| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 引言 | 第10页 |
| 1.2 L-鸟氨酸的性质及功能应用 | 第10-12页 |
| 1.2.1 L-鸟氨酸的结构及其性质 | 第10页 |
| 1.2.2 L-鸟氨酸在生物体中的代谢 | 第10-11页 |
| 1.2.3 L-鸟氨酸功能及应用 | 第11-12页 |
| 1.3 精氨酸酶的研究概况 | 第12-13页 |
| 1.3.1 精氨酸酶的功能 | 第12-13页 |
| 1.3.2 精氨酸酶的性质研究及利用 | 第13页 |
| 1.4 L-鸟氨酸的制备 | 第13-14页 |
| 1.4.1 化学合成法 | 第13页 |
| 1.4.2 微生物发酵法 | 第13-14页 |
| 1.4.3 酶催化法 | 第14页 |
| 1.5 L-鸟氨酸生产的国内外研究进展 | 第14-16页 |
| 1.5.1 L-鸟氨酸生产的国外研究进展 | 第14-15页 |
| 1.5.2 L-鸟氨酸生产的国内研究进展 | 第15-16页 |
| 1.6 论文研究内容 | 第16-18页 |
| 1.6.1 论文立题背景和研究意义 | 第16页 |
| 1.6.2 论文研究内容 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 引物 | 第18页 |
| 2.1.3 培养基与培养条件 | 第18-19页 |
| 2.1.4 主要实验试剂 | 第19页 |
| 2.1.5 相关试剂的配制 | 第19-20页 |
| 2.1.6 主要实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-26页 |
| 2.2.1 基因组的提取 | 第21页 |
| 2.2.2 目的基因的克隆 | 第21页 |
| 2.2.3 E. coli感受态细胞的制备和转化方法 | 第21页 |
| 2.2.4 重组表达载体的构建 | 第21-22页 |
| 2.2.5 重组菌的构建 | 第22页 |
| 2.2.6 重组菌的表达及酶活分析 | 第22页 |
| 2.2.7 精氨酸酶的纯化及酶学性质分析 | 第22-23页 |
| 2.2.8 两株重组菌转化L-精氨酸的验证 | 第23页 |
| 2.2.9 全细胞转化法生产L-鸟氨酸的条件优化 | 第23-24页 |
| 2.2.10 全细胞转化法生产L-鸟氨酸 | 第24页 |
| 2.2.11 微生物发酵法生产L-鸟氨酸 | 第24-25页 |
| 2.2.12 氨基酸分析方法 | 第25-26页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第26-47页 |
| 3.1 重组菌B. subtilis 168/ p MA5-arg I和C. crenatum SYPA5-5/p XMJ19-arg I的构建及其功能验证 | 第26-31页 |
| 3.1.1 精氨酸酶基因arg I的克隆及序列分析 | 第26页 |
| 3.1.2 重组质粒p MA5-arg I、p XMJ19-arg I的构建 | 第26-28页 |
| 3.1.3 arg I在B. subtilis 168 中的表达及酶活分析 | 第28页 |
| 3.1.4 arg I在C. crenatum SYPA5-5 中的表达及酶活分析 | 第28-29页 |
| 3.1.5 重组菌B. subtilis 168/p MA5-arg I转化L-精氨酸的初步验证 | 第29-30页 |
| 3.1.6 重组菌C. crenatum SYPA5-5/p XMJ19-arg I转化L-精氨酸的初步验证 | 第30-31页 |
| 3.2 精氨酸酶的纯化以及酶学性质研究 | 第31-33页 |
| 3.2.1 精氨酸酶的纯化 | 第31页 |
| 3.2.2 精氨酸酶的最适温度和最适p H | 第31页 |
| 3.2.3 精氨酸酶的温度稳定性和p H稳定性 | 第31-32页 |
| 3.2.4 金属离子对精氨酸酶酶活的影响 | 第32页 |
| 3.2.5 精氨酸酶的反应动力学常数测定 | 第32-33页 |
| 3.3 B. subtilis 168/p MA5-arg I全细胞转化法生产L-鸟氨酸 | 第33-38页 |
| 3.3.1 转化温度的优化 | 第33页 |
| 3.3.2 转化p H的优化 | 第33-34页 |
| 3.3.3 底物L-精氨酸添加浓度的优化 | 第34页 |
| 3.3.4 Mn~(2+) 添加量的优化 | 第34-35页 |
| 3.3.5 转化缓冲液的优化 | 第35-36页 |
| 3.3.6 分批次补加底物L-精氨酸全细胞转化法生产L-鸟氨酸 | 第36-37页 |
| 3.3.7 固定化细胞批次转化法生产L-鸟氨酸 | 第37-38页 |
| 3.4 C. crenatum SYPA5-5/p XMJ19-arg I一步发酵法生产L-鸟氨酸 | 第38-41页 |
| 3.4.1 C. crenatum SYPA5-5/p XMJ19-arg I摇瓶发酵生产L-鸟氨酸 | 第38页 |
| 3.4.2 IPTG添加时间对发酵法生产L-鸟氨酸的影响 | 第38-39页 |
| 3.4.3 双阶段p H调控策略发酵生产L-鸟氨酸 | 第39-41页 |
| 3.5 C. crenatum SYPA 5-5 与B. subtilis 168/p MA5-arg I混菌发酵法生产L-鸟氨酸 | 第41-47页 |
| 3.5.1 混菌发酵生产L-鸟氨酸的初步研究 | 第41-42页 |
| 3.5.2 B. subtilis 168/p MA5-arg I添加时间对L-鸟氨酸生产的影响 | 第42-44页 |
| 3.5.3 菌株添加比例对L-鸟氨酸生产的影响 | 第44-45页 |
| 3.5.4 5-L发酵罐中混菌发酵法生产L-鸟氨酸 | 第45-47页 |
| 主要结论和展望 | 第47-49页 |
| 主要结论 | 第47-48页 |
| 展望 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第53页 |
