| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 中英文缩写对照 | 第14-15页 |
| 引言 | 第15-17页 |
| 第一篇 文献综述 | 第17-50页 |
| 第1章 哺乳动物精子保存技术的意义、发展现状及存在问题 | 第17-25页 |
| 1 哺乳动物精子保存的目的和意义 | 第17页 |
| 2 哺乳动物精子保存技术的发展现状 | 第17-23页 |
| 2.1 精液低温保存技术发展现状 | 第17-21页 |
| 2.2 冷冻精液研究发展现状 | 第21-23页 |
| 3 马精子保存技术存在的问题 | 第23-25页 |
| 3.1 低温保存 | 第23页 |
| 3.2 冷冻保存 | 第23-25页 |
| 第2章 精液质量评价研究进展 | 第25-31页 |
| 1 宏观水平 | 第25-26页 |
| 1.1 精液的颜色、射精量及p H | 第25-26页 |
| 1.2 精子密度 | 第26页 |
| 2 精子运动状态 | 第26-28页 |
| 2.1 目测法 | 第26-27页 |
| 2.2 计算机辅助精子分析仪 | 第27-28页 |
| 3 精子结构完整性 | 第28-31页 |
| 3.1 精子畸形 | 第28页 |
| 3.2 质膜完整性 | 第28-29页 |
| 3.3 顶体完整率 | 第29页 |
| 3.4 线粒体功能 | 第29-30页 |
| 3.5 DNA完整性 | 第30-31页 |
| 第3章 影响精液体外保存的因素 | 第31-42页 |
| 1 低温保存 | 第31-36页 |
| 1.1 温度 | 第31-32页 |
| 1.2 pH | 第32页 |
| 1.3 能量物质 | 第32-33页 |
| 1.4 卵黄和奶 | 第33-34页 |
| 1.5 抗氧化剂 | 第34-36页 |
| 2 冷冻保存 | 第36-42页 |
| 2.1 抗冻剂冷冻保存的影响 | 第36-38页 |
| 2.2 降温速率的对冷冻效果的影响 | 第38页 |
| 2.3 精清浓度对精子低温保存和冷冻效果影响 | 第38-40页 |
| 2.4 抗冻蛋白对精子冷冻效果的影响 | 第40-42页 |
| 第4章 精子低温及冷冻保存损伤机制的研究进展 | 第42-46页 |
| 1 冷休克 | 第42-43页 |
| 2 脂质过氧化 | 第43页 |
| 3 蛋白质变性 | 第43-44页 |
| 4 冰晶损伤 | 第44-46页 |
| 第5章 马精子的生物学特性 | 第46-50页 |
| 1 形态特异性 | 第46页 |
| 2 质膜构成特异性 | 第46-47页 |
| 3 质膜功能特异性 | 第47-50页 |
| 第二篇 试验研究 | 第50-126页 |
| 第1章 处理方法对精子低温和冷冻保存效果的影响 | 第50-66页 |
| 1 材料与方法 | 第51-56页 |
| 1.1 仪器、耗材及试剂 | 第51-52页 |
| 1.2 试验动物 | 第52页 |
| 1.3 精液采集 | 第52-53页 |
| 1.3 实验设计（方案） | 第53-54页 |
| 1.4 精液质量评价 | 第54-56页 |
| 2 结果 | 第56-61页 |
| 2.1 马精子在不同pH下的存活情况 | 第56-57页 |
| 2.2 精清浓度对马精子低温保存效果的影响 | 第57-59页 |
| 2.3 精清浓度对马精子冷冻保存效果的影响 | 第59页 |
| 2.4 平衡时间对精子冷冻效果的影响 | 第59页 |
| 2.5 冷冻方法对马精子冷冻效果的影响 | 第59-60页 |
| 2.6 解冻程序对冻融后精子质量的影响 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-65页 |
| 3.1 pH对马精液低温保存效果的影响 | 第61-62页 |
| 3.2 精清浓度对马精子低温和冷冻保存效果的影响 | 第62-63页 |
| 3.3 平衡时间对精子冷冻效果的影响 | 第63-64页 |
