英文缩略词 | 第8-9页 |
摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
第1章 文献综述 | 第16-26页 |
1. OCT4基因及蛋白简述 | 第16-19页 |
1.1 Oct4:POU蛋白家族的成员之一 | 第16页 |
1.2 Oct4在不同物种间的表达模式 | 第16-18页 |
1.3 不同剪接方式形成的Oct4蛋白剪接体,及各剪接体的生物学功能 | 第18-19页 |
2. OCT4蛋白功能研究现状 | 第19-21页 |
2.1 oct4基因的表达是细胞维持全能性的首要条件 | 第19页 |
2.2 胞内Oct4的含量对于细胞命运的决定 | 第19-20页 |
2.3 肿瘤发生与Oct4蛋白的联系 | 第20页 |
2.4 原始生殖干细胞中Oct4蛋白的作用 | 第20-21页 |
3. 不同物种间OCT4:EGFP转基因示踪系统的建立及应用 | 第21-22页 |
3.1 哺乳动物中Oct4:eGFP示踪系统的应用 | 第21-22页 |
3.2 硬骨鱼类中Oct4转基因品系的建立及研究进展 | 第22页 |
4. 基因编辑技术用于鱼类基因功能研究的现状 | 第22-24页 |
4.1 TALEN介导的基因编辑技术 | 第22-23页 |
4.2 基因编辑新技术CRISPER的发现及应用 | 第23页 |
4.3 Morpholino基因敲降技术的应用 | 第23-24页 |
5. 科学问题的提出和研究的目的及意义 | 第24-26页 |
第2章 罗非鱼Oct4的蛋白表达模式及多能性活性初探 | 第26-47页 |
1 前言 | 第26页 |
2 材料、仪器 | 第26-27页 |
2.1 实验动物 | 第26-27页 |
2.2 实验试剂和仪器 | 第27页 |
2.3 有关试剂的配制 | 第27页 |
3 实验方法 | 第27-36页 |
3.1 mRNA表达模式检测 | 第27-30页 |
3.2 蛋白表达模式检测 | 第30-35页 |
3.3 胚胎发育时期Oct4生物学功能检测 | 第35-36页 |
4 结果与分析 | 第36-44页 |
4.1 mRNA水平表达模式分析 | 第36-38页 |
4.2 蛋白水平表达模式分析 | 第38-41页 |
4.3 Oct4对胚胎发育及其培养细胞的影响 | 第41-44页 |
5 讨论 | 第44-47页 |
第3章 罗非鱼oct4的转录调控 | 第47-70页 |
1 前言 | 第47页 |
2 材料、仪器 | 第47-48页 |
2.1 实验动物 | 第47页 |
2.2 实验试剂和仪器 | 第47-48页 |
2.3 有关试剂的配制 | 第48页 |
3 实验方法 | 第48-57页 |
3.1 oct4基因启动子的分离 | 第48页 |
3.2 eGFP、luciferase表达载体与过表达载体的构建 | 第48-53页 |
3.3 体内pT2AL-Oroct4-EGFP活性检测 | 第53页 |
3.4 体外pT2AL-Oroct4-EGFP活性检测 | 第53-55页 |
3.5 启动子荧光素酶活性检测 | 第55-57页 |
4 结果与分析 | 第57-68页 |
4.1 oct4基因启动子分析结果 | 第57-59页 |
4.2 重组载体的构建 | 第59-61页 |
4.3 pT2AL-Oroct4-EGFP的活性检测 | 第61-65页 |
4.4 oct4不同长度启动子荧光素酶的活性检测 | 第65-66页 |
4.5 oct4转录活性检测 | 第66-68页 |
5 讨论 | 第68-70页 |
全文结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-75页 |
致谢 | 第75-78页 |
在读期间所发表的论文 | 第78-80页 |
附录 | 第80-87页 |
附录 1 有关试剂的配制 | 第80-85页 |
附录 2 有关试剂的配制 | 第85-87页 |