摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第12-22页 |
1.1 前列腺疾病概述 | 第12-15页 |
1.1.1 前列腺疾病流行病学 | 第12-13页 |
1.1.2 前列腺疾病的发病机理 | 第13-15页 |
1.2 前列腺疾病的治疗与预防 | 第15-17页 |
1.2.1 前列腺疾病的治疗 | 第15-16页 |
1.2.2 前列腺疾病的膳食预防 | 第16-17页 |
1.3 圆酵母素及红酵母红素 | 第17-19页 |
1.3.1 概述 | 第17-19页 |
1.3.2 研究基础 | 第19页 |
1.4 研究目的及意义 | 第19-20页 |
1.5 研究内容 | 第20-22页 |
1.5.1 研究思路 | 第20页 |
1.5.2 研究内容 | 第20-22页 |
第二章 锁掷酵母中红酵母红素的纯化、制备 | 第22-31页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 材料与仪器 | 第22-23页 |
2.2.1 实验材料与试剂 | 第22页 |
2.2.2 主要仪器 | 第22-23页 |
2.3 实验方法 | 第23-24页 |
2.3.1 主要溶液的配置 | 第23页 |
2.3.2 红酵母红素的提取分离 | 第23页 |
2.3.3 红酵母红素的纯化条件选择 | 第23-24页 |
2.3.4 高效液相及紫外分析 | 第24页 |
2.3.5 质谱分析 | 第24页 |
2.3.6 红外分析 | 第24页 |
2.3.7 拉曼分析 | 第24页 |
2.4 结果与讨论 | 第24-29页 |
2.4.1 红酵母红素的纯化 | 第24-25页 |
2.4.2 高效液相及紫外图谱分析 | 第25-27页 |
2.4.3 质谱结果分析 | 第27-28页 |
2.4.4 红外图谱分析 | 第28-29页 |
2.4.5 拉曼图谱分析 | 第29页 |
2.5 本章小结 | 第29-31页 |
第三章 圆酵母素与红酵母红素对WPMY-1细胞氧化损伤的保护作用及机制探讨 | 第31-49页 |
3.1 引言 | 第31页 |
3.2 材料与仪器 | 第31-32页 |
3.2.1 实验材料与试剂 | 第31-32页 |
3.2.2 主要仪器 | 第32页 |
3.3 实验方法 | 第32-36页 |
3.3.1 主要溶液的配置 | 第32页 |
3.3.2 细胞培养 | 第32页 |
3.3.3 细胞生长曲线的测定 | 第32-33页 |
3.3.4 载体溶剂的选择 | 第33页 |
3.3.5 H_2O_2损伤浓度的确定 | 第33页 |
3.3.6 类胡萝卜素作用浓度的选择 | 第33页 |
3.3.7 氧化损伤模型的建立 | 第33页 |
3.3.8 模型建立 | 第33-34页 |
3.3.9 倒置显微镜观察WPMY-1细胞形态的变化 | 第34页 |
3.3.10 DCFH-DA荧光染色法检测WPMY-1细胞内ROS | 第34页 |
3.3.11 WPMY-1细胞抗氧化指标的测定 | 第34页 |
3.3.12 激光共聚焦显微镜观察WPMY-1细胞核的变化 | 第34页 |
3.3.13 WPMY-1细胞凋亡的检测 | 第34-35页 |
3.3.14 WPMY-1细胞内抗凋亡相关基因mRNA表达的检测 | 第35-36页 |
3.3.15 数据处理与分析 | 第36页 |
3.4 结果与讨论 | 第36-48页 |
3.4.1 H_2O_2诱导氧化损伤WPMY-1细胞模型的建立 | 第36-38页 |
3.4.2 类胡萝卜素对氧化受损WPMY-1细胞内抗氧化体系干预 | 第38-43页 |
3.4.3 类胡萝卜素对氧化受损WPMY-1细胞凋亡干预及其作用机制 | 第43-48页 |
3.5 本章小结 | 第48-49页 |
第四章 圆酵母素及红酵母红素对人前列腺癌细胞LNCaP及PC-3的作用及机制研究 | 第49-71页 |
4.1 引言 | 第49页 |
4.2 材料与仪器 | 第49-50页 |
4.2.1 实验材料与试剂 | 第49-50页 |
