| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第8-18页 |
| 1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第8页 |
| 1.2 非编码RNA 研究进展 | 第8-15页 |
| 1.2.1 长非编码RNA 的分类 | 第9-11页 |
| 1.2.2 长非编码RNA 与表观遗传学 | 第11-13页 |
| 1.2.3 长非编码RNA 与疾病 | 第13-15页 |
| 1.3 小鼠 Dlk1-Dio3 印记基因簇 | 第15-17页 |
| 1.4 本课题的主要研究内容 | 第17-18页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 实验用动物、细胞系和菌株及质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 实验用引物 | 第18页 |
| 2.1.3 工具酶与试剂盒 | 第18-19页 |
| 2.1.4 实验常用试剂 | 第19页 |
| 2.1.5 实验主要仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-26页 |
| 2.2.1 小鼠卵母细胞与着床前各时期胚胎的获取 | 第19-20页 |
| 2.2.2 胚胎或细胞基因组 DNA 的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.3 Trizol 法提取细胞RNA 与反转录 cDNA | 第21-22页 |
| 2.2.4 探针制备 | 第22-23页 |
| 2.2.5 着床前全胚胎原位杂交 | 第23-24页 |
| 2.2.6 DNA 甲基化分析 | 第24页 |
| 2.2.7 甲基转移酶抑制剂 5Aza-dc 处理 T M3 细胞 | 第24-25页 |
| 2.2.8 大肠杆菌感受态 DH5α的制备 | 第25-26页 |
| 第3章 Dlk1-Dio3 基因簇 lncRNAs 在小鼠着床前胚胎的表达 | 第26-33页 |
| 3.1 引言 | 第26页 |
| 3.2 获取各早期胚胎 | 第26-27页 |
| 3.3 着床前全胚胎原位杂交方法优化 | 第27-28页 |
| 3.4 原位杂交分析 lncRNAs 早期胚胎表达 | 第28-31页 |
| 3.4.1 合成 lncRNAs 探针 | 第28-29页 |
| 3.4.2 原位杂交分析lncRNAs 在早期胚胎表达 | 第29-31页 |
| 3.5 本章讨论 | 第31-32页 |
| 3.6 本章小结 | 第32-33页 |
| 第4章 Dlk1-Dio3 基因簇 lncRNAs 基因表观调控研究 | 第33-38页 |
| 4.1 引言 | 第33页 |
| 4.2 Dlk1-Dio3 基因簇差异甲基化区甲基化体内分析 | 第33-36页 |
| 4.2.1 Dlk1-Dio3 基因簇 IG-DMR 、Gtl2-DMR 的 SNP 分析 | 第33-35页 |
| 4.2.2 Dlk1-Dio3 基因簇 IG-DMR 、Gtl2-DMR 在早期胚胎甲基化 | 第35-36页 |
| 4.3 本章讨论 | 第36页 |
| 4.4 本章小结 | 第36-38页 |
| 第5章 Dlk1-Dio3 基因簇lncRNAs 表观调控的体外研究 | 第38-41页 |
| 5.1 引言 | 第38页 |
| 5.2 TM3 细胞中lncRNAs 的表观调控 | 第38-40页 |
| 5.2.1 5-aza-CdR 处理 TM3 细胞后 lncRNA 的表达 | 第38-39页 |
| 5.2.2 5-aza-CdR 处理 TM3 细胞后 DMR 甲基化分析 | 第39-40页 |
| 5.3 本章小结 | 第40-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 展望 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 附录 I | 第50-51页 |
| 附录 II | 第51-52页 |
| 附录 III | 第52-53页 |
| 攻读学位期间发表的论文及其它成果 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
