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锁掷酵母中圆酵母素和红酵母红素对前列腺疾病干预机制的研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 前言第12-22页
    1.1 前列腺疾病概述第12-15页
        1.1.1 前列腺疾病流行病学第12-13页
        1.1.2 前列腺疾病的发病机理第13-15页
    1.2 前列腺疾病的治疗与预防第15-17页
        1.2.1 前列腺疾病的治疗第15-16页
        1.2.2 前列腺疾病的膳食预防第16-17页
    1.3 圆酵母素及红酵母红素第17-19页
        1.3.1 概述第17-19页
        1.3.2 研究基础第19页
    1.4 研究目的及意义第19-20页
    1.5 研究内容第20-22页
        1.5.1 研究思路第20页
        1.5.2 研究内容第20-22页
第二章 锁掷酵母中红酵母红素的纯化、制备第22-31页
    2.1 引言第22页
    2.2 材料与仪器第22-23页
        2.2.1 实验材料与试剂第22页
        2.2.2 主要仪器第22-23页
    2.3 实验方法第23-24页
        2.3.1 主要溶液的配置第23页
        2.3.2 红酵母红素的提取分离第23页
        2.3.3 红酵母红素的纯化条件选择第23-24页
        2.3.4 高效液相及紫外分析第24页
        2.3.5 质谱分析第24页
        2.3.6 红外分析第24页
        2.3.7 拉曼分析第24页
    2.4 结果与讨论第24-29页
        2.4.1 红酵母红素的纯化第24-25页
        2.4.2 高效液相及紫外图谱分析第25-27页
        2.4.3 质谱结果分析第27-28页
        2.4.4 红外图谱分析第28-29页
        2.4.5 拉曼图谱分析第29页
    2.5 本章小结第29-31页
第三章 圆酵母素与红酵母红素对WPMY-1细胞氧化损伤的保护作用及机制探讨第31-49页
    3.1 引言第31页
    3.2 材料与仪器第31-32页
        3.2.1 实验材料与试剂第31-32页
        3.2.2 主要仪器第32页
    3.3 实验方法第32-36页
        3.3.1 主要溶液的配置第32页
        3.3.2 细胞培养第32页
        3.3.3 细胞生长曲线的测定第32-33页
        3.3.4 载体溶剂的选择第33页
        3.3.5 H_2O_2损伤浓度的确定第33页
        3.3.6 类胡萝卜素作用浓度的选择第33页
        3.3.7 氧化损伤模型的建立第33页
        3.3.8 模型建立第33-34页
        3.3.9 倒置显微镜观察WPMY-1细胞形态的变化第34页
        3.3.10 DCFH-DA荧光染色法检测WPMY-1细胞内ROS第34页
        3.3.11 WPMY-1细胞抗氧化指标的测定第34页
        3.3.12 激光共聚焦显微镜观察WPMY-1细胞核的变化第34页
        3.3.13 WPMY-1细胞凋亡的检测第34-35页
        3.3.14 WPMY-1细胞内抗凋亡相关基因mRNA表达的检测第35-36页
        3.3.15 数据处理与分析第36页
    3.4 结果与讨论第36-48页
        3.4.1 H_2O_2诱导氧化损伤WPMY-1细胞模型的建立第36-38页
        3.4.2 类胡萝卜素对氧化受损WPMY-1细胞内抗氧化体系干预第38-43页
        3.4.3 类胡萝卜素对氧化受损WPMY-1细胞凋亡干预及其作用机制第43-48页
    3.5 本章小结第48-49页
第四章 圆酵母素及红酵母红素对人前列腺癌细胞LNCaP及PC-3的作用及机制研究第49-71页
    4.1 引言第49页
    4.2 材料与仪器第49-50页
        4.2.1 实验材料与试剂第49-50页
        4.2.2 主要仪器第50页
    4.3 实验方法第50-53页
        4.3.1 主要溶液的配置第50页
        4.3.2 细胞培养第50页
        4.3.3 细胞生长曲线的测定及载体溶剂的选择第50页
        4.3.4 WST-1测定LNCaP及PC-3细胞存活率第50页
        4.3.5 倒置显微镜观察两种细胞形态的变化第50页
        4.3.6 激光共聚焦显微镜观察两种细胞核的变化第50-51页
        4.3.7 AnnexinV-FITC/PI双染法检测LNCaP及PC-3细胞凋亡率的变化第51页
        4.3.8 JC-1荧光染色法测定LNCaP及PC-3细胞线粒体膜电位(MMP)的变化第51页
        4.3.9 Fluo-3/AM荧光染色法检测LNCaP及PC-3细胞质基质中Ca2+浓度的变化第51页
        4.3.10 实时荧光定量PCR法检测LNCaP及PC-3细胞内凋亡相关基因mRNA表达水平第51-52页
        4.3.11 WB检测LNCaP及PC-3细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax表达的变化第52-53页
        4.3.12 LNCaP细胞中AR及PSA表达水平的检测第53页
        4.3.13 数据处理与分析第53页
    4.4 结果与讨论第53-69页
        4.4.1 类胡萝卜素对两种前列腺癌细胞凋亡的干预第53-63页
        4.4.2 类胡萝卜素干预对两种前列腺癌细胞中诱导凋亡的线粒体途径的作用第63-68页
        4.4.3 类胡萝卜素干预对LNCaP细胞中诱导凋亡的AR及PSA途径的作用第68-69页
    4.5 本章小结第69-71页
第五章 圆酵母素及红酵母红素对前列腺癌PC-3细胞株裸鼠移植瘤的作用及机制研究第71-82页
    5.1 引言第71页
    5.2 材料与仪器第71-72页
        5.2.1 实验材料与试剂第71页
        5.2.2 主要仪器第71-72页
    5.3 实验方法第72-73页
        5.3.1 主要溶液的配置第72页
        5.3.2 细胞培养第72页
        5.3.3 动物饲养第72页
        5.3.4 肿瘤模型的建立第72页
        5.3.5 实验动物的分组及处理第72页
        5.3.6 观察指标第72-73页
        5.3.7 肿瘤组织的H&E染色第73页
        5.3.8 实时荧光定量PCR法检测肿瘤组织中凋亡相关基因mRNA表达水平第73页
        5.3.9 IHC检测肿瘤组织中凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax表达第73页
        5.3.10 数据处理及分析第73页
    5.4 结果与讨论第73-81页
        5.4.1 类胡萝卜素剂量的确定第73-74页
        5.4.2 实验动物的体重变化及生长状况第74-75页
        5.4.3 裸鼠异种移植肿瘤生长状况第75-76页
        5.4.4 肿瘤组织的病理变化第76-77页
        5.4.5 类胡萝卜素干预对肿瘤组织中凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax表达的影响第77-79页
        5.4.6 类胡萝卜素作用对肿瘤组织中诱导凋亡的线粒体途径其他相关基因mRNA表达水平的影响第79-81页
    5.5 本章小结第81-82页
主要结论与展望第82-84页
    主要结论第82-83页
    展望第83-84页
论文主要创新点第84-85页
致谢第85-86页
参考文献第86-97页
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文第97页
    攻读博士期间发表的和学位论文相关论文及成果第97页
    其他成果第97页

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