| 3.4 冷冻方法对精子冷冻效果的影响 | 第64-65页 |
| 3.5 解冻程序对精子冷冻效果的影响 | 第65页 |
| 4 结论 | 第65-66页 |
| 第2章 稀释液组成对精液保存及冷冻效果的影响 | 第66-102页 |
| 1 材料方法 | 第68-77页 |
| 1.1 仪器、耗材及试剂 | 第68-70页 |
| 1.2 试验动物、精液采集、处理、质量评价及统计分析方法 | 第70-71页 |
| 1.3 融合蛋白His-Mpafp698的表达、SDS-PAGE检测、纯化及蛋白印迹分析 | 第71-72页 |
| 1.4 试验设计（方案） | 第72-77页 |
| 2 结果 | 第77-90页 |
| 2.1 不同糖对马精子低温保存及冷冻效果的影响 | 第77-80页 |
| 2.2 抗冻剂及抗冻剂组合对马精子冷冻效果的影响 | 第80-81页 |
| 2.3 卵黄成分、大豆卵磷脂及β-环糊精胆固醇马精子低温保存及冷冻效果的影响 | 第81-83页 |
| 2.4 SC和乳清粉对马精子低温保存及冷冻效果的影响 | 第83-85页 |
| 2.5 抗氧化剂对马精子低温保存及冷冻效果的影响 | 第85-88页 |
| 2.6 昆虫抗冻蛋白对马精子冷冻效果的影响 | 第88-90页 |
| 3 讨论 | 第90-100页 |
| 3.1 不同糖对马精子低温保存及冷冻效果的影响 | 第90-92页 |
| 3.2 抗冻剂及抗冻剂组合对马精子冷冻效果的影响 | 第92-93页 |
| 3.3 卵黄成分、大豆卵磷脂及β-环糊精胆固醇马精子低温保存及冷冻效果的影响 | 第93-95页 |
| 3.4 SC和乳清粉对马精子低温保存及冷冻效果的影响 | 第95-97页 |
| 3.5 抗氧化剂对马精子低温保存及冷冻效果的影响 | 第97-98页 |
| 3.6 昆虫抗冻蛋白对马精子冷冻效果的影响 | 第98-100页 |
| 4 结论 | 第100-102页 |
| 第3章 受胎验证 | 第102-112页 |
| 1 材料和方法 | 第102-107页 |
| 1.1 实验动物 | 第102-103页 |
| 1.2 精液的采集与处理 | 第103-105页 |
| 1.3 人工授精 | 第105-107页 |
| 2 结果 | 第107-108页 |
| 2.1 低温保存精液的受胎率验证 | 第107页 |
| 2.2 冻精受胎率验证 | 第107-108页 |
| 2.3 推广受胎验证 | 第108页 |
| 3 讨论 | 第108-112页 |
| 第4章 基于iTRAQ技术的马精子冻融前后差异蛋白鉴定 | 第112-126页 |
| 1 试验设计及技术路线 | 第113-114页 |
| 1.1 试验设计 | 第113页 |
| 1.2 技术路线 | 第113-114页 |
| 2 材料与方法 | 第114-116页 |
| 2.1 主要的试剂与仪器 | 第114页 |
| 2.2 精液采集 | 第114页 |
| 2.3 精液活力评价 | 第114页 |
| 2.4 精液冷冻 | 第114页 |
| 2.5 鲜、冻精体外存活时间 | 第114-115页 |
| 2.6 鲜、冻精样品的准备 | 第115页 |
| 2.7 iTRAQ具体操作 | 第115-116页 |
| 2.8 蛋白质鉴定及生物信息学分析 | 第116页 |
| 3 试验结果 | 第116-123页 |
| 3.1 冻精体外存活情况 | 第116页 |
| 3.2 蛋白质提取、定量及酶解结果 | 第116-118页 |
| 3.3 差异蛋白 | 第118-121页 |
| 3.4 GO功能分析结果 | 第121-122页 |
| 3.5 KEGG通路注释结果 | 第122-123页 |
| 4 讨论 | 第123-126页 |
| 全文结论 | 第126-127页 |
| 创新点 | 第127-128页 |
| 参考文献 | 第128-146页 |
| 致谢 | 第146-147页 |
| 附录 | 第147-149页 |
| 作者简介 | 第149-152页 |
| 石河子大学博士研究生学位论文导师评阅表 | 第152页 |
