生物学功能 | 第15-16页 |
| 1.4.1 NF-κB调节细胞增殖和凋亡 | 第15-16页 |
| 1.4.2 NF-κB参与免疫应答及炎症反应 | 第16页 |
| 1.5 NF-κB与疾病及疾病治疗 | 第16-17页 |
| 1.5.1 NF-κB与肿瘤 | 第16-17页 |
| 1.5.2 NF-κB与类风湿性关节炎 | 第17页 |
| 1.6 展望 | 第17-18页 |
| 第二章 人colipase-like3及其同源基因克隆和鉴定 | 第18-38页 |
| 2.1 引言 | 第18-19页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.1 菌种 | 第19页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.2.3 实验设备 | 第20页 |
| 2.3 实验方法 | 第20-28页 |
| 2.3.1 生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 2.3.2 质粒、菌株 | 第21页 |
| 2.3.3 细胞系培养 | 第21页 |
| 2.3.4 总RNA提取 | 第21-22页 |
| 2.3.5 RNA逆转录成cDNA | 第22页 |
| 2.3.6 PCR分析表达谱 | 第22-23页 |
| 2.3.7 真核表达质粒构建及提取 | 第23-24页 |
| 2.3.8 聚合酶链式反应(PCR) | 第24-25页 |
| 2.3.9 目的片段凝胶回收 | 第25页 |
| 2.3.10 目的片段与载体酶切 | 第25-26页 |
| 2.3.11 酶切后的目的片段与载体连接 | 第26页 |
| 2.3.12 质粒转化 | 第26页 |
| 2.3.13 质粒小量提取 | 第26-27页 |
| 2.3.14 酶切鉴定 | 第27页 |
| 2.3.15 测序 | 第27-28页 |
| 2.4 结果与分析 | 第28-36页 |
| 2.4.1 人类CLPSL3基因cDNA序列的发现及分析 | 第28-29页 |
| 2.4.2 人类CLPSL3蛋白的性质及结构特征 | 第29-31页 |
| 2.4.3 同源蛋白质序列比 | 第31-33页 |
| 2.4.4 小鼠、大鼠同源cDNA克隆 | 第33-34页 |
| 2.4.5 hCLPSL3-pcDNA3.1(-)B融合表达质粒构建 | 第34-36页 |
| 2.4.6 pEGFPN1-hCLPSL3融合表达质粒构建 | 第36页 |
| 2.5 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 人CLPSL3的通路筛选及功能研究 | 第38-49页 |
| 3.1 引言 | 第38页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第38-40页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第39页 |
| 3.2.2 仪器 | 第39-40页 |
| 3.3 实验方法 | 第40-43页 |
| 3.3.1 细胞培养、传代及铺板 | 第40页 |
| 3.3.2 细胞转染 | 第40页 |
| 3.3.3 细胞收获、裂解、测板 | 第40-41页 |
| 3.3.4 cck8细胞活力检测 | 第41页 |
| 3.3.5 亚细胞定位 | 第41页 |
| 3.3.6 细胞转染 | 第41页 |
| 3.3.7 细胞浆蛋白提取 | 第41-42页 |
| 3.3.8 BCA蛋白定量 | 第42页 |
| 3.3.9 蛋白样品制备 | 第42页 |
| 3.3.10 Western blot检测 | 第42-43页 |
| 3.4 结果 | 第43-46页 |
| 3.4.1 双荧光素酶报告基因筛选通路 | 第43-44页 |
| 3.4.2 cck8检测细胞活性 | 第44-45页 |
| 3.4.3 hCLPSL3亚细胞定位 | 第45-46页 |
| 3.4.4 hCLPSL3的真核蛋白表达及分泌验证 | 第46页 |
| 3.5 讨论 | 第46-49页 |
| 第四章 总结与展望 | 第49-51页 |
| 4.1 总结 | 第49页 |
| 4.2 展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 附录 | 第57页 |
