摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
1 前言 | 第8-18页 |
1.1 木聚糖酶概述 | 第8-9页 |
1.2 木聚糖酶外源表达的研究现状 | 第9-13页 |
1.2.1 野生菌株生产木聚糖酶 | 第9页 |
1.2.2 大肠杆菌表达体系生产木聚糖酶 | 第9-10页 |
1.2.3 枯草芽胞杆菌表达体系生产木聚糖酶 | 第10页 |
1.2.4 毕赤酵母表达体系生产木聚糖酶 | 第10-13页 |
1.3 木聚糖酶的应用 | 第13-16页 |
1.3.1 木聚糖酶在纺织工业的应用 | 第13-14页 |
1.3.2 木聚糖酶在纺织工艺的作用机理 | 第14页 |
1.3.3 木聚糖酶在其他工业中的应用 | 第14-16页 |
1.4 立题背景及意义 | 第16页 |
1.5 主要研究内容 | 第16-17页 |
1.6 技术路线 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-36页 |
2.1 实验材料 | 第18-25页 |
2.1.1 菌种 | 第18页 |
2.1.2 试剂 | 第18-20页 |
2.1.3 主要仪器和设备 | 第20页 |
2.1.4 主要培养基 | 第20-21页 |
2.1.5 主要试剂 | 第21-22页 |
2.1.6 主要方法 | 第22-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-36页 |
2.2.1 重组毕赤酵母工程菌的构建 | 第25-26页 |
2.2.2 木聚糖酶的酶活测定 | 第26-28页 |
2.2.3 重组毕赤酵母工程菌的诱导表达及酶学性质检测 | 第28-29页 |
2.2.4 响应面法优化重组毕赤酵母工程菌产生木聚糖酶的诱导条件 | 第29-31页 |
2.2.5 发酵罐实验 | 第31-32页 |
2.2.6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第32页 |
2.2.7 蛋白浓度的测定 | 第32-33页 |
2.2.8 金属离子对重组木聚糖酶活力的影响 | 第33页 |
2.2.9 复合酶及纺织助剂对重组木聚糖酶活力的影响 | 第33-34页 |
2.2.10 重组木聚糖酶在纺织工艺中的棉籽壳去除应用 | 第34-36页 |
3 结果与讨论 | 第36-54页 |
3.1 重组毕赤酵母工程菌pPIC9K-XynG1-1-GS115的构建 | 第36-38页 |
3.1.1 重组质粒pPIC9K-XynG1-1的构建 | 第36-37页 |
3.1.2 PCR检验转化子 | 第37-38页 |
3.2 重组毕赤酵母工程菌产木聚糖酶的发酵条件优化 | 第38-47页 |
3.2.1 重组毕赤酵母工程菌的诱导表达 | 第38页 |
3.2.2 重组木聚糖酶的酶学性质检测 | 第38-40页 |
3.2.3 响应面法优化重组木聚糖酶的发酵条件 | 第40-47页 |
3.3 10 L发酵罐规模的重组木聚糖酶的高密度表达 | 第47-50页 |
3.3.1 重组毕赤酵母工程菌产木聚糖酶的生长曲线 | 第47-48页 |
3.3.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第48-49页 |
3.3.3 金属离子对重组木聚糖酶活性的影响 | 第49-50页 |
3.3.4 复合酶及纺织助剂对重组木聚糖酶活性的影响 | 第50页 |
3.4 重组木聚糖酶在纺织工艺中的棉籽壳去除应用 | 第50-54页 |
3.4.1 不同木聚糖酶添加量对棉籽壳去除率的影响 | 第50-51页 |
3.4.2 不同浸酶时间对棉籽壳去除率的影响 | 第51-52页 |
3.4.3 不同复合酶组合对棉籽壳去除率的影响 | 第52-54页 |
4 结论 | 第54-55页 |
5 展望 | 第55-56页 |
6 参考文献 | 第56-62页 |
7 攻读学位期间发表论文情况 | 第62-63页 |
8 致谢 | 第63-64页 |