摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词 | 第12-13页 |
前言 | 第13-20页 |
1. 鼠疫耶尔森氏菌 | 第13-14页 |
2. 噬菌体 | 第14-15页 |
3. 鼠疫噬菌体 | 第15-17页 |
4. 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
5. 本研究的内容 | 第18-20页 |
第一章 鼠疫菌耐受菌筛选和分析 | 第20-30页 |
1. 引言 | 第20-21页 |
2. 材料与方法 | 第21-25页 |
2.1 材料 | 第21页 |
2.1.1 菌株 | 第21页 |
2.1.2 主要试剂 | 第21页 |
2.1.3 主要仪器 | 第21页 |
2.2 方法 | 第21-25页 |
2.2.1 耐受菌诱导 | 第21页 |
2.2.2 DNA提取 | 第21-22页 |
2.2.3 测序及分析 | 第22页 |
2.2.4 确定筛选引物 | 第22-24页 |
2.2.5 确定突变基因顺序 | 第24-25页 |
3. 结果与讨论 | 第25-29页 |
3.1 耐受菌株的诱导 | 第25页 |
3.2 全基因组测序结果分析 | 第25-26页 |
3.3 引物的筛选 | 第26-28页 |
3.4 耐受菌基因突变顺序 | 第28-29页 |
4. 结论 | 第29-30页 |
第二章 基因修饰技术的建立与改进 | 第30-49页 |
1. 引言 | 第30-31页 |
2. 材料与方法 | 第31-44页 |
2.1 材料 | 第31-32页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第31页 |
2.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第31-32页 |
2.1.3 主要仪器 | 第32页 |
2.2 方法 | 第32-44页 |
2.2.1 采用两步重组的基因修饰 | 第32-41页 |
2.2.2 通过接合转移的基因修饰 | 第41-44页 |
3. 结果与讨论 | 第44-47页 |
3.1 通过两步基因重组的基因修饰 | 第44-46页 |
3.2 通过接合转移的基因修饰 | 第46-47页 |
4. 结论 | 第47-49页 |
第三章 鼠疫菌WaaA三个氨基酸缺失后发挥的抗噬菌体作用 | 第49-73页 |
1. 引言 | 第49-51页 |
2. 材料与方法 | 第51-62页 |
2.1 材料 | 第51-52页 |
2.1.1 菌株、噬菌体与质粒 | 第51页 |
2.1.2 主要试剂和试剂盒 | 第51-52页 |
2.1.3 主要仪器 | 第52页 |
2.1.4 蛋白buffer配方 | 第52页 |
2.2 方法 | 第52-62页 |
2.2.1 回补菌株的构建和验证 | 第52-53页 |
2.2.2 菌株与噬菌体相互作用的表型实验 | 第53-57页 |
2.2.3 LPS的提取与比较 | 第57-58页 |
2.2.4 蛋白生物信息学软件分析 | 第58页 |
2.2.5 圆二像色谱的验证 | 第58-62页 |
3. 结果 | 第62-71页 |
3.1 回补株的验证 | 第62-63页 |
3.2 感染能力 | 第63-64页 |
3.3 吸附效率 | 第64-65页 |
3.4 成斑能力 | 第65-66页 |
3.5 蛋白生物信息学分析结果与验证 | 第66页 |
3.6 LPS的提取结果 | 第66-71页 |
4. 讨论 | 第71-73页 |
第四章 鼠疫菌waaA,cmk,ail基因点缺失与抗噬菌体作用的关系 | 第73-95页 |
1. 引言 | 第73-75页 |
2. 材料与方法 | 第75-84页 |
2.1 材料 | 第75-76页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第75页 |
2.1.2 主要试剂与试剂盒 | 第75-76页 |
2.1.3 主要仪器 | 第76页 |
2.2 方法 | 第76-84页 |
2.2.1 菌株与噬菌体相互作用的表型实验 | 第76-77页 |
2.2.2 过表达菌株构建与验证 | 第77-84页 |
2.2.3 LC-MS/MS检测分析 | 第84页 |
2.2.4 生长曲线 | 第84页 |
3. 结果与讨论 | 第84-93页 |
3.1 蛋白质谱结果 | 第84-86页 |
3.2 吸附效率 | 第86-89页 |
3.3 成斑能力 | 第89-91页 |
3.4 感染能力 | 第91页 |
3.5 生长曲线 | 第91-93页 |
4. 结论 | 第93-95页 |
参考文献 | 第95-103页 |
附录 | 第103-105页 |
主要仪器 | 第103页 |
常用试剂及配制方法 | 第103-105页 |
个人简历 | 第105页 |
在学期间的研究成果目录 | 第105-106页 |
致谢 | 第106-108页 |
综述 | 第108-120页 |
参考文献 | 第116-120页 |
发表文章 | 第120-128页 |