4.2.2 主要仪器 | 第50页 |
4.3 实验方法 | 第50-53页 |
4.3.1 主要溶液的配置 | 第50页 |
4.3.2 细胞培养 | 第50页 |
4.3.3 细胞生长曲线的测定及载体溶剂的选择 | 第50页 |
4.3.4 WST-1测定LNCaP及PC-3细胞存活率 | 第50页 |
4.3.5 倒置显微镜观察两种细胞形态的变化 | 第50页 |
4.3.6 激光共聚焦显微镜观察两种细胞核的变化 | 第50-51页 |
4.3.7 AnnexinV-FITC/PI双染法检测LNCaP及PC-3细胞凋亡率的变化 | 第51页 |
4.3.8 JC-1荧光染色法测定LNCaP及PC-3细胞线粒体膜电位(MMP)的变化 | 第51页 |
4.3.9 Fluo-3/AM荧光染色法检测LNCaP及PC-3细胞质基质中Ca2+浓度的变化 | 第51页 |
4.3.10 实时荧光定量PCR法检测LNCaP及PC-3细胞内凋亡相关基因mRNA表达水平 | 第51-52页 |
4.3.11 WB检测LNCaP及PC-3细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax表达的变化 | 第52-53页 |
4.3.12 LNCaP细胞中AR及PSA表达水平的检测 | 第53页 |
4.3.13 数据处理与分析 | 第53页 |
4.4 结果与讨论 | 第53-69页 |
4.4.1 类胡萝卜素对两种前列腺癌细胞凋亡的干预 | 第53-63页 |
4.4.2 类胡萝卜素干预对两种前列腺癌细胞中诱导凋亡的线粒体途径的作用 | 第63-68页 |
4.4.3 类胡萝卜素干预对LNCaP细胞中诱导凋亡的AR及PSA途径的作用 | 第68-69页 |
4.5 本章小结 | 第69-71页 |
第五章 圆酵母素及红酵母红素对前列腺癌PC-3细胞株裸鼠移植瘤的作用及机制研究 | 第71-82页 |
5.1 引言 | 第71页 |
5.2 材料与仪器 | 第71-72页 |
5.2.1 实验材料与试剂 | 第71页 |
5.2.2 主要仪器 | 第71-72页 |
5.3 实验方法 | 第72-73页 |
5.3.1 主要溶液的配置 | 第72页 |
5.3.2 细胞培养 | 第72页 |
5.3.3 动物饲养 | 第72页 |
5.3.4 肿瘤模型的建立 | 第72页 |
5.3.5 实验动物的分组及处理 | 第72页 |
5.3.6 观察指标 | 第72-73页 |
5.3.7 肿瘤组织的H&E染色 | 第73页 |
5.3.8 实时荧光定量PCR法检测肿瘤组织中凋亡相关基因mRNA表达水平 | 第73页 |
5.3.9 IHC检测肿瘤组织中凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax表达 | 第73页 |
5.3.10 数据处理及分析 | 第73页 |
5.4 结果与讨论 | 第73-81页 |
5.4.1 类胡萝卜素剂量的确定 | 第73-74页 |
5.4.2 实验动物的体重变化及生长状况 | 第74-75页 |
5.4.3 裸鼠异种移植肿瘤生长状况 | 第75-76页 |
5.4.4 肿瘤组织的病理变化 | 第76-77页 |
5.4.5 类胡萝卜素干预对肿瘤组织中凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax表达的影响 | 第77-79页 |
5.4.6 类胡萝卜素作用对肿瘤组织中诱导凋亡的线粒体途径其他相关基因mRNA表达水平的影响 | 第79-81页 |
5.5 本章小结 | 第81-82页 |
主要结论与展望 | 第82-84页 |
主要结论 | 第82-83页 |
展望 | 第83-84页 |
论文主要创新点 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-97页 |
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第97页 |
攻读博士期间发表的和学位论文相关论文及成果 | 第97页 |
其他成果 | 第97页 |