| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第15-34页 |
| 1.1 糖尿病 | 第15-20页 |
| 1.1.1 概述 | 第15页 |
| 1.1.2 糖尿病的诊断 | 第15-17页 |
| 1.1.3 糖尿病的分类 | 第17-20页 |
| 1.2 2型糖尿病的致病因素 | 第20-27页 |
| 1.2.1 与2型糖尿病相关的环境因素和生活方式 | 第21-22页 |
| 1.2.2 与2型糖尿病相关的核易感基因 | 第22-26页 |
| 1.2.3 与2型糖尿病相关的DNA甲基化 | 第26-27页 |
| 1.3 线粒体与2型糖尿病 | 第27-34页 |
| 1.3.1 线粒体 | 第27-28页 |
| 1.3.2 与2型糖尿病相关的mtDNA突变 | 第28-30页 |
| 1.3.3 线粒体tRNA是线粒体糖尿病等疾病的突变热点区域 | 第30-32页 |
| 1.3.4 线粒体ROS与2型糖尿病 | 第32-34页 |
| 第二章 实验材料与实验方法 | 第34-66页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-37页 |
| 2.1.1 样本 | 第34页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第34-35页 |
| 2.1.3 试剂盒 | 第35页 |
| 2.1.4 试剂 | 第35-36页 |
| 2.1.5 试剂的配制方法 | 第36-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-66页 |
| 2.2.1 采集外周血样本 | 第37页 |
| 2.2.2 永生化淋巴细胞系的建立 | 第37-39页 |
| 2.2.3 线粒体DNA的突变分析 | 第39-45页 |
| 2.2.4 线粒体tRNA稳态及氨酰化水平的检测 | 第45-48页 |
| 2.2.5 线粒体蛋白质表达水平的检测 | 第48-54页 |
| 2.2.6 氧耗实验 | 第54-55页 |
| 2.2.7 细胞ATP产量的测定 | 第55页 |
| 2.2.8 线粒体活性氧产量的测定 | 第55-56页 |
| 2.2.9 线粒体膜电位的检测 | 第56-57页 |
| 2.2.10 线粒体呼吸链复合体酶活性的测定 | 第57-62页 |
| 2.2.11 野生型tRNA~(Glu)及A14692G突变体的体外转录 | 第62-63页 |
| 2.2.12 hmtRNA~(Glu)野生型及突变体熔点(Tm值)的测定 | 第63-64页 |
| 2.2.13 利用CMCT/反转录反应检测tRNA 55位假尿嘧啶修饰 | 第64-65页 |
| 2.2.14 血管生成素对tRNA的切割实验 | 第65-66页 |
| 第三章 实验结果 | 第66-98页 |
| 3.1 携带T10003C突变的家系研究 | 第66-81页 |
| 3.1.1 母系遗传糖尿病家系的临床表现 | 第66-69页 |
| 3.1.2 母系遗传糖尿病的发生与线粒体tRNA~(Gly) 10003T>C突变相关 | 第69-75页 |
| 3.1.3 线粒体tRNA~(Glu) T10003C突变为同质性突变 | 第75-76页 |
| 3.1.4 T10003C突变影响tRNA~(Glu)的二级结构并且降低tRNA~(Glu)的稳态水平 | 第76-78页 |
| 3.1.5 T10003C突变降低线粒体蛋白质表达水平 | 第78-79页 |
| 3.1.6 携带线粒体tRNA~(Glu) 10003T>C突变的永生化淋巴细胞系氧气消耗速率降低 | 第79-81页 |
| 3.2 携带A14692G突变的家系研究 | 第81-98页 |
| 3.2.1 母系遗传糖尿病家系的临床表现 | 第81-83页 |
| 3.2.2 母系遗传糖尿病的发生与线粒体tRNA~(Glu)14692A>G突变相关 | 第83-86页 |
| 3.2.3 A14692G突变对tRNA~(Glu)假尿嘧啶修饰影响的检测 | 第86-88页 |
| 3.2.4 人线粒体tRNA~(Glu)野生型与A14692G突变体热力学稳定性测定 | 第88-91页 |
| 3.2.5 含有tRNA~(Glu)A14692G位点突变的细胞的生物学功能分析 | 第91-98页 |
| 3.2.5.1 携带tRNA~(Glu)A14692G突变的细胞系的线粒体tRNA稳态水平显著降低 | 第91-92页 |
| 3.2.5.2 A14692G导致线粒体蛋白质合成缺陷 | 第92-93页 |
| 3.2.5.3 A14692G导致细胞株出现呼吸缺陷 | 第93-95页 |
| 3.2.5.4 A14692G突变降低了线粒体ATP的产量 | 第95页 |
| 3.2.5.5 A14692G突变增加了细胞线粒体ROS的产生 | 第95页 |
| 3.2.5.6 A14692G突变降低了细胞线粒体的膜电势 | 第95-98页 |
| 第四章 讨论与总结 | 第98-104页 |
| 第五章 研究中存在的问题与展望 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-116页 |
| 附录 | 第116-119页 |
| 博士期间发表的论文 | 第119页 |
