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木聚糖酶XynG1-1在毕赤酵母中的表达及其纺织应用

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
1 前言第8-18页
    1.1 木聚糖酶概述第8-9页
    1.2 木聚糖酶外源表达的研究现状第9-13页
        1.2.1 野生菌株生产木聚糖酶第9页
        1.2.2 大肠杆菌表达体系生产木聚糖酶第9-10页
        1.2.3 枯草芽胞杆菌表达体系生产木聚糖酶第10页
        1.2.4 毕赤酵母表达体系生产木聚糖酶第10-13页
    1.3 木聚糖酶的应用第13-16页
        1.3.1 木聚糖酶在纺织工业的应用第13-14页
        1.3.2 木聚糖酶在纺织工艺的作用机理第14页
        1.3.3 木聚糖酶在其他工业中的应用第14-16页
    1.4 立题背景及意义第16页
    1.5 主要研究内容第16-17页
    1.6 技术路线第17-18页
2 材料与方法第18-36页
    2.1 实验材料第18-25页
        2.1.1 菌种第18页
        2.1.2 试剂第18-20页
        2.1.3 主要仪器和设备第20页
        2.1.4 主要培养基第20-21页
        2.1.5 主要试剂第21-22页
        2.1.6 主要方法第22-25页
    2.2 实验方法第25-36页
        2.2.1 重组毕赤酵母工程菌的构建第25-26页
        2.2.2 木聚糖酶的酶活测定第26-28页
        2.2.3 重组毕赤酵母工程菌的诱导表达及酶学性质检测第28-29页
        2.2.4 响应面法优化重组毕赤酵母工程菌产生木聚糖酶的诱导条件第29-31页
        2.2.5 发酵罐实验第31-32页
        2.2.6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第32页
        2.2.7 蛋白浓度的测定第32-33页
        2.2.8 金属离子对重组木聚糖酶活力的影响第33页
        2.2.9 复合酶及纺织助剂对重组木聚糖酶活力的影响第33-34页
        2.2.10 重组木聚糖酶在纺织工艺中的棉籽壳去除应用第34-36页
3 结果与讨论第36-54页
    3.1 重组毕赤酵母工程菌pPIC9K-XynG1-1-GS115的构建第36-38页
        3.1.1 重组质粒pPIC9K-XynG1-1的构建第36-37页
        3.1.2 PCR检验转化子第37-38页
    3.2 重组毕赤酵母工程菌产木聚糖酶的发酵条件优化第38-47页
        3.2.1 重组毕赤酵母工程菌的诱导表达第38页
        3.2.2 重组木聚糖酶的酶学性质检测第38-40页
        3.2.3 响应面法优化重组木聚糖酶的发酵条件第40-47页
    3.3 10 L发酵罐规模的重组木聚糖酶的高密度表达第47-50页
        3.3.1 重组毕赤酵母工程菌产木聚糖酶的生长曲线第47-48页
        3.3.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第48-49页
        3.3.3 金属离子对重组木聚糖酶活性的影响第49-50页
        3.3.4 复合酶及纺织助剂对重组木聚糖酶活性的影响第50页
    3.4 重组木聚糖酶在纺织工艺中的棉籽壳去除应用第50-54页
        3.4.1 不同木聚糖酶添加量对棉籽壳去除率的影响第50-51页
        3.4.2 不同浸酶时间对棉籽壳去除率的影响第51-52页
        3.4.3 不同复合酶组合对棉籽壳去除率的影响第52-54页
4 结论第54-55页
5 展望第55-56页
6 参考文献第56-62页
7 攻读学位期间发表论文情况第62-63页
8 致谢第63-64页

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