| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| 1.1 植物体内三酰甘油的合成及积累 | 第13-15页 |
| 1.1.1 脂肪酸的生物合成 | 第13-14页 |
| 1.1.2 TAG的合成 | 第14-15页 |
| 1.1.3 三酰甘油的积累 | 第15页 |
| 1.2 PDAT1基因的研究概况 | 第15-18页 |
| 1.2.1 PDAT介导的代谢途径的发现 | 第15-16页 |
| 1.2.2 在拟南芥中对PDAT1基因功能的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.3 在其它物种中关于PDAT基因的研究 | 第17-18页 |
| 1.3 白菜型油菜及其基因组研究进展 | 第18页 |
| 1.4 本研究的目的意义 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-31页 |
| 2.1 材料、试剂与仪器 | 第20页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第20页 |
| 2.1.2 试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 实验所用仪器 | 第20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-31页 |
| 2.2.1 RNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.2 cDNA的获得及检测 | 第21-22页 |
| 2.2.3 克隆BrPDAT1基因引物的设计 | 第22页 |
| 2.2.4 白菜型油菜PDAT1基因的克隆 | 第22页 |
| 2.2.5 PCR产物的回收 | 第22-23页 |
| 2.2.6 回收的基因片段末端加碱基dA | 第23页 |
| 2.2.7 克隆载体的酶切 | 第23页 |
| 2.2.8 已酶切载体与目的基因的连接 | 第23页 |
| 2.2.9 感受态细胞的制备及克隆载体的转化 | 第23-24页 |
| 2.2.10 转化重组子的筛选与鉴定 | 第24页 |
| 2.2.11 质粒的提取 | 第24页 |
| 2.2.12 生物信息学分析 | 第24-25页 |
| 2.2.13 表达载体的构建 | 第25页 |
| 2.2.14 表达载体的鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.15 表达载体转化农杆菌GV3101感受态细胞单克隆的筛选 | 第26页 |
| 2.2.16 农杆菌介导的蘸花法转化拟南芥col-0 | 第26页 |
| 2.2.17 转基因植株的筛选 | 第26-27页 |
| 2.2.18 拟南芥叶片中总DNA的提取 | 第27页 |
| 2.2.19 转基因植株的PCR鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.20 转基因纯系中BrPDAT1表达的检测 | 第28页 |
| 2.2.21 转基因纯系植株莲座叶中总脂的提取、TAG的分离 | 第28-29页 |
| 2.2.22 气相样品的制备 | 第29-30页 |
| 2.2.23 气相色谱法分析样品中TAG的含量和脂肪酸组分 | 第30-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-45页 |
| 3.1 白菜型油菜茎生叶中总RNA的提取 | 第31页 |
| 3.2 RNA反转录得到cDNA的PCR检测 | 第31页 |
| 3.3 白菜型油菜PDAT1基因的克隆与序列分析 | 第31-32页 |
| 3.4 白菜型油菜PDAT1基因阳性克隆的鉴定 | 第32-34页 |
| 3.5 白菜型油菜PDAT1基因的生物信息学分析 | 第34-39页 |
| 3.5.1 BrPDAT1基因序列的分析 | 第34页 |
| 3.5.2 基本的理化性质分析 | 第34-35页 |
| 3.5.3 跨膜结构域分析 | 第35页 |
| 3.5.4 N端信号肽的预测 | 第35-36页 |
| 3.5.5 蛋白质的二级结构预测 | 第36-37页 |
| 3.5.6 蛋白质序列比对及保守结构域的预测 | 第37页 |
| 3.5.7 白菜型油菜PDAT1与其它磷脂二酰甘油酰基转移酶（PDAT1）亲缘关系的比较 | 第37-39页 |
| 3.6 植物表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 3.7 T1代转基因植株的筛选 | 第40-41页 |
| 3.7.1 T1代转基因植株的抗性筛选 | 第40-41页 |
| 3.7.2 T1代转基因植株的PCR鉴定 | 第41页 |
| 3.8 转基因纯系的确定 | 第41页 |
| 3.9 转基因纯系中BrPDAT1基因表达的检测 | 第41-42页 |
| 3.10 转基因纯系莲座叶中TAG含量的测定与脂肪酸组分的分析 | 第42-45页 |
| 3.10.1 转基因纯系莲座叶TAG含量的测定 | 第42-43页 |
| 3.10.2 转基因纯系莲座叶中脂肪酸的测定与组分变化分析 | 第43-45页 |
| 第四章 讨论 | 第45-47页 |
| 4.1 讨论 | 第45-47页 |
| 第五章 结论与展望 | 第47-49页 |
| 5.1 结论 | 第47页 |
| 5.2 展望 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
